后进生转化总结范例6篇

后进生转化总结

后进生转化总结范文1

    我校根据各班的提名,年级组统一分配,把全校每个后进生的帮教工作落实到每个教师。教师对帮教对象的现状进行认真分析,找出形成的原因,与学生共同制定帮教计划,并根据学生的个性和特点实施帮教措施。在教育转化的过程中,我们探索和总结出了许多好的教育方法,现拟定如下,以便下期工作参考。

 一、强化矫正fa

     有些学生从小组织纪律松懈,自由散漫已成习惯。由于学生自制力差,影响了听课的效果,造成了知识的脱节。面对这样的学生,教师既要诚心又要耐心。在组织他们认真学习《小学生日常行为规范》的基础上,让他们懂得遵守纪律的重要性,并对他们提出切合实际的可行的具体的要求。教师再根据要求进行定期和不定期的检查,使他们在思想上绷紧遵守纪律这根弦,培养他们的意志力,不断增强自控能力。如因经常逃课、打架而多次转学后来到我校就读的一部分学生,老师就用强化矫+法规范了他的行为,并让他们以优异的成绩报答父母。

    二、目标激励法

    目标是一个人前进的动力。教师要用切合学生实际的目标激发他们自身的积极因素,激励后进学生不断进取。

    比如,一部分学生不但学习不努力,还纪律松散,又没有奋斗目标。班主任老师就对他们进行思想教育,帮他确立奋斗目标,并分阶段给他确立一个个具体的小目标,制定实现目标的具体措施。在培养学习习惯上化力气,在指导学习方法上下功夫。在教师满腔热情地关爱下,这些学生的学习终于有了进步,他们品尝到了成功的喜悦,老师及时表扬鼓励,并提出了新的奋斗目标。在新的目标激励下,这部分学习更刻苦用功了,更遵守纪律了。           

三、归因训练法

    我们组织教师学习归因理论,学会归因训练方法。采用针对性原则对学生进行归因方法训练,使学生也掌握归因训练方法,提高自我归因能力。

    学生的学业状况和品德状况决非一日形成,也常常不是一个因素造成的。如果我们把学生学习差只归因于稳定的能力因素,就会导致学生产生自卑心理和对学习的恐惧心理。因此,我们对学习成绩差的学生作具体分析,发现影响学生学习成绩主要包括学习方法和学习习惯等相关因素,并向学生指出不良的学习方法和学习习惯的危害性,使学生既认识自己的问题,又感到成绩差是可以改变的,这样学生就会出现奋发向上的积极变化。比如,我们五(2)班14名学习成绩最差的学生(语、数)进行归因训练。由于过去的多次失败,他们情绪低落,归因于自己智力差,由此帮教教师认真分析他们情况,帮助他们把失败归因于努力、意志、方法等与能力无关的因素,改善他们的情绪,激发他们争取成功的欲望。他们的自信心逐步增强,学习积极性不断提高。到学年结束,12名学生的学习成绩都得到不同程度的提高。

     对于行为有偏差的学生,我们把它归因于主要是交友不慎,没有按照《小学生日常行为规范》来要求自己。同时肯定他们的本质是好的,只要遵纪守法,认真学习,一定能成为好学生。比如,五(2)班刘光银同学,原行为上有偏差,通过归因训练,他与社会上不三不四的人断绝了往来,能遵纪守法,进步较快。实践证明,归因训练能提高学生的自信心,有利于后进生的转化。

    四、心理辅导法

    我们根据心理辅导行为治疗法中的厌恶疗法,使用想像一种厌恶性的或惩罚的刺激,帮助学生摆脱某些行为障碍,预防某些问题的发生。每当节假日、双休日之前,我们在法制教育的基础上,让学生想象违法犯罪的后果、小偷被抓的情景,使他们对这些行为后果产生恐惧,从而预防后进学生在假日里违法犯罪,从而规范他们的行为。我校学生不仅在学校中能遵纪守法,而且在寒暑假中、双休日中也能遵纪守法,证明这种方法是有效的。

    五、榜样展示法

     榜样的力量是无穷的。在后进生的群体中树立榜样更为重要,不仅使后进生看到了希望,而且增强了后进生转化的决心。如在后进生的帮教工作中,我们请原来因严重违反校纪校规而多次处分,但在老师们的帮教下转化过来的学生来讲述自己的成长史,使后进学生懂得人人都是可以转化的。转化不仅要靠老师的帮助,更需要自己的努力和毅力。同时,我们不断寻找后进生的闪光点,发现点滴进步,及时鼓励,每当后进生听到原来与自己差不多的学生受到表扬,他们的心灵总会受到震动,渴望着自己也能得到表扬。

    六、情感教育法

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    在分析后进生形成的原因时,我们发现较多的后进生是由于父母的离异、再婚、违法服刑、家庭突变等原因失去家长的关爱而成为后进生的,我校共有80多位这样家庭的学生。为了让这些特殊家庭的学生和特困家庭的学生与同龄人一起健康成长,每年我们召开特殊家庭学生和特困家庭学生茶话会。

    在茶话会上,没有长篇的讲话,更没有训话,而是用身边生动的事例来感化学生。例如,请本校特困生演讲《逆境中奋斗靠自己》,教育他们正确面对家庭变化的现实,鼓励他们在逆境中奋起。同时,通过师生共做游戏融洽师生关系,并对特困家庭的学生在经济上给予援助,让他们体会到老师的关爱、社会主义大家庭的温暖,激发他们树立信心,克服困难。好几位同学激动地说:人间确有真情在,我们要以实际行动不辜负学校老师的期望,争做“四有”新人。

    总之,后进生转化工作是学校工作中重要的一环,是每位教师不可推卸的责任。在实施的过程中,必须讲究制度化、规范化,把此项工作作为对教师教育教学工作考核的硬性指标加以落实,并与教师年终考核挂钩,才能收到良好的效果。

         

后进生转化总结范文2

社会上对人垢的片面认识,家长望子成龙的迫切心情、片面追求升学率的偏颇倾向,严重干扰了教师对学生的正确看法。事实上在任何时候,每个学生以展都不可能是完全一样的。在智力发展上,有的孩子先觉早悟,有的却是顽钝后醒。此外,从才***能表现方面来说,有的孩子学习善于抽象思维,有的却长于形象思维,有的孩子学习科学文化知识能力较弱,但动手操作能力却很强。因此,只有我们做老师的用全面的观点看待差生,才是保证做好差生转化工作的前提。

下面就差生转化工作总结了几点做法:

一、 真情化冰法

爱,对学生的心灵是任何东西都不能代替的阳光。由于差生往往有一种疑惧心理和对立情绪,对老师时时戒备、处处设防。在这种逆反心理的作用下,老师所有的努力都会付之东流。有言道:亲其师,才能信其道。只有达到心理相容,差生那紧闭的心扉才能向老师敞开,才能达到教育的良好效果。要做到这一点,教师就要给予他们更多的温暖,更多的爱,更多的真情,用温暖的爱熔化他们心中的冰山,用挚城的情点燃他们自信和进取的火种,达到“精神所至,金石为开”的奇特效应。

二、 优先提问法

课堂提问是老师了解学生学习情况,激发学生探求新知欲望的重要手段。在实际教学中,让优生“包场”,差生冷落一旁的现象常有发生。久而久之,差生听课的注意力就会分散,身在课堂、心在窗外。我认为教学过程中优先提问差生是使之得到转化的一***个很好途径。由于他们的基础和能力都比较差,所以教师设计问题时要讲究层次性,让差生也能跟着老师的提问而积极思维,做到差生经过思考能回答的问题绝不让优生代劳。充分给予差生自我表现的机会,让他们在每年在每节课上都能体会到成功与收获的喜悦。这样因势利导,循序渐进,逐步达到大面积提高教学质量的目的。

三、 优先批改作业法

作业练习是学生巩固所学知识的重要环节,作业批改是教师检查教学效果的必要手段。优生的作业书写规范,正确率高,批改起来心情舒畅,差生的作业往往被老师放到最后草草写个“阅”字完事。这样一来就导致老师不认真批阅、差生干脆不做作业的恶性循环。这极不利于差生的转化。我认为,差生的作业应该受到特殊的优待才对。教学中我是这样做的:首先,差生的作业实行专业设计。根据他们的实际水平,设计一些简单的、模仿性的作业。(随着能力的提高而逐步加大难度)。其次是他们的作业尽量当堂批改,随到随改,优先批改。最后是作业的评价,在作业的评价中,只打“√”,不打“×”错误的地方怎么办呢?只画一条横线,提醒学***生红线上面有错误,必须改正。学生经过认真思考湖,会做了,就将错误的擦掉,填上正确的,老师看到改对后,在红线的末尾填上一个较长的“/”了一个不太规范的“√”,如果修改后仍是错的,红线不动,直至改对为止。这样既维护了学生的自尊心,增强了他们的荣誉感,又养成了有错就改的好习惯,也便于老师监督学生对错题的修改。经过这样反复的时间过程,一个个错题的被改正过来的,成绩一步一步提高了,我门的目的也达到了。

四、 暗示提醒法

每个人都渴望得到别人的认同与赞美,尤其那些正在转化过程中的差生更是如此。所以我们杜绝在大庭广众面前指名道姓地揭发、批评,甚至恶语伤人,这样对于差生的转化只能适得其反、事半功倍。那么差生的教育转化过程中应该采取一些怎样的方式方法呢?我觉得精心设计安排一些环境和场合,让他们在不知不觉中得到提醒和暗示,才能达到教育的目的。

五、 及时表扬法

后进生转化总结范文3

【关键词】 结直肠癌肝转移; 疗效评价; 预后影响因素; 中位生存时间

结直肠癌是一种恶性程度较高的消化道恶性肿瘤,预后较差,外科手术技术的发展提高结直肠癌病灶切除的存活率[1]。肝脏是结直肠癌转移的最常见部位[2],发生肝转移后的结直肠癌患者的预后极差,而大多数患者在诊断出结肠癌时已出现肝转移,即便根治性切除肝部病灶组织,其无瘤生存率和五年生存率仍较低[3-4]。因此,提高结直肠癌肝转移的治疗效果是提高结直肠癌生存率的关键。故本研究对笔者所在医院收治的425例结直肠癌肝转移患者的治疗效果进行回顾性研究,并分析影响预后的相关因素,为临床治疗方案的制订提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 病例为笔者所在医院2000年1月-2010年1月诊治的425例结直肠癌肝转移患者,男257例,女168例,年龄为28~76岁,平均年龄为(18.3±15.7)岁;其中直肠癌81例、乙状结肠癌106例、升结肠癌86例、横结肠癌67例、降直肠癌85例。277例患者通过B超或CT及术中探查发现、并由病理学确诊为合并肝转移癌,148例患者在随访中发现;转移灶大小不等,直径为1.2~7.8 cm,平均直径为(3.5±1.2)cm;单发转移灶139例,多发转移灶286例。纳入指标:(1)完成规定治疗方案及依从性较好者。(2)完成术后随访者。(3)患者知情同意下,排除合并其他严重心肺疾病者。

1.2 治疗方法 425例结直肠癌原发病灶均行根治切除术。肝转移病灶根据患者情况进行分型治疗:227例患者进行转移病灶切除,其中153例行Ⅰ期和Ⅱ期根治性切除手术,并保留手术切缘距肿瘤1 cm,74例患者由于手术切缘有肝门静脉、肝门部淋巴结转移、胆道内有癌栓及手术切缘癌组织病理阳性等,进行姑息性切除;198例患者行化疗治疗,其中72例行全身化疗,采用FOLFOX方案,126例行含奥沙利铂方案的经肝动脉栓塞化疗治疗。

1.3 评价标准 分析患者治疗后的近远期疗效,并通过调查患者的一般资料及病理参数等情况分析影响预后的因素。采用RECIST 1.0版本评价结直肠癌肝转移的近期疗效[5]。完全缓解:所有目标病灶消失,且维持至少4周。部分缓解:所有目标基线病灶的长径总和缩小在30%以上,且维持至少4周。稳定:所有目标基线病灶的长径总和缩小但未达部分缓解,增大但未达到进展。进展:所有目标基线病灶的长径总和增大在20%以上,或出现1个以上的新病灶。通过如下公式计算治疗总有效率:总有效率=(完全缓解+部分缓解)/总例数×100%。

1.4 统计学处理 采用SPSS 13.0软件分析数据,采用Kaplan-Meier法计算生存率,采用Logrank进行预后影响因素的单因素分析,P

2 结果

2.1 近期疗效 227例患者进行转移病灶切除,4周内仅5例复发,复发率为2.20%;其余198例行化疗治疗,其中完全缓解52例、部分缓解71例、稳定43例、进展32例,其中总有效率为62.12%。

2.2 远期疗效 随访时间为24~90个月,平均随访(52.83±13.71)个月;共死亡399例,存活26例(随访截至2012年1月),中位生存期为15.27个月;0.5、1、2、3、4、5年的生存率分别为84.24%、62.35%、51.76%、22.59%、13.18%、6.12%。

2.3 影响预后的因素分析 单因素分析表明:转移瘤数目、转移瘤分布、肝转移个数、肝转移最大直径、既往化疗史、肿瘤分化程度、治疗手段均是结直肠癌肝转移预后的独立影响因素,见表1。

3 讨论

肝转移是导致结直肠癌术后生存率较低、生存期较短的主要问题,因此在原发性病灶根治切除后,需要进行肝部的肿瘤治疗。肝的解剖学位置特殊,血供丰富,来自直肠的癌细胞可通过血液转移至肝脏,引起肝肿瘤的发生。转移瘤病理学参数、患者的治疗情况等因素均可影响结直肠癌肝转移的预后,但具体因素尚不清楚,因此本研究进行相关探讨。

根据肝转移的部位及肿瘤参数等因素,本研究制订相应的方案,主要可分为病灶切除治疗和化疗治疗,发现近期效果较好,如病灶切除仅5例复发,复发率为2.20%;而198例化疗患者的总有效率为62.12%。截至随访结束,仅26例存活,且中位生存期为15.27个月,与闫东等[6]报道的15.6个月相近。随着随访时间的延长患者的生存率降低,最低位五年的6.12%。本研究采用Logrank进行预后影响因素的单因素分析发现,影响中位生存时间的因素主要可归纳为转移瘤参数(数目、分布、肝转移个数、转移最大直径、肿瘤分化程度)及患者的治疗情况(既往化疗史、治疗手段),提示应根据患者的具体情况制定相应的措施。

参考文献

[1] 梁鸿,裘正军.腹腔镜下结直肠癌根治术的现状和研究进展[J].现代肿瘤医学,2009,17(8):1575-1578.

[2] 刘建,罗时敏,曹杰,等.结直肠癌肝转移相关高危因素的研究进展[J].广东医学,2012,33(9):1346-1349.

[3] 蔡三军.结直肠癌肝转移的治疗现状[J].中华胃肠外科杂志,2009,12(4):430-431.

[4] 袁玉峰,刘志苏.结直肠癌肝转移的外科治疗策略[J].临床外科杂志,2011,19(9):588-590.

[5] 孙玉蓓,胡冰,王勇,等.重组人血管内皮抑素联合化疗治疗晚期大肠癌的临床观察[J].临床肿瘤学杂志,2009,14(9):837-840.

后进生转化总结范文4

[关键词]实践;科学发展;发展方式

1 加快转变经济发展方式的客观依据

2009年12月中央经济工作会议,从一个更高的层次、更重要的角度强调了转变经济发展方式的问题。2010年2月3—7日在中央党校举办了省部级加快经济发展方式转变的专题研讨班。十七届五中全会把它作为“十二五”经济发展的主线,可见转变经济发展方式已经成为新的发展中中国继续推进经济社会发展的一个极其重要的问题。

(1)加快转变经济发展方式是突破我国资源短缺瓶颈制约的现实要求。从我国进入21世纪后国民经济和社会发展中所面对的资源问题——资源短缺的瓶颈制约。从小到大课本上讲的:地大物博。现在我们改一个字地大物溥。我国的矿产资源总量在全球排第三位,但人均水平不到全球平均水平的60%;我国的淡水资源总量在全球排第6位,但人均水平是全球的1/4(25%);我国的耕地资源总量在全球排第四位,但目前我国人均耕地面积排名世界第126位,是世界人均耕地面积的40%以下。能源资源——三大常规性资源:煤、石油、天然气。从煤来说我国总量在全球第三,但人均不到全球平均水平的60%,确实是总量大,人均少。进入21世纪我国石油的对外依存度不断提高,2007年、2008年、2009年来超过50%。因此,加快转变经济发展方式是在21世纪的发展中我们突破资源短缺瓶颈制约的现实要求。

(2)转变经济发展方式是缓解我国生态环境恶化压力的现实要求。我国现在生态环境的态势:局部改善,总体恶化。三大常规性环境污染——水污染;大气污染;废弃污染(垃圾污染)和荒漠化严重。我国二氧化硫的排放量现在是世界第一;二氧化碳的年排放量按我国的统计现在美国第一,我国第二。若干年后我们可能超过美国。现在面临着和生态环境有关的国际压力:一是国际责任方面的压力。二是发达国家和发展中国家纷纷以生态环境为借口对我们中国设置所谓的绿色贸易壁垒。必须转变经济发展方式,发展低碳经济,才能实现低排放,低污染。才可以缓解生态环境恶化压力,才能从根本上转变我们这个国家,这个民族可持续发展的压力,真正统筹人与自然和谐发展。

(3)转变经济发展方式是我国在后国际金融危机时期适应全球经济新调整的现实要求。后国际金融危机时期全球的经济进入了深度调整期,一是速度的调整。世界经济增长速度在调整,在国际金融危机发生前按国际货币基金组织的统计,从2002—2007年世界经济平均增长速度是4.4%,从全球发展的角度来讲这是个中等偏上的水平,正是在这样的背景下我国在2003—2007年,每年的增长率都在10%以上,其中的一个重要原因是我国的外部环境比较好。但是,2009年全世界的经济是负增长,2010年后世界经济开始复苏达到2%,主要发达国家经济体的经济增长速度将会较低,2009年美国、欧元区等16国、日本都是负增长,美国占全球总量的25%,发达国家的经济总量之和是全球总量的50%~60%,如此比重的发达国家经济体的经济增长乏力,很难带动世界经济很快进入一个高速增长。二是经济结构的调整。美国为什么发生金融危机?美国人高消费。中国人光挣钱不花钱,美国人挣钱不多,花钱很多。这是表面现象,深层次的原因是世界经济失衡,美国等西方发达国家金融监管乏力才引起的。今后若干年内美国等西方国家消费率会有所下降,人们也总结经验了,得向东方国家学,向中国学存点钱,储蓄率上升,意味着国际市场需求量会相对缩小,三是贸易格局的调整。全球贸易的增速会下降和贸易保护主义倾向强化。在“后危机时代”,围绕市场、资源、人才、技术、标准等的竞争更加激烈,我国发展的外部环境更趋复杂。抢占世界经济发展新的制高点,把握好全球经济分工中的新定位,创造参与国际经济合作和竞争的新优势。我们怎么样适应这些新特点,如何适应全球发展的新的挑战,只有一条必须加快转变经济发展方式。因此,不管是从中长期发展和从经济社会协调发展来看,还是在后国际金融危机时期适应全球经济新调整迎接全球经济新挑战的现实要求来看,我国已经进入了一个不加快转变经济发展方式就不能实现新发展的关键时期。

2 加快转变经济发展方式的理论内涵

(1)经济发展的内容。在很长的时间内把经济发展等同于经济增长,从全球发展过程中也是这样,第二次世界大战以后,至少10~20年时间,到20世纪60年代前,对经济发展和经济增长不加区分。其实在我国改革开放后一定的时间里,也有这种看法。把经济发展等同于经济增长,经济增长是什么?是指一个国家或一个区域在一定时期包括生产部门的实物增长和服务部门的劳务增长在内的实际产出的增长。

在一定的时期以后,经济总量虽然有所增加,经济活动的规模有所扩大,但社会经济结构并没有自然而然地变好,甚至恶化,收入分配状况没有变好,收入分配的差距拉大了,进而引起了一系列经济社会发展中尖锐的矛盾和问题。典型的就是拉丁美洲国家,一些拉丁美洲国家在经过10~20年较高增长后,在20世纪80年代陷入了所谓失去的10年。这种发展的实践引起了人们的深思,经济发展到底等同不等同于经济增长?最后人们认识到经济发展不能简单地等同于经济增长。那么,经济发展是什么?经济发展中不仅要包括GDP的增长,还要包括经济结构向合理化、高级化、高度化演进。用我国的语言就是优化升级。现代意义上的经济发展是包括经济增长,随着经济增长而实现结构优化升级、分配改善、生活提高、福利增进、制度创新等所有内容在内的经济进步的一整个社会过程。

(2)经济发展方式及其转变经济发展方式。经济增长是社会经济活动中实际产出量的增加。是指社会经济活动中资源、劳动、资本这些生产要素投入的方式、结合的方式、消耗的方式并产生效益的这些具体方式有机结合而成的过程。转变经济增长方式是指一个国家一个社会在工业化的推进中,在经济发展的过程中从粗放型的经济增长向集约型的经济增长转变。

经济发展方式是指社会经济活动中实现经济增长的,形成经济结构的,进行收入分配的,表现生活质量的,影响生态环境等这些具体方式有机结合而成的总体方式。

转变经济发展方式是指一个国家,一个社会在工业化的推进中,经济发展要在转向集约型经济增长的基础之上,逐步实现包括产业结构优化升级,收入分配的更加公平合理,人民群众生活水平和生活质量的提高,生态环境的保护和改善,能源资源的节约等这些内容在内的经济发展总体方式的转型。它是在更高层次上,更重要的角度,更全面的对我们经济建设中推动经济转型的一个总体认识。

从“转变经济增长方式”,到“转变经济发展方式”,再到“加快转变经济发展方式”,这是我们党对我国现代化发展阶段的敏锐洞察,是继续推进中国现代化航船的战略抉择。加快转变经济发展方式,关系改革开放和社会主义现代化建设全局。

3 加快转变经济发展方式的新任务和路径选择

(1)我国经济发展方式的主要特征和面临的矛盾。①经济增长高度依赖投资和出口,消费对经济增长的贡献率偏低。2001—2008年我国的进口率从2.1提高到7.9,外贸依存度从38.9提高到59.8,投资率由36.5上升到43.5,消费率由61.4下降到35.3,我国的居民消费率是世界上所有经济体中最低的。投资严重偏高,投资率高,出口率高,关键是储蓄率高,在储蓄率保持高水平的情况下,想要压低投资和减少进出口率事实上是不可能的。为什么储蓄率高?有三个决定性因素:一是人口结构和居民的消费结构。二是周期性的经济波动。三是经济体制和政策因素。②经济增长高度依赖第二产业,特别是制造业的扩张,服务业发展相对滞后,特别是生产型服务业。进入20世纪90年代后,我国还出现了重化工业加快发展的高潮,为什么大家对发展重化工业这么感兴趣?没有无缘无故的爱,也没有无缘无故的恨。还是我国的财税体制对工业发展有激励作用。地方政府为什么愿意搞重工业?因为它投资规模大,增加值率大,增值税率大,对GDP作用大,效益大。如果地方政府不是以增值税为主体的话,可能会发生变化。③经济增长高度依赖生产要素的高强度投入,科技进步和创新对经济增长的贡献率偏低。④收入分配向政府和企业倾斜,居民生活水平没有随着经济的增长同步增长。⑤经济发展最重要的资源是人力资源,但我们的发展理念中对人力资源的开发重视不够,人力资本积累水平偏低。

(2)加快转变经济发展方式的基本内容。①转速度。从高速的经济增长向更加注重经济增长的质量和效益的持续和稳定适度的增长转变。②转需求。外需带动型经济向内需拉动型转变,力足扩大内需为主,把扩大内需为主和稳定外需结合起来。③转支撑。从技术引进依赖型经济向自主创新支撑型经济转变。面对新的发展形势在后国际金融危机时期继续参与经济全球化,参与国际经济合作和竞争的新优势我们必须高度重视自主创新。④转资源。从资源支撑(消耗)型经济向资源节约型经济转变。⑤转结构。以提高居民收入分配和社会保障制度为重点来推进国民收入分配标准。一是调整政府与企业的收入分配关系。二是调整政府与居民收入的分配关系。三是调整居民与企业的收入关系。

加快经济发展方式转变要在“加快”上下工夫,见实效。一要加快经济结构调整,促进三次产业在更高水平上协同发展。二要加快推进农业发展方式转变。要坚持不断地推进农业结构战略性调整,完善现代农业产业体系,提高农业发展质量和效益。还要在重视发展社会事业改善民生上下工夫。发展社会事业和改善民生,是转变发展方式、扩大国内需求的重要着力点。

后进生转化总结范文5

[基金项目] 国家“十一五”科技支撑计划项目(2008BAI51B03);国家中医药管理局中药口服制剂释药系统重点研究室开放基金课题(2011NDDCM01002)

[通信作者] *贾晓斌,Tel/Fax:(025) 85637809,E-mail:

[作者简介] 于兆慧,硕士研究生,Tel:(025)85608672,E-mail:

[摘要] 该实验采用超声辅助酶解人参总皂苷以制备人参稀有皂苷Compound K。以转化率为指标,通过单因素考察超声功率、超声时间等超声预处理因素和pH、温度、底物浓度、酶用量、反应时间等酶解因素对转化率的影响,并应用响应面法试验优化制备工艺;采用MS,/1H,13C-NMR鉴定酶解产物。结果表明,超声辅助酶解反应的最适条件为超声功率250 W,超声时间15 min,酶解pH 5.5,酶解温度50 ℃,酶解时间36 h,酶用量-底物4∶5,底物质量浓度1.0 g・L-1;反应产物相对分子质量622.4,核磁图谱证实产物为人参稀有皂苷Compound K。在此条件下,以人参总皂苷计,人参稀有皂苷Compound K转化率为6.91%。该工艺反应条件温和,转化率较高,工艺简单可靠,适合工业化生产。

[关键词] 人参总皂苷;人参稀有皂苷Compound K;超声辅助;酶解;响应面法

人参稀有皂苷Compound K(CK)是五加科人参属植物人参的一种二醇型稀有人参皂苷,被世界各个国家广泛用于疾病的预防和治疗[1]。近年来研究发现,人参稀有皂苷CK在抗肿瘤、抗糖尿病、神经保护、抗衰老及抗炎等方面都具有明显的作用[2-8]。但CK在植物中的含量较低,单纯分离提取难以满足应用需求[9]。大量研究表明,人参二醇型皂苷在人参总皂苷中含量较高,且人参皂苷二醇组可以通过生物转化得到CK[10-12],因此可以通过酶解的方法得到CK。生物酶解技术具有选择性高、反应条件温和、转化率高、分离纯化容易、对环境无污染及成本低廉等优点[13],近年来在中药活性成分制备中已经具有了一定的研究价值。以蜗牛酶等水解中药提取物及中药单体成分中的糖苷键,可制备具有较高活性的低级苷或苷元[14-15]。本文研究超声辅助酶解人参总皂苷,利用超声波的空化效应、热效应和机械振动等作用[16],促使底物与酶充分结合,从而提高酶解转化率。另外,本文采用蜗牛酶酶解人参总皂苷制备CK,大大降低实验成本,更利于工业化生产。因此,本实验对人参稀有皂苷CK的规模化制备具有重要的理论意义,并在一定程度上为CK 的产业化提供了实验基础。

1 材料

Agilent 1200 高效液相色谱仪(美国 Agilent公司);UV-2201型紫外-可见分光光度计(日本岛津);数显气浴恒温振荡器(金坛市双捷实验仪器厂);SK8210 HP型功率可调超声波清洗机(南京以马内利仪器设备有限公司);Mettler AL204 1/10万天平(梅特勒-托利多仪器有限公司) ;精密pH计(上海精密科学仪器有限公司);瑞士Bruker(AV 300)核磁共振仪,溶剂为氘代DMSO。

人参总皂苷(南京泽朗医药科技有限公司);人参皂苷Re(中国食品药品检定研究院);人参稀有皂苷Compund K (自制,纯度>98%);蜗牛酶(北京拜尔迪生物技术有限公司);甲醇、乙腈为色谱纯,水为高纯水,其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 人参总皂苷的含量测定

2.1.1 标准曲线制备[17] 精密称定人参皂苷Re对照品10 mg,置10 mL量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇匀,即得。分别精密吸取人参皂苷Re对照品溶液10,20,30,40,50 μL分别置10 mL带塞试管中,将试管置于冰水浴中,分别加入40,30,20,10,0 μL甲醇后,再加入85%香草醛乙醇溶液0.5 mL ,77%硫酸5.0 mL,摇匀,混合物置60 ℃恒温水浴中加热10 min后,立即在冰水中冷却15 min,并在另一试管中加甲醇50 μL,加随行试剂,作为空白对照,显色溶液在(546±1) nm波长处测定吸收值,求得回归方程Y=0.004 1X +0.017 2,R2=0.999 9。

2.1.2 人参总皂苷的含量测定 取人参总皂苷提取物10 mg,精密称定,按2.1.1项操作,测定吸光值,计算人参总皂苷的含量,结果平均质量分数为8.79 g・L-1,RSD 2.2%。

2.2 人参稀有皂苷CK转化率的测定

2.2.1 色谱条件 ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相乙腈(A)-水(B),梯度洗脱,0~8 min,40% A;8~35 min,64.3% A;35~45 min,40% A;检测波长203 nm;流速1.0 mL・min-1;柱温30 ℃;进样量20 μL。

2.2.2 对照品溶液的制备 取人参稀有皂苷CK 10.0 mg,精密称定,置于10 mL具塞量瓶中,加适量无水乙醇溶解,并定容至刻度,超声除去气泡,再用无水乙醇补足至刻度,即得1.15 g・L-1人参稀有皂苷CK对照品储备液。

2.2.3 供试品溶液的制备 精密称取一定量的人参总皂苷和蜗牛酶,加入一定pH的缓冲溶液定容至10 mL,在一定功率的超声仪中超声一段时间,放入数显气浴恒温振荡器,调节转速(150±5) r・min-1,在一定温度下反应一段时间,即得供试品的混悬溶液。

2.2.4 线性关系考察 精密量取人参稀有皂苷CK储备液,加无水乙醇稀释成57.5,34.50,23.00,17.85,13.00,8.05,5.75,2.30 mg・L-1的对照品溶液,进样测定。以质量浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,进行线性回归。得回归方程A=3.040 8C+3.624,R2=0.999 3,表明CK在2.3~57.5 mg・L-1线性良好。

2.2.5 人参稀有皂苷CK 转化率的测定 精密量取0.2 mL转化后的混悬液,加无水乙醇定容至10 mL,摇匀后用0.45 μm的微孔滤膜过滤,进高效液相色谱仪检测,计算转化率。转化率=CV/W×100%,式中C为转化液中人参稀有皂苷CK的质量浓度(mg・L-1),V为转化液体积(L),W为底物人参总皂苷的质量(mg)。

2.3 超声辅助条件的确定

2.3.1 超声功率对转化率的影响 按2.2.3项下方法酶解人参总皂苷,固定超声时间15 min,考察超声功率100,200,250,300,400,500 W 对人参总皂苷酶解液转化率的影响,见图1。在本实验研究范围内,超声功率一定程度的增大有助于提高人参稀有皂苷CK转化率,原因可能是超声的空化效应、热效应和机械振动等作用,促使底物与酶充分结合,从而提高酶解转化率。考虑到仪器的保养,后续实验选择在250 W的超声功率条件下进行。

2.3.2 超声时间对转化率的影响 按2.2.3项下方法酶解人参总皂苷,在超声功率250 W的条件下,考察超声时间0,1,3,5,10,15,20 min对人参总皂苷酶解液转化率的影响,见图2。采用超声辅助酶解的人参稀有皂苷CK转化率明显高于未经超声辅助酶解的组。超声时间低于15 min时,人参稀有CK转化率与超声时间呈正相关;15 min时,转化率最大;超过15 min后,转化率显著减小。原因可能是蜗牛酶的活性受到了抑制,推测酶的结构发生了改变,这与超声波作用于酶的复杂机制有关,从而出现转化率降低的现象。

2.4 蜗牛酶转化人参总皂苷的单因素考察

2.4.1 pH对转化率的影响 按2.2.3项下方法酶解人参总皂苷。在其他条件不变的情况下,缓冲液pH分别为4.5,5.0,5.5,6.0,6.5,7.0。人参稀有皂苷CK的转化率分别为3.01%,5.29%,5.78%,5.42%,5.16%,4.90%,见图3。蜗牛酶在一定pH范围内表现出活性,大于或小于最适pH,都会降低酶活性。分析可能的原因主要表现在过高或过低的pH都会影响蜗牛酶的稳定性,进而使蜗牛酶遭受不可逆破坏。因此本实验选择酶解反应最适宜的pH为5.5。

2.4.2 温度对转化率的影响 按2.2.3项下方法酶解人参总皂苷。在其他条件不变的情况下,反应温度分别为25,37,50,60,70 ℃。人参稀有皂苷CK的转化率分别为4.51%,5.10%,5.89%,5.42%,5.23%,见图3。人参稀有皂苷CK的转化率随着反应温度的升高而增加,当温度达到50 ℃时,转化率达到最大值,之后随着温度的继续增加转化率降低。大量文献推理可知,蜗牛酶在适宜温度范围内,酶活性较强,酶促反应速度较大,而过高或过低的温度都会降低蜗牛酶的催化效率,并且温度过高时蜗牛酶的结构会发生不可逆转的破坏,因此本实验将50 ℃作为酶解反应的最适宜温度。

2.4.3 反应时间对转化率的影响 按2.2.3项下方法酶解人参总皂苷。在其他条件不变的情况下,反应时间分别为12,24,36,48,60,72 h。人参稀有皂苷CK的转化率分别为3.59%,4.93%,6.14%,6.12%,6.10%,6.09%,见图3。随着酶解时间的增加,人参稀有皂苷CK的转化率不断升高,当反应时间超过36 h后,人参稀有皂苷CK的转化率增长缓慢直至成水平趋势,考虑到经济等因素,选择36 h作为酶解反应的时间。

2.4.4 酶用量对转化率的影响 按2.2.3项下方法酶解人参总皂苷。在其他条件不变的情况下,酶与底物的质量比分别为1∶10,1∶5,2∶5,3∶5,4∶5,1∶1,2∶1。人参稀有皂苷CK的转化率分别为5.18%,5.39%,5.60%,5.72%,5.81%,5.90%,5.95%,见图3。随着酶用量增大,转化率增高,且增加的幅度越来越小,这可能是高浓度的酶反而有抑制酶解反应的作用。

2.4.5 底物质量浓度对转化率的影响 按2.2.3项下方法酶解人参总皂苷。在其他条件不变的情况下,底物质量浓度分别为1.0,5.0,10.0,20.0,40.0 g・L-1。人参稀有皂苷CK的转化率分别为6.09%,5.47%,4.68%,4.10%,3.04%,见图3。由结果可知,人参稀有皂苷CK的转化率随底物质量浓度的增大而减少,当底物质量浓度为1.0 g・L-1时,转化率达到最大值。分析可知高浓度底物降低了水的有效浓度,降低了分子扩散性,从而降低了酶解反应速度。过量的底物聚集在蜗牛酶分子上,生成无活性的中间产物,不能释放出蜗牛酶分子,从而也会降低酶解反应速度。

2.5 响应面优化试验设计及其结果

优化蜗牛酶酶解人参总皂苷制备人参稀有皂苷CK,其主要影响因素是反应温度、酶解pH和酶用量,采用响应面法中的Box-Behnken设计,以反应温度(X1)、酶解pH(X2)和酶用量(X3)3个因素为自变量,每个因素取3水平,分别以-1,0,+1编码,以人参稀有皂苷CK的转化率为响应值,进行3因素3水平试验。因素与水平见表1,结果见表2。

采用Design-Expert.V8.0.6.1软件对表2结果进行响应面回归分析,以人参稀有皂苷CK的转化率(Y)为响应值,得拟合方程Y=5.54+0.15X1+0.15X2-0.036X3-0.028X1X2-0.025X1X3-0.064X2X3-1.44X12-1.11X22+1.38X32。方差分析及回归系数显著性检验结果见表3。所建立的二次多项模型具有高度的显著性(P

由表3可知,X1,X2,X12,X22,X32都是显著的,因此各因素对人参稀有皂苷CK的得率不是简单的线性关系。模型的P

通过回归模型预测的人参稀有皂苷CK转化率的最佳工艺条件为:温度49.18 ℃,酶解pH 5.55,蜗牛酶用量0.8 mg,在此条件下,人参稀有皂苷CK转化率理论上可达6.97%。考虑到实际操作的可行性,将人参稀有皂苷CK的酶解条件在回归方程得到的理论值基础上修正为温度50 ℃,酶解pH 5.5,酶解用量为0.8 mg,采用此工艺条件进行验证实验,经超声辅助处理后,实际测得人参稀有皂苷CK的转化率为6.91%,与实际值相差不大,说明采用响应面法得到的工艺参数可靠,具有一定的实际价值。

2.6 人参稀有皂苷CK的纯化和结构鉴定

取酶解产物加入适量的乙醇,使其含乙醇体积分数达80%,沉淀除杂,回收乙醇后离心,取上清液,得人参稀有皂苷CK粗溶液。将人参稀有皂苷CK粗溶液通过C18硅胶柱,依次用50%,60%,70%,80%,90%,100%乙醇进行梯度洗脱。收集的80%乙醇洗脱液,真空旋转蒸发,去除溶剂,即得人参稀有皂苷CK粗品,无水乙醇反复重结晶,得到人参稀有皂苷CK单体,纯度>98%。结合MS,/1H,13C-NMR谱分析,分析结果与文献[18]报道的一致,由此确定该化合物的结构为人参稀有皂苷CK(ginsenoside,CK)。

3 讨论

本实验采用超声波辅助酶解的方法,利用超声波的空化效应、热效应和机械振动等作用,促使底物与酶变成微小的粒子,接触面积变大,能更充分的结合,进一步便于蜗牛酶发挥酶解作用,在其他条件相同的情况下,从而使人参稀有皂苷CK的转化率从3.27%提高到6.91%。同时,本实验所采用蜗牛酶是一种含纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、蛋白酶等20多种混合酶的复合酶,酶解能力较强,且能够很好地保持产物的结构,但是从绿色经济环保的角度考虑,如果人参稀有皂苷CK产业化生产将消耗大量的蜗牛酶,也是一种较大的经济负担和环境压力,因此蜗牛酶的循环使用需要进一步研究。

据文献报道可知,人参的活性成分主要是皂苷类化合物,其中人参皂苷Rb1,Rb2,Rc等人参二醇型皂苷都能被蜗牛酶酶解为人参稀有皂苷CK。验证试验表明,酶解液中0 h时,人参皂苷Rb1的质量分数为1.291 g・L-1,人参稀有皂苷CK的质量分数为0 g・L-1;酶解反应36 h后,人参皂苷Rb1的质量分数为0、人参稀有皂苷CK的质量分数为2.013 g・L-1。经过计算,人参稀有皂苷CK的含量显著高于由人参皂苷Rb1酶解转化所得,从而说明人参总皂苷中有其他成分酶解转化为人参稀有皂苷CK。因此,本文研究的超声辅助酶解人参总皂苷制备人参稀有皂苷Compound K,方法简单可行,得率较高,产物分离纯化难度小,为产业化生产提供了一个新的思路。

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后进生转化总结范文6

【关键词】 草酸钠;肝素钠;谷丙转氨酶;总胆红素

临床实验室中使用的抗凝剂种类很多,如凝血酶、草酸盐、肝素钠、EDTA、柠檬酸盐等,这些抗凝剂对保证血浆和细胞的分离、缩短病人等候时间具有重要意义,但抗凝剂的选择不当会造成检测结果不准确,造成误诊误治。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试剂 谷丙转氨酶、总胆红素由浙江伊利康生物技术有限公司生产(批号070501、070601),草酸钠试剂由北京化学试剂公司生产(分析纯99.97 %,分子量134.01,批号040803),肝素钠由齐鲁制药有限公司生产(批号060116)。

1.1.2 仪器 日立7060型全自动生化分析仪。

1.1.3 血清标本 医院门诊及住院病人154例患者血浆标本,平均年龄42.5岁,男76例,女78例,平均年龄39.5岁。

1.2 方法 采取病人静脉血,分为采用草酸钠、肝素钠两种抗凝剂处理和不使用抗凝剂处理3个组,草酸钠抗凝浓度为0.1 mol/L,肝素钠为125 IU/mL。静脉血经离心后吸取血清或血浆分别进行谷丙转氨酶和总胆红素测定。按试剂说明书设置谷丙转氨酶和总胆红素实验参数。

1.3 统计学处理 应用NOSA统计学软件处理数据,使用草酸钠、肝素钠抗凝剂处理的血液测定结果分别与不使用抗凝剂测定结果进行比较。

2 结果

草酸钠组谷丙转氨酶活力显著低于对照组,肝素钠组总胆红素含量明显高于对照组。见表1、表2。表1 草酸钠抗凝血清谷丙转氨酶测定结果表2 肝素钠抗凝血浆总胆红素测定结果

3 讨论

在临床实验室中,草酸钠常用作抗凝剂,但可以抑制乳酸脱氢酶活性[1],因此,在测定谷丙转氨酶时,可以使谷丙转氨酶试剂中的乳酸脱氢酶活性降低,进而降低指示反应的反应速度,使单位时间内NAD+生成减少,实时反应曲线斜率减小或变平缓,使谷丙转氨酶测定结果偏低,特别是测定高谷丙转氨酶活性标本时,其下降更加明显,造成测定误差。

肝素为含有长短不一的直链阴离子粘多糖,平均分子量为15 000左右,带有大量的负电荷,呈强酸性。重氮法测定总胆红素时,试剂中的十一烷基二甲基溴化铵是季铵盐类有机物,在水中Br一被OH一取代后的有机化合物是季铵碱(强碱),二者在水中相遇后进行复杂的化学反应形成不溶于水的盐类化合物,反应液出现混浊,使试剂的透光度下降、吸光度升高,造成总胆红素的测定值升高[2]。

因此,我们在使用抗凝剂测定肝功能时,一定要注意抗凝剂对测定结果的影响,以免产生严重偏差,给病人造成误诊误治。

参考文献