生活启示录范文1
一、寻找的寓言：婚姻的解体与重组
寻找，是文学永恒的母题。真实的生活、幸福的渴望、情感的追求是任何时代人们的共同经历。每一个人在感情这条路上都会寻寻觅觅，且都有追求和选择幸福的权利，这就是《生活启示录》想着重表现的。所有有关寻找的叙事其内在的核心和主旨无一不是在寻找自我，只不过这种带有寓意式的寻找必然成为个体自我实现的艰难路途，需要借用一定的外部因素来达到自我的一种体悟和升华。《生活启示录》处处可见大家寻觅的身影：于小强与刘光耀、刘光耀与兰馨、于小强与鲍家明、鲍家明与杨嘟嘟、芳芳与小胖，在婚姻的解体与重组中、在彼此的分分合合中充满着寻找式的寓言，对自我内心的追寻、对幸福婚姻的寻找，对梦想的追求，在这个寻找的过程中逐渐领悟到婚姻的本质以及人生的意义。于小强与刘光耀的婚姻是处于围城里人们生活状态的一种很真实的体现。伴随着婚姻而来的不仅是爱情的幸福和甜蜜，更多的是生活的平淡、琐碎以及莫名的虚无。因为个体主观的判断、想象和欲求与客观世界相差甚远，个体既不能完全体悟婚姻中的理解与包容，又不能将自己放逐于社会秩序之外，构成夫妻双方的焦虑。于小强7年的全职太太生活，照顾丈夫，孝敬婆婆，围绕锅碗瓢盆，事无巨细地履行着作为一个妻子、一个儿媳的义务，看似幸福美满的生活其实暗潮涌动，危机四伏。事业有成的丈夫和刁蛮任性的婆婆成为于小强生活的全部，生孩子成了她唯一能体现价值的途径，犹如笼中的金丝雀，美丽却不自由。长时间的脱离社会，脱离工作、失去自我使得夫妻之间的无语和隔阂在所难免，最终以丈夫的出轨收场。遇到鲍家明的于小强，生活有了一个新的开始，我由我自己支配，我对我自己负责，自我意识逐渐地觉醒，也在不断的反思中重新找回了自我，有凤凰涅，浴火重生之势。人到中年，对人生，学会了从容和淡定，对感情，学会了随缘和惜缘。感情虽不如年轻时期的你侬我侬，却也懂得了迁就、退让和付出。这或许是时光给予的最好的馈赠。与鲍家明在一起的于小强，依靠自己、坚信梦想、相信爱情，或干练、或妩媚、或纯真，由内而外散发着一种自信之美。生活艰辛却充满快乐，爱得坚定而洒脱。于小强对鲍家明之所以能爱得洒脱，并不是因为爱得不够深，反而只因为有足够的爱的底气，有真实的自我。以平和的心态正视他们之间的关系，她从不怕没有他，因而无法失去他。她与鲍家明的爱情与婚姻，因为平等所以纯粹，因为有信心所以从不绝望，从来不至于穷途，也许欢爱一时，也许相爱一世，这是一种面对命运和爱情敢于把握机遇的勇气和智慧，也是对自己、对人生的一种豁达，同时也是对爱这个永恒主题的完美阐释。不苟且于将就的婚姻，既然与刘光耀的婚姻走到了尽头，就不再纠缠，各自安好，有为自己的选择负责的勇气和魄力，有为自己的选择承担后果的能力，无论经济独立，还是情感独立。这种恰如其分的把握，确定了本剧情感的核心，是对爱情本质的一种宣扬，爱情不存在身份的高低、出身的贵贱，无关乎金钱、年龄，只是纯粹的精神需求。鲍家明通过与杨嘟嘟、于小强的情感周折，在对真爱的寻找中实现了自我的成长，从稚嫩走向成熟，完成从男孩到男人的一种蜕变。杨嘟嘟，使他晓得了爱情的轰轰烈烈，明白了爱情在物质面前的卑微。于小强，让他明白了生活的本质，了解了尽孝的含义，知晓了婚姻的责任。鲍家明的爱情转折折射出了编剧王丽萍对朴素、务实等传统价值观的一种回归。嘟嘟和鲍家明是新一代人爱情观的展现，反映出这一代人面对爱情和婚姻的茫然和困惑，爱情与面包的艰难抉择。
二、意识形态的阐释：润物细无声
生活启示录范文2
高考作文不是辞藻盛会，不是技巧大战，理应回归生活，精思升华，赋得风雅。
我国著名教育家叶圣陶说：“作文这件事离不开生活，生活充实到什么程度，才会做成什么文章。”
高考作文正是注重考查学生观察生活、积累生活、感受生活、认识生活、反映生活的能力。考生如能在紧张短促的考场上，写出自己对身边生活的独到感受，无疑会将阅卷老师引入你生活的圈子，使他（她）欣赏你的沉思霏雨，歆享你的小巷深情，赞赏你的哲思高趣！
2011年高考还未走远，精彩纷呈、赋得风雅的佳作透着雨滴的光泽，又给这个夏天带来几许清凉。我们撷摘点滴，一起来感悟高考作文如何源自生活，赋得风雅。
一、描摹景物，聚焦文化：彰显生命的高度
身边的一些景、物、人：也许是一条老巷，山间的土坯房，喧闹的教室里的两只流萤，老家孩童捉蝴蝶，一个90岁的老妪……我们都能发掘出其中的文化内涵：老巷是生命的原点，土坯房是农民的过去，流萤是已逝的童年时光，捉蝴蝶带来一种情怀，老妪是一本旧书……看似极力描绘一砖一瓦，实则抒写远去的一种古朴生活，暗示某种传统即将逝去，殷切期待绿色、健康的生活，自然便能彰显文化底蕴，展示生命的高度。
写作时，可以多侧重描写，让舒缓的文笔如清泉缓缓流淌，字里行间，尽显真情。笔下注意由表及里阐述，景情关系结合，与现实对照揭示，深入刻画人们质朴的生活心态，要知道，闲适、温情才是生存的原本姿态。
高考满分例文一
回到原点
广东一考生
头顶灰白的天空，翻过尘土飞扬的马路，我终于可以停下脚步，伫立在那熟悉又陌生的巷口。我知道，只要再迈一步，我便回到我人生的“原点”――那条打从我一出生便陪伴我的老巷，那条充满西关风情，予我人生第一课的老巷。
踏着青石板路，我缓缓步入巷的深处。映入眼帘的是久违的西关老屋。深红的趟栊门前是三级浅平的石阶，某户人家的家猫正慵懒地躺在石阶上，享受正午到来前温和的阳光。偶有微风拂过，老猫用前爪轻轻拨弄脸上的胡子，发出“喵”的一声后，打了个滚又沉沉睡去。我知道，这是喧嚣大城市的深处才有的悠闲与宁静。而我人生的起点就始于这一片祥和中。
趟栊门后，原本掩着的木门已敞开。借着屋内微弱的光线，我看见头发花白的老爷爷正躺在摇椅上看报纸。忽然，一个小皮球“嘭”的一声打在了摇椅上，紧接着一个年纪大约只有两岁的孩子走到摇椅旁，揪着爷爷的衣角：“爷爷，球球！”老人摘下眼镜，笑着起身，把孩子揽入怀抱，细声细语地说着：“哦，球球去哪儿啦？在这里吗？不是！啊……在这儿！”只听，一阵铜铃般的笑声传入我耳中，我仿佛看见早已过世的爷爷也曾这么抱着我。是的，在我人生刚开启的那几年，这条老巷承载着来自亲人的无数关怀，那是西关人特有的温情。
满洲窗，青瓦砖，古榕树，越来越多的景致冲击着我的视觉膜，也敲打着我的心。可是，忽然地，一个早已褪色却又红得刺眼的“拆”字赫然出现在我老屋的墙壁上，这一“拆”字与周遭之景以及平和的氛围是何等的不相符。这时，我方惊醒：早在11年前，这条老巷便已列入拆迁范围，也就是说，我人生的“原点”将要被抹去。
眼泪不争气地涌出我的眼眶，我多想呐喊：这条巷子拆不得，拆不得啊！它不仅仅是我出生的地方，还是培育我温和性格的地方，更是让我开始感受人间温暖的最初的地方。这里的一花一草、一砖一瓦都是一部分岭南文化的开始，将这里拆掉，就是毁了我的根，就是毁了上百广州老街坊的根！可是，这样的呐喊谁会听见呢？人生的原点，文化的原点与高速发展的经济，与拔地而起的大厦相比，似乎已经变得渺小了。
这夜，我又梦见了久违的老巷――不同的是，这次当我回到人生的“原点”时，红红的“拆”字竟然不见了踪影。
【点评】
考生从生命“原点”――老巷入手破题，之后用简朴的语言，以第一人称角度，书写“我”回到孕育自己的“人生第一课”的西关老屋的所见所感，将个人生命的“原点”与岭南文化的“原点”融为一体，讲述自己的生活体验和认识。给我们留下深刻印象的是西关老屋的布局，慵懒的老猫，乐淘淘的爷孙对白，这来自生活的画面，增加了文章的现实风格。回忆往事牵引的情感，与现实都市生活对照，增添了文化内涵。考生聚焦文化，用文化视角从两个层面描写“回到原点”：实写“回到”老巷，虚写“梦回”老巷；实写个人出生和童年的“原点”，虚写岭南文化的“根”，构思巧妙，寓意深刻。景物描绘，聚焦文化，彰显了作品的高度，也彰显了作者生命的高度。
二、叙写苦难，思辨人生：彰显生命的韧度
所谓苦难，是指那种造成了巨大痛苦的事件和境遇。它包括个人不能抗拒的天灾人祸，例如遭遇乱世或灾荒，危及生命的重病乃至绝症，挚爱的亲人死亡；也包括个人在社会生活中的重大挫折，例如失学，情感破裂，追求失败。苦难是人格的试金石，面对苦难的态度最能表明一个人是否具有内在的尊严。取材苦难，在人生的无奈中彰显生命的韧度。
凝重的笔法，丰满的人物形象，跌宕的情节，无言的结局，都极易激发读者的共鸣。渲染深沉的氛围，引人入境。
高考满分例文二
心 雨
上海一考生
题记：是谁让我们难以记忆，又是谁让我们难以忘记？谁能笑着让雨湿了心芽？能过去的当然会过去，不能过去的也仍然要过去。人总是在无奈中醒悟。
窗透初晓，日照西桥，追寻着一丝光亮。他疲困地睁开了双眼。“孩子他爸，你可醒了!”病床边的妻子激动地说。环顾四周，都站满了人，但却仿佛没有他所要寻觅的东西，他着急地追问：“孩子，孩……”“孩子去学校了，多亏乡亲们的帮忙啊！孩子他刚走。”妻子打断他的话回答道。听后他才松了一口气，无意中，他摸到了自己被单旁有一摊湿水，还残留着余温。他咬紧唇边，因为男人不能哭的思想，已在他心里根深蒂固。他没有哭出声，只是泪水太倔犟，它……它不听劝拦。
将历史翻回故事的扉页。
七夕夜，饭桌上摆了几道母亲的拿手菜，虽谈不上什么名贵佳肴，却是父亲最喜欢的家庭小菜，与以往有别的是还多了一盘红烧肉。这顿团圆饭对于他们来说，是何等的奢侈。踌躇满怀的孩子，轻轻递上了一纸大学录取通知书。这本该是锦上添花、双喜临门的事情，却让他喜忧参半。他点燃了一支烟，气氛一下子沉静了下来。那一夜，家里弥漫着烟草味。
孩子是懂事的孩子，自幼勤工俭学，努力学习，每年都能拿到优异的成绩，墙上写满三好学生的“壁纸”，就是他给予父母最好的回报和安慰。
童年的他没有玩具，自制的风筝是他最好的玩伴。当秋风掀起满地黄蝶时，风筝就载着他的梦想在天空翱翔。到黄昏时分，他知道家里需要帮忙，便扯断线让风筝独自游玩，把他的故事讲给云儿听，自己便捡拾着路边的柴枝沿路小跑回家。
父亲是严厉而慈爱的，他依靠瘦小的身躯独自将整个家扛起。凭着几亩玉米地，还不足以维持孩子上学的费用，他晚上还坚持在外奔波。孩子的成绩越来越好，而逐年增长的学费也压弯了他的腰。曾几何时，孩子提出不读书，而选择外出打工来帮父亲分担重担。父亲一怒之下，第一次动手打了孩子，并承诺就算倾尽家产，也要供孩子上学。泪落湿衫的孩子明白父亲的决心后，承诺要好好读书，不再提退学的事。那一次，父亲红着眼眶，脸上却挂着一丝笑意；那一次，孩子的童年就画上了句号。
转眼已过了十几个春秋，当年的孩子已成为年轻力壮的少年。为了照看好父亲的那几亩玉米地，他执意要拿着哨棒守夜。
无奈流年似水飞快，当年健壮的父亲也已憔悴了容颜。为了凑齐孩子上大学的费用，他坚持每晚回来都去看看庄稼的长势。
盈月高挂，月光静谧，守夜站岗的孩子听到了田地里传出一些声响，随后见一个黑影窜入其中。为了父亲辛劳的成果不被窃取，他顾不上害怕，就拿起哨棒紧跟在后面。在田地里他揣数着脚步声越来越近，在一处转角对其当头一棒……
一个熟悉的身影应声倒下，一座名为父亲的大山就此坍塌。倒地的声响不大，仅使得倒伏的玉米杆了几声，却将一个孩子的心震碎成沙。月光透过树梢洒在地上，零零散散的月光宛如孩子的心般支离破碎。只有布谷鸟红着眼睛在树上喊着：“不哭，不哭……”
赶赴医院的救护车哀号着将这场悲剧传送。一位劳碌半生的父亲进入休眠，一个后悔莫及的孩子彻夜末眠。挽着父亲的手，十指相扣，向上帝苦苦哀求，那一夜他泪洒床边……
后记：壮阔的臂膀担不起岁月的重量，一切不能忘记的也只能先跨过去，然后在某个人生时刻，它们会突然醒来。生活总是在忘记与铭记之间，让人被成长。
【点评】
这是一个不能轻易过去的故事，却又是人生中不能不过去的故事，也许这就是大多数人的无奈。故事开始于病房，运用倒叙，引起读者几许猜疑，然后从头说起故事中的父子，远离这个结果，又让读者带着许多猜测，在不断猜想中，走到最后，深刻地写出人生的体验。其情节之巧妙，深得文学之真谛。题记与后记的哲理，充满生活体验，具有文化思辨特色。含蓄蕴藉的表达，写出了人生“被成长”的过程，让生命更有韧度。
三、关注社会，透视百态：凸显生命的厚度
社会生活是写作的源泉。我们要关注社会，透视人事百态，让文章增加现实感，展示自我独到敏锐的社会视觉，鲜明独立的观点。让你的文中，有温总理两会上“公平正义比太阳还要光辉”“执政为民”的论断，有心中已无公仆之心，反以封建时期“牧人者”自居的部分行政官员的丑态，有李娜、姚明、刘翔、丁俊晖，有“毒奶粉”“瘦肉精”“地沟油”“彩色馒头”“绝育黄瓜”“爆炸西瓜”，有厌弃教科书，却喜爱“旧书”的孩子，有高三学子的枯燥，有夜色下灵魂的舞姿……有敢于正视现实的态度，尖锐揭示问题的精神，中肯评价时事的观点，在简单中蕴藏深奥。社会生活给我们太多感悟，太多思考，太多历练，我们要将它们写入文章，写入生命。
高考满分例文三
拒绝平庸
江苏一考生
众多的大智慧者，在这一个物欲横流的年代里正走向平庸。拒绝平庸，对他们而言，是如此必要，却又相当艰难。
还记得一年前的四月，在校礼堂聆听周国平先生演讲的情景。我怀着一颗极为敬重的心，去感受一位写出澄明而又深刻文字的大智慧者的思考。可结果很是失望，我没触摸到他的深度思考，反而，在会场中，充斥着恶俗的商业味道。
没有人否认周国平先生是一位不平庸的哲学家，善从哲学的高度辨析人生和世态。我也不能说他已变得平庸，只是，无可置疑，在那个无法用哲学气息掩盖商业味道的上午，他在某种程度上正在走向平庸。他自己很清楚，他说：“成为一个职业作家本身就是一种堕落，一种平庸。”但他无力拒绝。
而对于有“舞神”之称的杨丽萍而言，现实同样如此。
当她在自己的舞剧中加入类似“亲爱的观众朋友们，你们好吗”的吆喝呐喊时，一位著名的舞评家说：这是中国舞蹈界一根脊梁的坍塌！
但杨丽萍又能如何？当《云南印象》这样的精品都带动不了所谓的票房，“拒绝平庸”四个大字显得多么苍白无力。变得平庸，乃是无奈之举。
是什么，让这些大智慧者的拒绝平庸变得如此艰难？
答案很简单，是当下文化环境与文化品位的日渐“平庸化”。
在这样的文化境遇中，留给大智慧者的生存空间少之又少。而就在这样的空间中，还挤占着商业利益等许多相斥之物。越来越狭小的生存空间，逼迫他们渐渐放弃自己的坚守。因为拒绝平庸，可能意味着放弃生存的机会。
但一个时代不能没有不平庸的大智慧者。他们的精神与思考，引领着大众思考的航线。帕斯卡尔说过：“人是能思考的苇草”“人全部的价值在于思考”。如果缺少了不平庸的人们的思想航标，那将会有一大批人找不到生存的意义与价值。只是太多的人并没有意识到这样的问题，他们觉得大智慧者的拒绝平庸与自己无关，于是站在一旁冷眼相看，保持着集体的冷漠。
为大智慧者提供拒绝平庸的空间，是一个时代的任务、一个民族的任务。
拒绝平庸，更是每个人的任务。
【点评】
“拒绝平庸，可能就意味着放弃生存的机会。”多沉重！多深刻！聚焦周国平、杨丽萍难拒平庸，直指文化缺位、集体冷漠之弊，呼吁时代、民族坚拒平庸。议论紧凑，水到渠成。通篇沉着大气，关注社会，深沉厚重。
生活启示录范文3
【关键词】 dpc4 胃癌 启动子 突变
0 引言
胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率居消化道肿瘤的首位[1]。目前，随着分子病理学的发展，许多基因，如tp53、k²ras、c²erbb2、k²sam、e²cadherin (cdh1)和pten，已被发现与胃癌的发生和发展过程密切相关[2²3]。然而，研究表明这些基因的改变并不能完全说明胃癌的演进过程，与胃癌相关的且未被阐明的分子事件还很多。最近，有文献报道，位于18号染色体的dpc4（deleted in pancreatic carcinoma 4,dpc4）基因可能在胃癌的发生发展过程中扮演着非常重要的角色[4]。
dpc4基因所编码的蛋白（smad4）是tgf²β（transforming growth factor²β，tgf²β）信号通路中的一个重要的成员。smad4蛋白在细胞浆内与磷酸化的受体型smad蛋白, 即smad2 和 smad3，形成异源三聚体复合物，然后从胞浆穿梭入细胞核。此复合物在细胞核内作为转录因子调节tgf²β靶基因的表达，其中包括细胞周期蛋白依赖的激酶抑制基因（cyclin²dependent kinase inhibitors）p15 (ink4b) 和 p21 (waf1)[5²6]，从而抑制了细胞周期的进程。因此，当dpc4失活或表达下调时就会促进肿瘤的发生和发展。本课题组前期实验结果表明dpc4基因的失活与胃癌密切相关，且其失活可能是由多种因素共同作用的结果[7]。zhou等[8]报道dpc4基因启动子区域的突变可能是导致dpc4在子宫内膜癌中失活的原因之一，然而对于胃癌细胞中是否存在dpc4启动子区域的突变至今还未见报道，为此，我们研究了9种胃癌细胞系中dpc4基因启动子区域的突变情况，并分析了dpc4突变与基因表达之间的关系。
1 材料与方法
1.1 细胞培养
在所研究的9种胃癌细胞系中包括6种低分化的细胞系（snu5、snu16、snu216、snu484、snu638、ags）、2种中等分化的细胞系（mkn28和mkn74）和一种印戒细胞癌的细胞系（katoⅲ），所有细胞均由韩国首尔大学药学院申英基教授馈赠。snu5和snu16 细胞为悬浮生长的细胞系，其余为贴壁生长的细胞系。细胞接种在含10%胎牛血清、2mm谷氨酰胺、100u/ml青霉素和100μg/ml链霉素的rpmi²1640培养液中，在37℃，5% co2环境下培养。
1.2 核酸提取
采用基因组dna提取试剂盒（qiagen, germany）来提取9种传接5代以内的细胞系基因组dna，所有的操作步骤完全参照试剂盒说明书的进行。提取的dna首先要经过琼脂糖凝胶电泳来检测是否有降解成分，合格的再经过紫外分光光度计检测其含量和质量，od值260nm/280nm在1.8到2.0之间的为质量合格。此外，我们用trizol（invitrogen, usa）试剂从细胞系中提取rna，然后利用superscriptⅱ转录酶、寡核苷酸²dt以及随机引物与rna共孵育来进行反转录。整个操作过程完全按照产品说明书执行。
1.3 反转录聚合酶链反应 (reverse transcription pcr, rt²pcr)
采用rt²pcr的方法来检测9种胃癌细胞系中dpc4基因在rna水平的表达情况。具体的引物序列如下：正义引物5′²atg gac aat atg tct att a²3′，反义引物5′²gtc taa agg ttg tgg gtc²3′，其扩增片断为dpc4基因编码区cdna的全长。pcr反应的条件是：94℃变性5min，紧接着28个循环的94℃变性30sec，60℃退火45sec和72℃延伸90sec，最后是72℃10min延伸步骤。pcr反应混合物的成分包括：1×缓冲液，1.5mm mgcl2，10pmol双向引物，0.2mm dntp，1u taqdna聚合酶，cdna和相应的双蒸水，反应混合物的总体积为50μl，阴性对照为无模版的pcr反应。最后利用浓度为1%的琼脂糖凝胶（溴化乙锭染色）对pcr产物进行电泳。所获得的凝胶图像用alaphaimager 2200凝胶分析软件进行分析。
1.4 pcr扩增和测序
为了检测胃癌细胞中dpc4基因启动子区的突变情况，我们对9种胃癌细胞系的该区域进行了pcr扩增。具体的引物序列如下：正义引物5′²cca ggg gta aga gaa cac ca²3′，反义引物5′²gac atg gcg cgg tta cct²3′，其扩增片断长度为1438bp。pcr反应的条件是：94℃变性5min，紧接着40个循环的94℃变性30sec，60℃退火45sec和72℃延伸60sec，最后是72℃10min延伸步骤。pcr反应混合物的成分同上，模板为100ng 基因组dna，反应混合物的总体积为50μl。扩增产物首先经过1%琼脂糖凝胶电泳来检测是否有正确条带产生，然后利用试剂盒纯化扩增产物，再将产物克隆到pgemt质粒，提取质粒后，送到公司进行测序。
2 结果
2.1 dpc4在胃癌细胞中的表达
我们运用rt²pcr的方法对9种胃癌细胞系中的dpc4表达水平进行了检测，gapdh基因作为内参。结果显示，dpc4在snu5、snu16、snu484、snu638和katoⅲ细胞中表达较高，而在snu216、mkn28、mkn74 和 ags细胞中表达较低或缺失，见图1。说明dpc4基因失活在胃癌中是一种频繁发生的分子事件。
图1 dpc4在胃癌细胞中的表达情况（略）
fig 1 expression of dpc4 in gastric cancer cells
2.2 胃癌细胞中dpc4启动子区域的突变情况
为了阐明dpc4在胃癌细胞中的下调机制，我们应用pcr扩增及测序的方法对9种胃癌细胞系中的dpc4启动子区的突变状态进行了检测。pcr结果显示在所有的9种细胞系中都出现了特异性的条带，这表明在启动子区域没有大片段的插入或缺失突变。测序结果表明，在mkn74细胞的启动子区域出现了两处碱基置换突变，突变位点一个在距离转录起始位点上游38bp处（正义链gc 或反义链cg）见图2a，另一个突变位点在转录起始位点上游481bp处（正义链tc或反义链ag）见图2b，而在其它8种细胞系中没有发现dpc4启动子区域突变。
:signify mutation point
图2 mkn74细胞中dpc4启动子区域的突变情况（略）
fig 2 promoter region mutation of dpc4 gene in mkn74 cell
2.3 dpc4启动子区域的分析
为了探讨这些置换突变的意义，我们又利用tfsearch ver.1.3（japan）等软件对dpc4启动子区域进行了分析。分析结果显示，在dpc4启动子区域含有多个转录因子结合位点，这包括aml²1a、maz、 sp1、lef²1、hnf²3、 mzf²1和ik²2，见图3，而在mkn74细胞的两个突变恰好发生在转录因子mzf²1和ik²2的结合位点上，这提示两个碱基置换突变可能通过干扰转录因子的结合而影响dpc4基因的转录。
3 讨论
dpc4基因是一种经典的肿瘤抑制基因，已有研究表明dpc4基因的失活与多种肿瘤的发生发展密切相关[9]，然而对其失活机制至今还没有被完全阐明。本课题组前期研究表明在胃癌中dpc4基因启动子区域的甲基化、染色体的杂合性缺失以及编码区突变都是导致其基因失活的原因之一，但这三种遗传和表观遗传的机制并不能完全解释dpc4基因在胃癌中的失活，因为仍有一些胃癌组织在没有发生上述三种现象的同时却发生了基因失活现象[7]，这提示还有其他的机制参与了dpc4基因的失活。
zhou 等［8］研究发现在子宫内膜癌中dpc4基因启动子区域出现了置换突变，且其突变导致dpc4基因的失活，这一研究结果促使我们去探讨是否在胃癌中也发生了类似的现象，即启动子区域的突变也是导致胃癌细胞dpc4基因失活的原因。我们首先对9种胃癌细胞系中的dpc4的表达水平进行了研究，rt²pcr结果显示dpc4基因在胃癌细胞中频繁发生缺失或表达下调，这一结果与之前的报道基本一致。随后，为了探讨其失活机制我们对dpc4基因启动子区域进行了克隆和测序。我们发现在9种细胞中只有一种，即mkn74，在dpc4启动子区域发生了突变，突变的类型为置换突变，突变点一个位于距离转录起始位点上游38bp处（正义链gc 或翻译链cg），另一个突变位点在转录起始位点上游481bp处（正义链tc或反义链ag），而在mkn74细胞中的dpc4基因恰好发生表达下调，这提示启动子区域的突变可能是导致mkn74失活的机制。
：signify mutation point；?：signify transcription start site；ø: signify transcription factor binding site
图3 dpc4启动子区域分析（略）
fig 3 analysis of dpc4 promoter region
为了更深入的了解dpc4基因启动子区域突变与失活的关系，我们对启动子区域的转录因子结合位点进行了分析。结果显示，在dpc4启动子区域含有aml²1a、maz、sp1、lef²1、hnf²3、mzf²1和ik²2等多个转录因子结合位点，而两个置换突变恰好发生在mzf²1和ik²2两个转录因子的结合位点上。mzf²1是一种c2h2锌指蛋白转录因子，研究发现此分子可调节细胞增殖和分化，并参与肿瘤形成[10]。而转录因子ik²2被发现可调节淋巴细胞分化，并可转录激活胰岛素调节的氨基肽酶（irap）和胎盘亮氨酸氨基肽酶（p²lap）等基因[11]。因此，发生在两个位点的置换突变可能会影响转录因子mzf²1和ik²2与dpc4启动子的结合，继而干扰了转录因子的转录激活作用，最终导致dpc4基因的失活。
总之，本研究首次发现了胃癌细胞中存在着dpc4启动子区域的突变，且其突变可能是导致dpc4失活的原因之一。然而对于两个置换突变的真正意义还有待于进一步研究阐释。
【参考文献】
［1］ fuchs cs, mayer rj. gastric carcinoma [j]. n engl j med,1995, 333(1):32²41.
［2］ werner m,becker kf,keller g,et al. gastric adenocarcinoma: pathomorphology and molecular pathology [j]. j cancer res clin oncol,2001,127(4):207²216.
［3］ 刘芬,于皆平,邓全军,等.pten在胃癌细胞中的表达及其cpg岛甲基化状态的研究[j].肿瘤防治研究,2006,33(9):632²634.
［4］ powell sm,harper jc,hamilton sr,et al. inactivation of smad4 in gastric carcinomas[j]. cancer res,1997,57(19):4221²4224.
［5］ pardali k,kowanetz m,heldin ch,et al. smad pathway²specific transcriptional regulation of the cell cycle inhibitor p21(waf1/cip1) [j]. j cell physiol,2005,204(1):260²272.
［6］ levy l,hill cs. smad4 dependency defines two classes of transforming growth factor {beta} (tgf²{beta}) target genes and distinguishes tgf²{beta}²induced epithelial²mesenchymal transition from its antiproliferative and migratory responses[j]. mol cell biol,2005,25(18):8108²8125.
［7］ wang lh, kim sh, lee jh,et al.inactivation of smad4 tumor suppressor gene during gastric carcinoma progression [j].clin cancer res,2007,13(1):102²110.
生活启示录范文4
>> 五音不全不用怕 闭关练歌成行家 挑战假“五音不全” “五音不全”的由来 从“五音不全”到“快乐歌王” 何润东：五音不全的偶像 五音不全将有药可医 我是不是五音不全呀？ 五音不全的“小歌迷” 五音不全唱响了我的世界 五音不全也能唱情歌 五音不全，亦能教孩子音乐 五音不全的父母，也可以让孩子爱上音乐 我的音乐生活五音不全，也爱音乐 炒油画炒成行家 秋声五音 五音与雷声 乡村里的五音戏 淄博五音戏之活力 “五音令人耳聋”否 五音疗法助养生 常见问题解答 当前所在位置：），将该文件拷贝到“千千静听”安装目录（默认C:\Program Files\TTPlayer）的Plugins文件夹下（如没有新建该目录）。
第二步：运行“千千静听”，在其面板上右键单击选择“千千选项”打开选项对话框，点击左侧的“音效插件”项，在右侧会看到DeFX v0.97，勾选该项即可打开该音效设置面板。点击“卡拉OK”栏中的“ON”(启用)按钮（见图2），这样在播放歌曲时就可以自动去掉原唱，再次单击“ON”(启用)按钮可取消卡拉OK模式。
第三步：现在播放喜欢的歌曲，然后单击“LRC”调出歌词显示，双击桌面的“快捷方式 到 echoXP”图标，启动“echoXP”，单击“开始”。然后对着歌词唱歌就好了。
小提示
这个插件特别适合使用“卡拉OK”功能时使用，平时听歌时如果不喜欢它的音质，可在千千选项的“音效插件”里取消对它的勾选。
必经阶段：千唱百练
要唱好歌，除了先天的优势之外，其他的就是练习了，俗话说“勤能补拙”，一首歌多练习几遍，肯定会有不少提升。要想进步快些，那就打开工具箱，正式启动我们的练歌计划。
第一步：安装完“酷我K歌”后选择“我要点歌”，在右侧的列表里，我们可以看到一些歌曲的分类，例如，“怀旧点唱机、深情对唱榜”等列表，点击相应榜单就可以看到该风格的歌曲了。如果想专门练某一首歌，例如“勇气”，那可以在搜索栏内输入“梁静茹 勇气”后点击“搜索”，在搜索结果列表中单击“＋”号，歌曲就添加到“已点歌曲”中了。
第二步：在“已点歌曲”的列表中选择“勇气”后面的播歌按钮，MV即刻出现，我们的苦练计划也就正式开始。先按照默认听一遍原唱。
第三步：双击桌面的“快捷方式 到 echoXP”图标，启动“echoXP”，单击“开始”。然后单击“酷我K歌”的“伴唱”按钮，我们就可以对着麦克风练习这首歌了。
第四步：练习几遍后，对歌曲很熟悉了，那就检测下效果吧！在“酷我K歌”的“已点歌曲”中选中“勇气”，单击“录歌”和“练唱图”按钮，软件下方就出现了一个对比图，现在跟着背景音乐唱歌吧。录歌时下面的波形图显示了自唱和原唱的音调对比（见图3），自唱为空心方格，原唱为实心，音调越接近，音柱也就越接近，旁边还会有动画表情来提示你的演唱状态，根据这些提示，你就知道哪里该发多高的音了，同时我们由于有“echoXP”的帮助，我们在音响里也可以听到自己的声音。
小提示
辛苦录制的练习作品也不能浪费哦！可以简单处理下，保存下来：当录制完成，酷我K歌会自动弹出效果预览窗口，我们单击“第二步 过滤噪音”里的“启动”按钮（见图4），软件就会自动执行降噪处理，在“给声音增加效果”栏中将“混音设置”改为“小包房”，点击“均衡设置”选择“怀旧”，将“调节自唱音量”的滑块向右拖到最大，现在声音听起来就非常悦耳动听了。最后单击“保存完成”，就完成了存储，以后在“我录的歌”里可以找到它们，右键单击选择“打开目录”就看到它在硬盘里的位置。
过关验收：评分对比
经过上面的练习，你应该已经有点水平了，现在去K歌房或许还有点心虚，要想“一鸣惊人”还需要受专业点的评分和建议，现在打开工具箱，开始启动“麦客疯”软件。
第一步：安装完成后，软件提示选择视频服务器，根据后面的提示，选择一个响应时间最短的服务器，单击“确定”完成“麦客疯”的初步设置。接下来单击个人欢唱右上方的“系统设置”，更改一下缓存目录，并将缓存大小为“1000M”。
第二步：单击“免费体验”区，在这里找一首歌，例如“宁夏”，单击歌曲旁边的MV标志，将歌曲自动添加到播放列表中。
第三步：在个人欢唱中先缓存完自己想录制的歌曲，将歌曲缓存到本地。缓存完毕，会发现录音按钮亮起，点击此按钮，然后在出现的提示中选择录音程序为“旧版录音程序”，这时软件会提示需要更新，单击“确定”启动自动更新下载“旧版录音程序”并完成安装。
小提示
生活启示录范文5
【关键词】记录；幼儿发展；教师专业发展
一、简要介绍瑞吉欧幼儿教育
20世纪60年的，在马拉古奇的带领下，瑞吉欧-艾米利亚这座城市的居民经过长期探索和努力，在融汇了维果茨基、皮亚杰、杜威等著名教育家的观点的基础上，创造出了独具特色的瑞吉欧幼儿教育，受到了世界各国的广泛关注，并纷纷向瑞吉欧学习其先进的教育理念。笔者将从瑞吉欧幼儿教育的记录入手，简要分析其特点、对教师、幼儿及家长的价值和对幼儿教师专业发展的启示。
二、记录的特点
此处的记录，是教师指通过持续、细心地观察、倾听幼儿，通过采用如照相机、录音机、幻灯机、录像机等不同的工具，从不同的角度对幼儿在不同主题的探索活动进行原始材料的收集、记录。
（一）具有质性和过程性的评价。教师对幼儿的评价，是通过对幼儿在活动中的行为表现、同伴间对话、提问等各方面进行点点滴滴的记录进行评价，是对幼儿整个活动参与过程的评价。它虽然不能像量化评价那样，呈现直观标准的评价结果，但体现了质化评价的全面性和多样性。
（二）具有互惠性质的记录。瑞吉欧幼儿教育的这种记录是惠及教师、幼儿及家长三方面的记录。教师通过记录和记录的分析，可以提高自身教学技能和反思能力，起到教学相长的作用。记录也帮助幼儿进一步地回忆、反思，拓宽其学习的范围。记录也为家长了解幼儿、与幼儿互动、参与学校互动提供了机会。
（三）多样化的记录。他们认为任何一种记录工具只能从某个侧面来反应事物的特点，而多样化的记录，能弥补使用单一记录方式导致教师分析幼儿活动所产生的偏差使教师能更加全面地记录幼儿的发展过程，更加深入地了解、评价幼儿。
三、记录的独特意义和价值
记录，之所以被瑞吉欧人重视，是因为记录在瑞吉欧幼儿教育过程中起到了非凡的作用，它促进了教师的成长、幼儿的成长、甚至家长的成长，使瑞吉欧幼儿教育于2001年被美国《时代周刊》评委世界先进早期教育之一。
（一）教师
1.记录帮助教师更加准确、全面地认识幼儿。教师在整理记录、研究记录时，相当于和幼儿，再一次进行了深入的对话交流，使教师可以收获更多的信息。同时，教师也可以站在“他者”的角度去观察认识幼儿，从而形成对幼儿更加全面、客观的了解。
2.记录帮助幼儿教师更加准确地为活动做出下一步规划。教师通过再一次倾听幼儿的对话，再一次观察幼儿的活动过程，便可重新审视自己之前的思路与操作是否合理恰当，同时也可以仔细分析幼儿当前所处的认知发展阶段、经验基础、幼儿的兴趣点等。在此基础上，教师便可为活动的下一步做出更有针对性的规划与设计，使幼儿的探索活动朝着更深更广的方向发展。
3.记录促进教师专业发展。记录促使教师与幼儿之间产生明显的交互作用，从而提升教师与幼儿的沟通、交流品质，所以记录能促使教师不断地分析，不断地向幼儿学习，在与幼儿一同学习中获得教学相长的经验。当教师与他人，尤其是同事，共同讨论并重新解释记录、集思广益的时候，教师之间不同观点的碰撞和相互启发便会促进教师的成长。
4.记录促进教师与家长的有效互动。教师将幼儿在幼儿学校生活中学到的知识技能、幼儿之间的对话、与老师的对话等，通过记录板、录像、照片等形式展示给家长，让他们全面地了解自己的孩子的发展状况，看到在家里看不到的另一面幼儿。这样便增加了家长对幼儿学校活动的参与和支持，也促进了家长与教师的交流与沟通，进而协助家长认识自己的角色和定位。
（二）幼儿
1.记录帮助幼儿进行回顾、反思。通过不同形式的激励，可以帮助幼儿回顾、反思之前在探索活动中的行为，并对下一步活动所采取的措施做进一步的修正。
2.记录增强幼儿自信心。马拉古齐指出，幼儿通过记录“看着自己所完成的工作时，会更加好奇、感兴趣，以及有自信心。”记录可以传递给幼儿一种价值感，使幼儿意识到自己的劳动成果受到重视。
3.提供幼儿互相学习、促进发展的机会。呈现幼儿的作品、照片、幻灯片、录影带等的同时，幼儿也通过相互观察，促进幼儿间的相互学习、相互启发，从而拓展学习的广度与深度。
（三）家长
增加亲子间的关系，减少家长对幼儿的不必要担心。
展示幼儿在参与活动是的照片、对话以及作品，让家长看到幼儿在幼儿学校的生活表现，也加深了家长对孩子学习内容、过程的了解，这样为亲子间对话交流提供了更多的机会与话题，增进了亲子间的关系。当家长全面地了解到幼儿学校的生活内容、生活过程时，他们便可以对幼儿学校、幼儿教师更加信任，从而真正减少家长对幼儿的不要担心，同时也真正减轻家长的生活负担。
四、“记录”对幼儿教师专业发展的启示
（一）转变角色、提高研究意识。瑞吉欧幼儿教师，能如此全方位地记录幼儿的整个成长过程，促进幼儿全面发展，其中一个因素是，他们不仅仅将自己定位为一个教幼儿知识的老师，更是将自己定位成一位促进幼儿全面发展的研究者。我国幼儿教师专业要得到发展，增强科研意思，提高科研能力是非常必要的。
（二）从多个角度看待幼儿。瑞吉欧幼儿教师认为使用单种记录方式，只会片面地反映幼儿，容易导致他们对幼儿的了解、诠释出现偏差。同时他们相信“儿童有一百种语言”，允许幼儿用多种方式表达自己的思想。由此，我国幼儿教师的教学能力和评价能力要得到提高，首先得改变“一刀切”的观念，从多个角度去了解幼儿，尊重幼儿之间的个别差异性。为幼儿创造更加开放的环境，让他们自由地去选择适合自己的表达方式。
（三）提高与家长交流沟通的能力。《专业标准》对幼儿教师专业能力的要求指出：与家长进行有效沟通，共同促进幼儿发展。目前我国幼儿家庭相对于幼儿园来讲，处于一种非常被动的地位，很少有家长会主动去了解幼儿园的教学目标、内容、过程等的情况，很多家长都处于被告知的状态。家长和幼儿园教师没有交流，家长不积极配合幼儿园的工作是不利于幼儿的健康成长的。
发展幼儿园教师的专业能力，少不了提高教师与家长有效沟通的能力。让家长更加全面深入地了解幼儿、幼儿园，从而正确认识到自己所处的角色和地位，积极主动地参与到幼儿园的教育活动中来，最终达到家庭、幼儿园双方资源的整合和高效利用，最终达到使幼儿健康全面发展的目的。
【参考文献】
[1]卡洛琳・爱德华兹，莱拉・甘第尼，乔治・福尔曼.儿童的一百种语言[M].罗雅芬等译.南京师范大学出版社，2008.
[2]屠如美.向瑞吉欧学什么――《儿童的一百种语言》解读[M].教育科学出版社，2002.
[3]教育部.《幼儿园教师专业标准（试行）》，2011.
[4]王春艳.学习瑞吉欧重在把握其教育理念――瑞吉欧方案教学的教育精髓[J].学前教育研究，2002（5）.
生活启示录范文6
移动VHD安装好处多多
大家知道从Win7开始，系统就原生支持VHD启动（Win8自然也支持），这样整个系统可以封装在一个文件中，而且这个文件可以放置在移动硬盘中，非常便于我们在不同电脑上尝鲜。这种安装方式好处如下：
1.方便管理。整个Win8系统就是一个文件，不用再为安装Win8规划安装分区，等到Win8新版出来后，更新也很方便（只要使用新版系统的VHD替换旧版即可）。
2.体验方便。Win8 VHD是放置在移动硬盘，不会对电脑原来系统带来多余文件，而且Win8具有良好移动性，可以在任何支持USB启动的电脑上启动Win8。
简单四步打造移动Win8
了解移动Win8 VHD的好处后，下面我们就一起来看看在Win7旗舰版下如何打造Win8移动系统。
第一步：创建VHD文件
1.右击桌面“计算机”选择“管理”，在打开的计算机管理窗口展开“计算机管理（本地）存储磁盘管理”，右击“磁盘管理”选择“创建”，按提示在任意NTFS分区假设为J盘，创建一个名为win8.vhd、类型为“动态扩展”、大小为10GB的VHD文件（图1）。
2. VHD创建完成后，按提示完成VHD硬盘初始化，并将其创建为活动、主分区。
第二步：安装Win8到VHD文件
由于只有使用Win8安装光盘启动安装，才能将系统安装到VHD文件中，因此先要准备一个PE安装环境。为了操作方便，这里使用“网虫PE”（下载地址：bbs.省略/viewthread.php?tid=157912）。
1.下载网虫PE后使用bootice.exe（下载地址：js.省略/201106/bootice_0.9.rar）将网虫PE启动添加到BCD启动中。
2.准备好Win8安装文件，重启并启动网虫PE，进入PE后右击桌面“计算机”选择“管理”，操作同第一步，展开到“存储磁盘管理”，右击“磁盘管理”选择“附加VHD”，按提示加载上述创建的J:\win8.vhd。
3.单击“开始Imdisk虚拟磁盘”，启动虚拟磁盘工具后单击“加载新的”，然后在弹出的窗口选择加载前面准备好的Win8安装文件。接着打开光驱激活Win8安装向导，在“将Windows安装到何处”这一步时，选择将Win8安装到disk1 Partition1:Win8，即加载的VHD虚拟磁盘（图2）。
4.剩下的操作按屏幕提示完成，重启电脑后就可以进入VHDWin8，按提示完成账户、密码等设置，这样就成功将Win8安装到VHD文件中了。
第三步：配置移动硬盘启动
1.首先准备一个包含活动主分区（NTFS格式）的移动硬盘（如果没有主分区，使用系统自带的“磁盘管理”，删除移动硬盘上原来的分区，创建一个大小为20GB主分区并设置为“活动”即可）。
2.启动BOOTICE.EXE程序后，在“目标磁盘”选中当前移动硬盘，然后单击“主引导记录”，按提示选择“Windows NT6.x默认引导程序”，最后单击“安装/配置”，将移动硬盘引导记录更改为NT60格式（图4）。
3.使用虚拟光驱加载Win8安装文件，然后将其中的BOOT目录、Bootmgr文件、安装了Win8的J:\win8.vhd文件全部复制到移动硬盘的主分区下。
4.返回到BOOTICE.EXE程序界面，切换到“BCD编辑”标签，单选“其它位置的BCD”，选择L: \boot\bcd文件（这里L:为移动硬盘主分区的盘符），接着单击“查看/修改”，在弹出的编辑窗口单击“添加Windows NT 6.x VHD启动项”，接着选中新建的启动项，然后依次执行下列操作：
启动磁盘：当前移动硬盘
启动分区：当前移动硬盘的活动主分区
设备文件：\win8.vhd
菜单标题：Windows 8 VHD
其他使用默认设置，最后单击“保存全局设置”退出，这样我们就顺利在移动硬盘添加了VHDWin8的启动项了（图5）。
第四步：开始体验移动Win8
完成上述设置，我们就可以删除Win7电脑上的Win8.vhd，以后只要将这个移动硬盘插入任何一部支持USB启动的电脑，就可以在其上体验Win8系统了。
1.插入移动硬盘，开机进入BIOS设置，将USB设备启动设置为第一启动。接着在出现的多重启动菜单选择“Windows 8 VHD”。
2.Win8开始加载，使用原来设置的用户名进入Win8，不过第一次进入桌面并不会显示Win8的开始菜单屏，首次显示的是空白开始菜单画面，此时按Ctrl+Del+Alt打开任务管理器，单击“文件新建任务”，输入explorer.exe，确定后关闭任务管理器即可看到Win8桌面了。
3.打开资源管理器，右击左侧窗格的“计算机”，选择“管理”，在打开的计算机管理窗口展开“计算机管理（本地）本地用户和组用户”，在右侧窗格右击选择“新用户”，按提示新建一个名为CFAN的用户。
