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研究性学习方向范文1
[关键词]比较文学;形象学;自由;他者;社会集体想象物
一、引言
约在6世纪时,阿尔泰地区的突厥人强盛起来,居住在印度北部旁遮普省的一些吉普赛民族部落,于10世纪左右被迫离开自己的家乡,踏上了流浪的征途。随着时间的流逝以及生活的磨砺,逐渐形成了他们自由无羁的天性。吉普赛人浪迹世界各地,约在14、15世纪,他们流落散居到欧洲各国。继而西方文学作品中出现了一系列吉普赛形像:文艺复兴时期西班牙塞万提斯创作的《吉普赛姑娘》,古典主义时期法国的喜剧大师莫里哀的《司卡班的诡计》。值得研究的是,19世纪出现了普希金的《茨冈》,列夫。托尔斯泰的《茨冈人生活的故事》,梅里美的《卡门》,维克多,雨果的《巴黎圣母院》,高尔基的《马卡尔・楚德拉》等,都塑造了浪漫美丽、独特而鲜明的吉普赛女性形像。
此类形像为何如此集中在19世纪出现?以此作为研究的基点,来进一步探讨其中的深层原因。目前,学术界对于此类形象的研究大多囿于社会批评的角度,而少于从比较文学理论视域出发去求根溯源。
二、吉普赛女性形像是“自由”和“自然”的象征
吉普赛人被认为是自由、爱情、歌舞的象征由来已久。荷兰画派的奠基人哈尔斯的代表作《吉普赛女郎》,表现的是尼德兰民族胜利后,新教徒追求自由的时代倾向。画中的吉普赛女郎无拘无束的天性表现得非常生动,特e是那扭头一笑,会心中透出无伤大雅的轻蔑与嘲讽。
19世纪俄罗斯“民族文学之父”普希金,于1824年创作的浪漫主义叙事长诗《茨冈》。贵族青年亚历克因躲避官司而出走,与一茨冈女子真菲拉相爱。两年后,真菲拉爱上了另一个茨冈男子。出于报复,亚历克杀了真菲拉。真菲拉在死前愤怒地说:“……亚历克,你也死了吧!我为爱他而死……”真菲拉视死如归地维护自己生命的自由和精神的独立。
法国文学大师维克多・雨果发表于1831年的浪漫主义的典范之作《巴黎圣母院》,塑造了一位完美的吉普赛女子――爱斯美拉尔达。奇特的装束、超凡的舞蹈、美妙的歌声、脱俗的外表、善良的内心、自由的生活,深深触动了所有文明人的心灵。在封建制度和宗教的双重统治下,如爱斯美拉尔达那般自由的生命个体,必遭扼杀是毋庸置疑的。
法国著名小说家梅里美创作于1845年的中篇小说《卡门》,加之同名歌剧的演出,使得卡门这一吉普赛女性形像家喻户晓。当唐・何塞请求卡门弃恶从善一起去美洲时,不受任何约束的卡门,对何塞大喊:“继续爱你,这不可能。和你一起生活,我不愿意!” 最终死在何塞刀下,表现出选择自由的决绝态度。
伟大的无产阶级文学家高尔基的处女作《马卡尔・楚德拉》发表于1892年茨冈女子娜达和本族青年罗伊可・佐巴尔彼此相爱,但对他们来说,世界上最宝贵的东西是自由。佐巴尔为了维护自己灵魂的自由和做人的尊严而杀了娜达。娜达死前对他说:“我从来都没爱过任何一个人,罗伊可,可是我爱你。可是我仍旧爱我的自由!这自由,罗伊可,我爱它胜过爱你”。可以看出,娜达也是为精神自由而选择了献出自己年轻的生命。
罗素说:“爱情只有当它是自由自在时,才会叶茂花繁。认为爱情是某种义务的思想只能置爱情于死地”。因此,吉普赛女性形像是作为“自由”的象征被作家所创造、读者所接受的。而吉普赛女性形像不仅是“自由”的象征,她们也是“自然”的象征。
吉普赛女郎伴随着19世纪浪漫主义文学进入我们的视野绝非偶然。一个时代的文学追求必然表现为大致相同的美学理想,“自然”与“激情”这一浪漫主义文学的美学追求,由吉普赛女性形象演绎得淋漓尽致。“美在自然”这一自古以来的命题,它的最高形式是和谐,是人与自然的和谐。然而,自人类跨入文明时期后,这种和谐被打破了,重建和谐随之成为艺术追求的一大母题。
在普希金《茨冈》中,有大段景物描写人与自然和睦相处。人和人的关系简单自然而纯朴,亚历克告诉真菲拉他所抛弃的生活:“有什么好惋惜?你真不知道,你真无法想象,那城市多么不自由,又多么憋气!关在围墙里,成群的人们吸不到早晨的新鲜空气,闻不到草原上春天的气息;羞于谈情说爱,还压制思想,拿自己的自由去做交易,在偶像面前顶礼膜拜。求的是金钱,求的是奴役。”亚历克回答真菲拉:城里热闹的娱乐算什么?那里没有爱,也没有欢乐。而姑娘……你没有富丽的衣装,没有珠宝,也没有项链,和她们相比,却要美得多!你不能变心,我亲爱的朋友,而我呀……只有一个愿望,和你共享爱情和悠闲,共享这心甘情愿的流放!文明的贵族生活不由分说扼杀了人天性中的美好成分。亚历克实际上早已是文明异化的代表,看重所谓的权力――对女性的占有,否则,就拔刀相向。何赛、弗卢洛、佐巴尔无一例外成为维护男性价值标准的符码。正如荣格所阐述的,集体无意识是原始祖先传授下来的,是先天结构的遗传性,它预示个体按人类在世代繁衍中形成的思维和行动方式活动。
李银河在《女性主义》第六章“生态女性主义”指出,新兴的文化生态女性主义认为:月经使女性与自然过程(月亮圆缺)保持有规律的联系,使女性能同他人在社会与自然关系中保持关怀的关系,作出敏感的决定。从女性的生理角色及照料子女和家庭,女性发展了关怀的伦理,这一伦理原则对于重新界定人类与自然的关系是很重要的。生态女性主义指出,女性比男性更接近自然。女性和自然,不是体现,不是贴近,而是等于。她们本身就是“自然”。她们更深地生根在大地中,直接卷入了自然的伟大的循环节奏中。在文明社会的女性,日渐远离了生命本真之美,女性这一最能体现自然之美的群体在文明的状态中尽失自然之神韵。吉普赛女性形像之所以光彩照人正是因为她们洗尽铅华后的自然之美,养育她们的正是自然的土壤和空气。
总之,19世纪的吉普赛女性形像彰显共同之处:主要是“自由”和“自然”的象征。这一点不仅表现在文学作品中,也表现在音乐作品中,如比才的歌剧《卡门》,萨拉萨蒂的名曲《流浪者之歌》以及勃拉姆斯的声乐套曲《吉普赛之歌》等。
三、吉普赛女性形像的同中之异
比较文学形象学研究不仅仅局限于研究对象的共性,也分析研究对象的个性,挖掘同中之异。既然“形像”是加入文化和情感的主客观因素的个人和集体的表现,那么同类形象在趋同时也会有所不同。
几百年来,这个没有国籍的流浪民族,远离故土风餐露宿与自然亲密为友。言普赛人选择这种生存方式,也就选择了自由,使他们得以把文明的污染远远抛在大篷车的后面。他们舒展着未受理性文化障碍所异化的自然天性和自然行为;他们用感性、直觉和大自然对话,无意识地遵循着生命本体的自由冲动,提供给人们审视自身生存状态和作家进行艺术想象的无尽空间。
研究性学习方向范文2
关键词:初中数学;研究性学习;创新意识,培养
传统“接受性教学”常常以教师为中心,以学生是否记住书本知识为目标,学习难以成为学生作为一个完整的人的内在需要。而“研究性学习”着力于学生的学,鼓励学生以类似科学研究的方式主动的获取知识,应用知识,解决问题。它改变了学生以单纯接受教师传授知识为主的学习方式,有益于学生加深对知识的理解和掌握,提高其发现问题、分析问题、解决问题的能力,培养其创新意识。研究性学习是指教师或其他成人不把现成结论告诉学生,而是学生自己在教师指导下自主地发现问题、探究问题,获得结论的过程。学习活动应当是主体积极参与的一种源自于内在需要的活动,是学生不断地积累经验、改变经验、重组经验,不断地更新自我、充实自我的过程。作为一种教学方式和学习方式,研究性学习是渗透于所有学科、所有活动之中的,它具有开放性、探究性、实践性三个显著的特点。在数学学科领域中,结合研究性学习的三个特点,引入研究性学习的思想和方法,使书本内容与学生的生活联系起来,在书本知识的教学中能够让学生联想起他的生活经验,让学生全面发挥各种感官的作用,满足内在各种需要。
一、数学开放题与研究性学习的渗透
数学开放题的核心是培养学生的创造意识和创造能力,激发学生独立思考和创新的意识,是一种全新教育理念的体现。数学开放题的构造主要有两方面:一是问题本身的开放性而获得新问题,其二是问题解法的开放性而获得新思路。数学开放题体现了数学研究的思想方法,解答过程是探究的过程。数学开放题既展示了数学问题的形成过程,又反映了解答对象的实际状态,有利于培养学生思维的灵活性和发散性。因此,利用数学开放题引入研究性学习应是十分有意义的。比如,ABBD,CDBD,且AB=6cm,CD=4cm,BD=14cm,点P在BD上移动,并使ABP与P,C,D组成的三角形相似,求PB的长。
由于没有指明ABP和PCD之间顶点的对应关系,分析题意可得两种情况:(1)ABP∽PDC,有6∶(14-PB)=PB∶4,解之得PB=2或12;(2)ABP∽CDP,有6∶4=PB∶(14-PB),解之得PB=8.4.所以本题有三个答案:PB的长为2,12或8.4.这是问题本身条件的不确定性而产生结论的多样性的典型题。再如,讲完直角三角形相似后,提出如下问题:CD是RtABC斜边上的高,根据条件,结合图形,直接写出你能得出的结论,并加以证明。
学生从角、边、三角形面积、三角形相似等关系出发,得到很多结论。其中学生由三角形相似导出:ACD∽BCDCD∶AD=BD∶CDCD2=AD?BD,同理AC2=AD?AB,BC2=BD?AB.学生们注意到这几个式子很有美感,这正是今天要介绍的新内容――射影定理。再提示学生进一步观察后面两个式子,相加后得到什么结论?得到AC2+BC2=AB2,是勾股定理。学生发现了证明勾股定理的又一方法。这样探究,极大激发学生探索的兴趣,调动了学习的积极性,促进了学生主动学习。
二、探究性教学模式与研究性学习的渗透
数学学习,本来就是学生的一种学习活动,学习的方式不是被动地记忆、理解教师传授的知识,而是敏锐地发现问题,主动地提出问题,积极地寻求解决问题的方法,探求结论的自主学习过程。皮亚杰指出:“逻辑――数学的真理,并非是由客观对象中直接抽象出来的,而是主体施加于对象之上的动作,也就是有主体的活动中抽象出来的。”我打破传统师生被动“授受”的状态,构造如下学生自主探索的新模式:教师组织、指导、参与,提供相关材料,相机匡扶、引导,解答学生疑问。创设情景诱发探索欲望(制造冲突、悬念,目标导引生活需要……)能动感知、分析、比较、抽象、概括、直觉、验证、类比、归纳……主体探索群体讨论、交流,探索中经受挫折,挫折中体验合作,合作中获得成功,成功中增强自信。解释应用,比如,在进行“过三点的圆”的教学时,我发给每位学生一个破碎乐得圆形硬纸片。同时指出,每位同学拿到的是一台机器上破碎了的皮带轮,因为皮带轮坏了,机器只能停转,生产只好停下。现在请大家发挥自己的聪明才智,比比看谁能最快重新配制一个同样大小的皮带轮,使机器尽快恢复运转?学生们立时忙乎起来,有的用量角器、圆规比比划划,一段弧一段弧地连接;有的几个人在一起唧唧喳喳,把各自的碎片拿来拼凑;……在这一教学过程中,学生学到的不仅是一个几何定理,更重要的是学会了像数学家一样进行研究和创造。
实践证明,在遵循教学规律的基础上,采用生动活泼,富有启发、探索、创新的教学方法,能充分激发学生的求知欲,培养学生的兴趣,是提高课堂教学效果和培养学生研究能力的重要途径。
三、社会实践与研究性学习的渗透
国家数学课程标准强调:“好的数学教育应该从学习者的生活经验和已有的知识背景出发,提供给学生充分进行数学实践活动和交流的机会。”研究性学习强调理论与社会、科学和生活实际的联系,能够克服传统教学中脱离学生自身生活和社会生活的倾向,为学生的生活经验的积累和社会实践能力的锻炼开辟渠道。例如,甲乙两个居民小区在公路的两旁,现市政府拟在公路边上建一个生活用品商场,问建在公路何处能使商场到两小区的距离和最短?再如,若甲乙两个居民小区在公路的同旁,(1)问建在公路何处能使商场到两小区的距离和最短?(2)问建在公路何处能使商场到两小区的距离相等?在这样的活动中,无疑会激发学生学习数学的主动性,且能开拓学生创造性思维能力,养成善于发现问题,独立思考的习惯。学生在应用数学知识解决实际问题的过程中,加深了对数学学科的理解和热爱,不仅学到了数学知识,而且有效地培养了创新精神和实践能力。
也许你会觉得具有生活背景和实际意义的数学问题,教材上提供的很有限,书本外实在也找不到几个。其实生活中处处充满着数学,只要你是有心人!我们早晨起床刷牙用的牙膏,细心的人会发现,牙膏的包装有大小,其价格也不相同,你想过大小包装和其价格之间的关系吗?你吃东西,想过营养成分的搭配吗?你在教室里,想过坐在什么位置才能最清楚地看到黑板上的字吗?你在开灯关灯时,想过灯的位置与照明度的问题吗?……这些都与数学有关!数学与生活是如此的息息相关,让我们发现并研究这些数学问题吧!
总之,中学生蕴藏着极为丰富和巨大的创造潜能,关键是我们的教育能否提供他们发挥其创造潜能的机会。研究性学习的适时提出,是适应社会发展的要求的,尤其是适应学生个性发展的需要的。抓住研究性学习的三个特点,逐步向数学学科领域渗透,与传统“接受性学习”相融合,一定能最大程度地开发学生的潜能。
参考文献:
[1]肖柏荣:《数学教学艺术概论》,安徽教育出版社
研究性学习方向范文3
关键词:家庭沟通;家庭关系;恋爱关系
家庭作为人成长的第一环境,家庭关系对个人的人际交往和亲密关系有深远影响。绝大多数人会有意无意地将原生家庭的沟通方式代入到恋爱关系中。研究大学生家庭沟通方式对恋爱关系的影响,有助于了解大学生在恋爱过程中所采用沟通方式的起源及其对恋爱关系产生的影响。本研究将质性实证案例与既往研究结论相比对,关注个体差异,更深入地探索家庭沟通方式与恋爱关系之间的关系。
1 对象及方法
1. 1研究对象
结合方便抽样和目的抽样的方法选取被试者,访谈对象均为北京理工大学在校本科生,且有过恋爱经历。访谈对象共3人,其中男性1名,女性2名。工科生、理科生、文科生各1名。
1.2研究方法
根据研究目的编写访谈提纲,主要从七个方面了解大学生家庭沟通方式对恋爱关系的影响,具体包括:(1)家庭关系的类型;(2)家庭沟通的频率及内容;(3)家庭规则及处理家庭成员间差异和矛盾的方法;(4)恋爱关系的类型;(5)恋人间的沟通频率及内容;(6)恋人间处理差异和矛盾的方法;(7)恋人间沟通与家庭沟通方式的相似性。
在访谈对象知情同意的情况下,运用半结构式访谈收集资料,对每位访谈对象分别访谈一次,每位访谈对象的访谈时间均在20分钟左右。将访谈录音逐字转录,并对访谈资料根据“受访者代码”和“句数”进行编码,以资料编码“W-001”为例,代表“受访者王同学在访谈中说的第一句话”。访谈资料的分析采用类属分析法和情景分析法相结合的方法,在访谈资料中寻找反复出现的现象及概念,将具有相同属性的资料归入一类,并依据访谈资料中出现的现象对以后可能出现的情况和后果进行预测。
2 理论基础
2.1弗洛伊德的精神分析理论
成人人格基本在口唇期、期和性器期阶段就已形成,成年后的人格形态都取决于早年环境和早年经历。人的早年经历会通过影响人的深层潜意识的方式,进而对个体的人格塑造和行为方式产生决定性影响。而早年经历往往发生于家庭之中。
2.2萨提亚的联合家庭治疗模式之家庭沟通形式
萨提亚认为家庭沟通方式实际上反映了家庭成员自尊感的高低,自尊感越高的人沟通越表里如一,自尊感越低的人沟通越表里不一。良好的家庭沟通是每个人都可以表达自己的意见,回应他人意见,不同的意见会被尊重。采用这种沟通方式的家庭有良好的家庭关系,能够应付各种困难。而不良沟通则有讨好型、责备型、超理智型和打岔型四类。
3 结果
3.1大学生的家庭沟通方式会对其恋爱关系产生显著影响,但这种影响并非绝对正相关
既往研究认为,父母教养方式越积极,大学生的恋爱浪漫水平越高,恋爱态度也越积极。反之,父母关系越冷淡,恋爱的亲密程度越低。但是,这一研究结论与本文的个案经历有些出入。
“还是没遇到合适的人吧,我是不会将就的。我比较欣赏我爸我妈那样的爱情。”(H-028)一方面,在家庭沟通方式良好,家庭关系质量高的环境中成长起来的人,倾向于追求与自己家庭相似的关系。但是和谐的爱情可遇不可求,这就可能造成个体一直寻找、不断更换恋爱对象的情况,恋爱关系相对不稳定。
“我觉得我的家庭是我最强大的支持系统,有我爸我妈在我什么都不怕,无论我遇到什么事,他们都支持我,我只要回到他们身边我就是开心幸福的。所以面对这份不成功的恋爱,我依然能保持良好的心态,也相信未来我会遇到合适的人。往事随风,我是个很潇洒的人。”(H-031)另一方面,有着良好家庭环境的人,会有较高的归属感和安全感。这就可能使得他们对恋爱亲密关系的需求降低,对失去伴侣也比较容易看开,这样一来在恋爱关系出现问题时选择分手的可能性就会提高,努力去尝试改善恋爱关系的可能性会降低。
3.2家庭沟通方式通过塑造个人性格及行为的方式影响恋爱沟通方式的选择,进而影响恋爱关系
“请问你是否是单亲家庭呢?”“是”(W-002)、“恋爱关系的话就是,不是很稳定吧,没什么安全感,对未来的期望也不是很高,就是走一步看一步。”(W-033)根据既往研究,单亲家庭的孩子容易出现敏感、多疑等心理,面对恋爱缺乏安全感,不相信对方,不相信爱情。为了获得安全感需要无时无刻关注恋人的行为,可能造成过于纠缠的情况,使对方难以应付最终导致关系破裂。
“我爸我妈都是很乐观开放的人,而且他们俩说话属于爱夸奖对方的,对我也是赏识教育。”(H-030)“我也是属于那种,怎么说呢,就是我内心很骄傲,不太容易低头,但我觉得我都低头了你还不好好地,那我也不能继续惯着你了。”(H-023)赏识的家庭沟通方式会带给孩子高自尊,同时也带来不服输的性格。将不服输的性格带入恋爱关系中就可能导致一些矛盾僵化,采取冷战的应对策略,矛盾长期得不到解决。
3.3家庭沟通方式对恋爱关系的影响是可察觉的
“那你如何看待你的家庭沟通方式对你恋爱关系的影响呢?”“我觉得影响是很大的,真的。”(T-033)、“我觉得家庭很重要的作用是世界观塑造,而恋爱中的世界观是非常重要的东西,影响恋爱质量”(T-034) 通过访谈可以发现,大学生对自己的家庭沟通方式都能有比较清晰的认识,也能对自己的家庭沟通方式作出理性的评价。同时,也能体会到家庭给自己的恋爱带来的影响,并对此有一定的反思和改进。即使一些人家庭经历比较坎坷,家庭沟通方式不尽理想,但仍能注意到家庭沟通方式对自己产生的影响,尽量调整个人行为,避免类似的失败在个人身上重演。
4 讨论及建议
4.1从家庭方面,父母应尽量选择良好的家庭沟通方式
父母应该努力掌握良好的家庭沟通方式,营造坦诚、尊重、关怀、温暖的家庭环境,给孩子足够的安全感,培养其积极独立的健康人格。学会关心和理解他人,学会处理和面对差异,才能拥有稳定和谐的恋爱关系。
4.2从学校方面,学校应注重正确恋爱观念的教育培养
大学生之间的恋爱关系通常发生在校园中,学校教育的重要作用不可忽视。学校可以通过开设恋爱心理学课程,组织成立恋爱成长小组,举办恋爱主题讲座等方式协助大学生树立正确的恋爱观念,掌握正确的恋爱技巧。
4.3从个人方面,自身应关注当下,反思个人恋爱经历
要获得稳定和谐的恋爱关系最重要的因素还是个人行为。不必一味地沉浸于过去的家庭经历,要关注自己的行为对此时此刻产生的影响。批判地继承个人家庭的沟通交往方式,借鉴家庭经验,做到扬长避短。让家庭经验为自己的恋爱关系提供有益指导。
参考文献:
[1]朱雅心.大学生家庭亲密度、适应性和恋爱信任度的关系研究[D].鲁东大学,2014.
[2]许燕.人格心理学[M]北京:北京师范大学出版社,2009.
[3]翟进,.个案社会工作[M].北京:社会科学文献出版社,2011.
[4]罗平云,彭桂芳.试探大学生恋爱模式与家庭教养方式的关系[J].太原师范大学学报(社会科学版),2012,(01).
研究性学习方向范文4
覆盖面;交流与合作;
评价标准
〔中图分类号〕 G633.8
〔文献标识码〕 C
〔文章编号〕 1004―0463(2008)
09(A)―0038―01
一、中学化学研究性学习的现状
1. 学生参与研究性学习的主动性不够强。研究性学习强调学生的主体作用,同时也重视教师的指导作用。但是,在它的实际实施过程中,却由于研究性学习的评价是按照定性评价与定量评价相结合、以定性评价为主的方法进行的,所以,大多数同学和部分教师都认为研究性学习不像会考那样有明确的分数指标,便对研究性学习敷衍了事,企图蒙混过关,从而导致广大学生对研究性学习缺乏相应的主动性。
从教师指导的角度来看,尽管研究性学习在大多数学校已经展开,但却很少有学校能建立相对完善的工作制度。对于教师参与研究性学习的指导工作怎样进行评价和计算工作量,也没有依据,以致大多数教师对于指导研究性学习没有足够的热情。这从另一个方面也影响了学生参与研究性学习的主动性。
2. 研究性学习的覆盖面不够大。就目前的情况来看,大多数学校开展的研究性学习还只是少数“精英”学生参与,多数学生并没有参与到其中。造成这种现象的原因主要是大多数教师和学生将研究性学习简单地与各类竞赛等同起来,将获得竞赛名次作为开展研究性学习的目标,这与《全日制普通高级中学课程计划》的培养目标是不一致的。
3. 研究性学习过程中的交流与合作不够多。在实际工作中,研究性学习的实施往往成为项目负责人的单打独斗,项目组的其他成员很少得到锻炼与提高,特别是那些性格内向、学业成绩较差、自信心不足的学生,他们对课题研究大多兴趣不浓,参与不够。如果教师不能有针对性地对这部分学生做好协调、指导、鼓励等工作,他们往往会“游离”于课题研究之外,成为整个课题研究的配角或旁观者。
4. 研究性学习的评价标准不够完善。受传统观念的影响,在研究性学习的实际实施过程中,我们往往会过分重视它的成果,而忽视了对学生参与研究性学习活动的态度、在活动中所获得的体验、学习和研究方法及技能的掌握情况、学生创新精神和实践能力的发展情况等方面的评价。这种评价模式往往不能形成激励广大学生积极
进取、勇于创新的氛围。
二、改进中学化学研究性学习的主要措施
1. 通过教师的全程介入,充分调动学生参与研究性学习的主动性。强调学生学习的自主性和探索性,并不
是要教师撒手不管,相反的,它对教师的指导提出了更高的要求。教师的指导应该贯穿于学生研究性学习的整个过程,及时发现并指导他们怎样解决在研究性学习中遇到的困难。教师不仅要指导学生确立切合实际的研究课题,还要指导学生如何有效地搜集相关信息、分类处理信息、提炼观点。只有这样,学生才能通过研究性学习活动获得亲身体验,逐步形成善于质疑、乐于探究、勤于动手、努力求知的积极态度,充分调动他们积极参与研究性学习的主动性。
2. 因材施教,扩大研究性学习的覆盖面。既然学生的知识基础不同,学习能力有差异,兴趣爱好各异,对社会的观察角度不同,他们提出的研究性课题的方向、水平就一定会有所不同。因此,我们教师一定要满腔热诚地帮助所有学生分析、选题,促使他们在研究其所热心的问题过程中增强自信、挖掘潜能、提高学习能力,使每一位学生都能参与到研究性学习中来,感受到研究性学习对他们综合素质提高的重要作用。
研究性学习方向范文5
[关键词] 胃癌;外周血;癌细胞;药物敏感实验;LFAM化疗方案
[中图分类号]R735 [文献标识码]A[文章编号]1673-7210(2007)05(c)-027-03
恶性肿瘤具有异质性[1],患同种类型肿瘤的不同患者,甚至同一患者不同的疾病阶段,化疗效果都差异很大,故个体化化疗在肿瘤治疗领域已达成共识。MTT法体外药敏检测一直以来被临床广泛用于体外抗癌药的筛选[2,3]以及部分肿瘤的药敏检测。尽管MTT法有简便、快速、准确、重复性好并可同时进行多种药物检测的优点[4,5],但目前仍多停留在单药敏感性测定上[6~8],尚未见有用于标准的联合化疗方案敏感性测定的报道,而联合化疗在恶性肿瘤的综合治疗中占有相当重要的地位。此外,由于相当一部分患者治疗时无法获取肿瘤组织,寻找其他能够代替肿瘤细胞进行化疗药敏试验的试验材料同样是肿瘤研究工作者面临的重要课题,有文献报道用外周血淋巴细胞对化疗药物的敏感性来判断肿瘤组织对化疗药物的敏感程度是可行的[9],基于上述理由,本研究首次尝试将胃癌患者新鲜肿瘤组织与外周血采用MTT法对LFAM联合化疗方案体外药物敏感性加以测定,旨在通过比较并分析二者相关性,为那些失去手术机会或病灶很小不能取材的胃癌患者探求一条指导临床解决个体化药物治疗的新途径。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1标本肿瘤细胞和淋巴细胞来自我院外科手术切除的胃癌患者肿瘤组织标本(经病理证实)和外周血。
1.1.2 药品 实验所用药品均为临床常用化疗药物:5-氟尿嘧啶、吡喃阿霉素、丝裂霉素、亚叶酸钙,均为国产药品。将药物用生理盐水配制成母液,再用培养液配制成工作液,-20°C保存备用。
1.1.3 试剂四甲基偶氮唑盐(MTT, Sigma产品)用生理盐水溶解,配制成5 mg/ml的工作液,-20°C保存;完全培养液RPM1 640(Gibco产品),内含10%灭活小牛血清、青霉素100 U/ml和链霉素100 μg/ml;淋巴细胞分离液、二甲基亚砜(DMSO)分析纯均为北京化工厂生产。
1.2 方法
1.2.1 细胞分离和培养用淋巴细胞分离液从新鲜的外周血中分离淋巴细胞(2 000 r/min×20 min);采用机械法从新鲜胃癌组织标本中获得癌细胞单细胞悬液,经锥虫蓝染色计数活细胞。用完全培养液调整细胞浓度为5×105/ml,分别接种细胞于96孔板,每孔加入细胞悬液80 μl。
1.2.2 加药接种细胞后分别加抗癌药,药物浓度根据临床化疗药物成人静脉用量,按Limberg公式计算,除阿霉素用5%葡萄糖配置外,其余各药均用生理盐水配置,每种药物加入5 μl,共计20 μl药液,使终体积为100 μl;每板LFAM方案按CF5-FuTHPMMC,其中CF与5-Fu相差2 h,其余同时给药。另设空白对照组(加细胞及20 μl PBS液)及调零组(只加培养液100 μl),每组4个复孔。加药后将96孔板放置于CO2孵箱,37°C培养。
1.2.3 MTT检测加药培养72 h后,每孔加入5 mg/ml MTT试剂10 μl,继续培养4 h,再加入DMSO 100 μl,放震荡器震荡15 min使沉淀充分溶解,用酶标仪(λ=570 nm)测每孔的OD值,根据相对抑制率判断药物敏感性,相对抑制率=(对照孔平均OD值-加药孔平均OD值)÷对照孔平均OD值×100%。淋巴细胞的相对抑制率大于20%,癌细胞的相对抑制率大于30%判断为药敏阳性[10]。
1.3统计分析
采用计算双变量直线相关系数方法分析其相关性。
2结果
2.1 选择传统经典的胃癌化疗方案[9]LFAM(四氢叶酸钙,5-氟尿嘧啶,吡喃阿霉素,丝裂霉素),淋巴细胞和胃癌细胞阳性药敏抑制率有差异,其中19个病人淋巴细胞药敏阳性率相对抑制率大于胃癌细胞,但是都无显著性差异,两种细胞相关性好(表1)。
2.2 选择目前临床上常用的晚期胃癌化疗方案LFAM方案的用药(四氢叶酸钙,5-氟尿嘧啶,阿霉素,丝裂霉素),淋巴细胞和胃癌细胞阳性药敏抑制率有差异,其中19个病人的淋巴细胞药敏阳性率相对抑制率大于胃癌细胞(表2),但是没有显著性差异(相关系数r=0.942,P
表2LFAM方案肿瘤细胞和淋巴细胞抑制率的比较
2.3 分别将淋巴细胞、癌细胞在胃癌常用的两种化疗方案之间比较,淋巴细胞阳性药敏抑制率无显著性差异,癌细胞阳性药敏抑制率亦无显著性差异。两种化疗方案的组内和组间比较是一致的。
3 讨论
化学治疗在胃癌综合治疗中占有重要的地位,然而无论何种化疗药物治疗,总有部分患者无效,原因之一即与盲目用药有关,故近年来应用肿瘤细胞对化疗药物敏感试验指导个体化用药的研究越来越受到广泛的重视,根据体外化疗药敏试验结果指导个体化化疗具有较好的前景[12~14,16]。有研究表明,机体对药物的敏感性与遗传有关(如先天耐药和MDR现象),外周血淋巴细胞与肿瘤细胞一样具有耐药基因的表达, 本研究提示外周血淋巴细胞药敏抑制率的高低可以推测胃癌细胞药物敏感性,因而以外周血淋巴细胞药敏抑制率作为胃癌患者临床选择药物、药量的参考不失为一种可行的手段。基于临床上多采用全身联合化疗作为晚期胃癌的治疗手段,故本研究首次利用MTT法进行多药联合化疗的药敏测定,目的进一步提高临床药物配伍的准确性和有效性。
本研究对36例胃癌患者胃癌细胞药敏和外周血淋巴细胞分别选择LFAM方案进行药敏比较,得出两种细胞药物敏感性相关性好的结论。但因而得出以外周血淋巴细胞药敏可替代癌细胞药敏的结论为时尚早。文献报道在淋巴细胞与癌细胞药敏关系中有三种情况是值得注意的[17],第一种情况是:淋巴细胞和癌细胞对某种药物的敏感性大致一样,即一种淋巴细胞高、另一种癌细胞也高,一种白细胞低、另一种癌细胞也低,两种细胞是相同性质的相关,正如本研究中的胃癌情况,有文献报道在妇瘤及肺癌中药敏也有如上很好的相关[15];这时如果病人无法取到肿瘤标本做癌细胞药敏测定,就可以做外周血淋巴细胞药敏测定,以淋巴细胞药敏抑制率高低推测癌细胞药敏性,做淋巴细胞药敏以作为选择药物、药量的参考。第二种情况是:淋巴细胞药敏抑制性比癌细胞的显著偏低,这种药物应是最理想的首选药――因为它比较强的抑制了癌细胞,又因为淋巴细胞耐药、抗药,而受损伤较小。第三种情况是:抗癌药对癌细胞抑制率低、不敏感,而对淋巴细胞抑制率、药物敏感性高。这种药物在临床用药中是最应该避免的。吕青等[10]报道的30例乳腺癌肿瘤细胞及外周血淋巴细胞对15种常用化疗药物MTT检测结果的相关性分析其中只有VCR(长春新碱)对肿瘤细胞与外周血淋巴细胞的相对抑制率间有中等程度的相关。
综上所述,以外周血淋巴细胞药敏替代癌细胞药敏的研究应依据原发病、各种化疗药物、联合化疗方案的不同而酌情掌握,不能以偏概全,将其用于指导临床准确选择用药还有待进一步深入研究。
[参考文献]
[1]吕青,袁淑兰,陈国经,等.乳腺癌患者外周血淋巴细胞与肿瘤细胞体外化疗药敏相关性研究[J].同济医科大学学报,2001,30(4):358-359.
[2]Campling BG,Pym J,Baker HM,et al.Chemosensitivity test of small cell lung cancer using the MTT assay[J].Br J Cancer,1991,63(1):75.
[3]Hongo T,Fujii Y,Lgarashi Y,et al.An in vitro chemosensitivity test for the screening of anti-cancer drugs in childhood leukemia[J].Cancer,1990,65:1263.
[4]石强,赵文华,安秀梅,等.MTT吸收光度法测定化疗药物敏感性试验方法研究[J].中国肿瘤临床,1990,17(5):307-309.
[5]Ryungsa K,Manabu E,Kazuaki T,et al.Chemosensitivity testing for gastrointestinal cancer:survival benefit potential and limitations[J].Anti-cancer Drugs,2003,14:715-723.
[6]韩晓风,王燕婷,欧阳任荣.MTT法体外药敏试验研究进展[J]. 肿瘤,1999,19(1):55-57.
[7]辛华雯,王润帮,杜光祖.MTT法在恶性肿瘤体外药敏试验中的临床应用[J].实用癌症杂志,1994,9(2):73-75.
[8]孙燕.内科肿瘤学[M].北京:人民卫生出版社,2001.550-552.
[9]吕雅蕾,刘巍,艾军.氟尿嘧啶脂质体注射液与氟尿嘧啶水溶液的体外抗癌作用比较[J].河北医科大学学报,2003,24(5):267-269.
[10]马金霞,潘世扬,张卫,等.MTT比色法用于肿瘤细胞体外药物敏感性试验的检测[J].临床检验杂志,2002,20(2):104.
[11]高隆,霍润辉.肺癌体外药敏试验与临床疗效的相关性[J].第四军医大学学报,2003,24(23):2203-2205.
[12]杨琨,傅庆国,张松鹤.利用肿瘤患者外周血淋巴细胞检测抗癌药敏的试验研究[J].中国医科大学学报,2002,31(增刊):68.
[13]王本忠,朱新生.改良MTT法检测胃癌乳腺癌体外药物敏感性[J].临床外科杂志,1998,6(5):258-259.
[14]汤为学,骆云鹏,王瑞雪.癌性胸腹水抗癌药敏试验的研究[J].中国肿瘤临床,1995,22(7):491-494.
[15]王威廉,唐东平,王冰,等.肿瘤病人白细胞、癌细胞MTT法体外抗癌药敏测定相关性探讨[J].肿瘤防治研究,1997,24(6):334-336.
研究性学习方向范文6
摘 要:目的:研究活血行气方健脾理气方对人胃癌SGC-7901细胞株p53 和Bcl-2 基因表达的影响。方法:利用血清药理学方法制备药物血清,应用Western-blot分析方法观察活血行气方对人胃癌SGC-7901细胞株p53 、Bcl-2基因表达的影响。结果:药物血清作用后,p53 表达明显增强; Bcl-2表达明显降低。结论:活血行气方药物血清上调p53 、下调Bcl-2,达到抑制人胃癌SGC-7901细胞株的作用。
关键词:活血行气方;人胃癌SGC-7901细胞;基因
中图分类号:R285.5文献标识码:A文章编号:1673-7717(2011)03-0629-02
Effect of Huoxuexingqi Formula on expression of p53 and
Bcl-2 in the Human Stomach Cell Line SGC-7901
QU Ting-ting,CAI Yu-wen
(Liaoning University of TCM,Shenyang 110847,Liaoning,China)
Abstract:Objective:To research the expression of p53, Bcl-2 gene by Huoxuexingqi formula on Human Stomach Cell Line SGC-7901.Method:To prepare serum by serum pharmacological methods. The protein expression of p53, Bcl-2 were detected by Western blot analysis.Result:After the effect of drug serum,p53 expression increased obviously and Bcl-2 expression was significantly lower .Conclusion:Drug serum of Huoxuexingqi formula can up-regulate p53 ,down-regulate Bcl-2 and achieve the suppression of Human Stomach Cell Line SGC-7901.
Key words:Huoxuexingqi;Human Stomach Cell Line SGC-7901;gene
收稿日期:2010-10-14
作者简介:曲婷婷(1979-),女,山东牟平人,博士研究生,研究方向:中药抗肿瘤机理。
通讯作者:蔡玉文(1944-),男,辽宁沈阳人,教授,博士研究生导师,研究方向:中医药抗肿瘤机理研究。
近年来中医药治疗肿瘤受到越来越多的关注,活血化瘀行气是中医治疗肿瘤的一个重要原则。胃癌是人类最常见的恶性肿瘤之一,全世界范围内仅次于肺癌位居各种恶性肿瘤死因的第二位。本方主要由三棱、莪术、桃仁、红花等活血化瘀药配以赤芍、甘草行气缓急,对于改善胃癌中晚期肿胀、腹满、疼痛等症状有一定的作用。本实验通过活血行气方影响人胃癌SGC-7901细胞株基因表达来研究活血行气方抗肿瘤作用的机制。
1 实验材料
1.1 细胞株
人胃癌SGC-7901细胞株,由中国医科大学细胞培养室提供。
1.2 动物及试剂
SD大鼠30只,雌雄各半,体重180~220g,由辽宁中医药大学动物室提供。活血行气方(三棱、莪术、桃仁、红花等)、化疗药物顺铂(DDP)均辽宁中医药大学药局提供。鼠抗人p53与Bcl-2(北京中山生物技术有限公司)。
1.3 药物血清制备及实验分组
传统方法煎制,按成人1天用量定容为65mL折算,按成人65kg体重剂量的10倍量灌胃,即中药1mL/100g大鼠;对照组给予相同剂量生理盐水。给药3天,末次给药后1~2h无菌条件下自下腔静脉采血,离心分离血清,56℃,30min灭活,-20℃保存备用。随机分为正常血清对照组(对照组) ,西药组,中药组,中西医结合组。
2 实验方法
2.1 细胞培养与药物处理
人胃癌SGC7901细胞株经过常规复苏、传代培养之后,将细胞株接种于培养皿置于37℃,5%,CO2培养箱中培养,倒置显微镜下动态观察细胞形态, 24h后见细胞贴壁生长状态良好,弃培养液,分别加入各组血清,继续培养。
2.2 p53 和Bcl-2 检测及结果评定
分别取未加药、加药细胞培养48h,终止培养,弃培养液,胰蛋白酶消化,收集细胞,0.01M PBS洗两遍。吸去PBS,加入细胞裂解缓冲液200μL吹打均匀。冰浴30min,每5min旋涡震荡1次。4℃离心,14000r/min,10min,收集上清液。取少量上清液测定蛋白浓度,其余置于-70℃贮存。按照分子生物学实验指导,配制10%浓度的SDS聚丙烯酞胺凝胶,制作凝胶板并将其固定在电泳装置上,加入电泳缓冲液。每组分别取40μg蛋白样品于等体积加样缓冲液混合,煮沸加热变形5min后,顺序加入加样孔中,先以90V的电压进行电泳直至染料前沿进入分离胶,提高电压至120V,继续电泳直至澳酚蓝到达分离胶底部。取出凝胶,剪裁大小与凝胶相吻合的6张滤纸和1张硝酸纤维素滤膜。将硝酸纤维素和滤纸浸泡于转移缓冲液。把凝胶于滤膜想接触,夹于6张滤纸之间,整齐叠放于电转移装置中,并使硝酸纤维素滤膜靠近阳极一侧。45V,4℃转膜过夜。硝酸纤维素滤膜在5%脱脂奶粉中封闭过夜。弃封闭液,用TTBS振荡洗膜5min,一抗、二抗孵育。ECL试剂盒按规定方法进行显影曝光。用Quantity One软件对图像进行分析。
3 结 果
实验结果显示,对照组中P53、Bcl-2蛋白为中等表达,与对照组相比,中药组及中西医结合组中P53蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达减弱(P
4 讨 论
胃癌属中医“反胃”、“噎膈”、“胃脘痛”、“痞满”、“呃逆”、“积聚”等病证范畴。中医认为,本病由长期饮食不节、情志不遂、劳倦内伤或感受外邪,致肝失疏泄,胃失和降,或久病脾胃受损,痰湿内生,气滞血瘀,凝结于胃而成。活血化瘀是中医治疗肿瘤的一个重要原则。中药药理研究证明,活血化瘀方药可以改善肿瘤患者血液高黏状态,防止肿瘤栓子的形成,对脱离原位癌并移行进入血液循环的瘤细胞有直接或间接的抑杀,能够防治恶性肿瘤的血行转移。本方主要由三棱、莪术、桃仁、红花等活血化瘀药配以赤芍、甘草行气缓急,对于改善胃癌中晚期肿胀、腹满、疼痛等症状有一定的作用。
肿瘤的发生、发展本质上是遗传物质在染色体上基因的改变,而肿瘤抑制基因的缺失与癌基因的扩增正是其失活与激活的主要方式之一。p53基因的缺失或失活与50%人类肿瘤的发生发展相关[1] 。人类p53基因定位于染色体17号染色体短臂(17q13.1) ,约20Kb长,由11个外显子和10个内含子组成,其中第1个外显子不编码,其上游400bp处有启动子p1,下游1kb处有启动子p2,二者为转录起始点。正常的p53基因又称野生型p53基因(wt-p53) ,其功能的改变或缺失与大量不同种类的人类肿瘤细胞有密切关系,同时还被认为是细胞应激的关键性调控分子之一,能整合各种不同的细胞危急事件的信号,通过转录或非转录途径对这些信号做出包括细胞生长抑制或凋亡在内的不同反应,监视细胞基因组的完整性。
Bcl-2基因编码一个25-26KD的蛋白,其C端的21个疏水氨基酸组成一个延伸的链状结构。这个链可以插到细胞的膜结构中,这一结构特点与Bcl-2调节细胞凋亡的方式和能力非常有关。已经证实Bcl-2存在于线粒体外膜、核膜和内质网膜上。Bcl-2基因属于一类新的癌基因家族成员,通过有效抑制许多不同类型细胞中许多不同类型的凋亡刺激诱导的细胞凋亡,延长细胞活力而发挥其生物学作用,对细胞周期的进程不发生影响。这说明它在细胞凋亡调控机制中起着十分重要的作用,可能是许多因子作用的共同分子基础。已经研究证实,p53、Bcl-2基因的异常表达与胃癌的发生发展密切相关[2-4]。
本实验研究,利用血清药理学的方法,提取含药血清进行体外实验,研究结果显示,人胃癌SGC-7901细胞株p53和Bcl-2均有不同程度的表达,活血行气方药物血清处理后,p53表达明显增强,而Bcl-2表达明显减弱,并且随着作用时间的延长,两者表达变化均更明显。说明活血行气方药物血清诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的机制可能是通过影响抑癌基因p53和癌基因Bcl-2的表达而实现的。该研究为中药复方参与胃癌治疗提供可靠的实验依据。
参考文献
[1] 高丰,张学,宋今丹.p53家族新成员研究进展[J]. 国外医学・遗传学分册, 2000, 23(2):66-71.
[2] Lauwers GY,Scott GV,Hendricks J,et al.Immunohistoche2mical evidence of aderrant bcl22 protein expression in gastric epithelial dysplasia[J].Cancer,1994,73:2900-2904.