免疫学分析方法范文1
关键词:游离前列腺特异抗原,磁微粒化学发光酶免疫分析法,肿瘤标志物
Key words: prostate specific antigen,microbeads-based chemiluminescence immunoassay. Tumor marker
Gao wei
Kaifeng City Maternity Hospital
[Abstract]A sensitive chemiluminescence enzyme immunoassay based on magnetic micro-beads was established to detect the free prostate specific antigen (f-PSA) in human serum. One antigen was coated on the magnetic micro-beads and the other was labled with horseradish peroxidase(HRP), with the highly sensitive Luminol chemiluminescence reaction as the detection system. The linear range of this method for PSA was 0.02~50ng/ml with the limit detection of 0.02 ng. The intra-assay coefficients of variation is lower than 4.7% and the percent recovery was in the range of 90%~110%. F-PSA in 510 clinical samples were detected with this method. Compared with Roche chemiluminescence immunoassays, the correlation coefficient of 0.995 was obtained. The results demonstrated that this method is reliable and shows proposed potential application in the clinical analysis of f-PSA for prostate cancer diagnosis.
前列腺特异性抗原(Prostate Specific Antigen, PSA)是人体前列腺上皮组织细胞分泌的一种分子量为30～33 kDa的单链糖蛋白分子[1～3]。前列腺癌(Prostate Cancer, PCa)病人血清中PSA浓度升高;良性前列腺增生(Benign Prostate Hyperplasia, BPH)病人血清中,PSA浓度也会升高;随着年龄的增加,血清中PSA浓度也有不同程度的升高,在4～10 ng/ml的浓度范围就形成了诊断灰区[4~6]。PCa病人血清中f-PSA浓度水平与BPH病人以及正常人相比,明显偏低,游离前列腺特异抗原百分率对PCa的特异性更高,可降低临床检验筛查的假阳性率。建立特异性强、检测灵敏度高的新型f-PSA检测试剂将会对前列腺相关疾病的检测具有较高的临床应用价值。
1.材料及方法
1.1试剂: PSA、fPSA单克隆抗体购自美国Seradyn公司;辣根过氧化物酶、鲁米诺购自sigma公司;f-PSA化学发光免疫分析(CLIA)试剂盒购自Roche公司。
1.2仪器:LUMO微孔板化学发光检测仪、IWO型洗板机(郑州安图生物工程有限公司);罗氏ELESYS2010电化学发光仪。
1.3临床样本:临床样本由肿瘤医院提供。
2.实验方法
2.1 方法学原理:选用一步反应双抗体夹心法检测f-PSA抗原。磁微粒表面结合PSA单克隆抗体;加入待检测校准品、临床血清和酶标记抗体;温浴反应后形成固相抗体-抗原-酶结合抗体的复合物,通过洗涤分离游离的抗原和酶标记抗体,加入发光底物,使用化学发光检测仪检测信号强度,结合标准曲线来实现对待测样品的定量分析。
2.2 抗体包被磁微粒:将300mg磁微粒分散于2ml包被液(0.05Mol/L pH 9.5碳酸盐缓冲液)中,室温下振荡4h,用20ml封闭液(0.5%BSA,pH 7.5磷酸盐缓冲液)封闭4h,最终使用封闭保存液调整磁微粒浓度30mg/ml,密封置于冰箱2～8℃保存备用。
2.2HRP抗体酶结合物的制备:采用改良过碘酸钠法完成HRP对f-PSA单克隆抗体的标记,酶结合物保持单克隆抗体的免疫反应活性和酶的催化活性。
2.3f-PSA校准品的配制:校准品经由国家标准标定,分装,冷冻保存。
2.4血清f-PSA的化学发光酶免疫分析方法:向微孔板中每孔加入校准品或样品50μL,磁微粒50μL,酶结合物溶液100μL,37℃温育30min,使用磁分离洗涤设备洗涤4次,加入发光底物100μL,室温避光反应5 min,测量相对发光强度单位(RLU),通过标准曲线对血清中f-PSA实现定量分析。
3.结果分析
3.1 包被浓度的影响:比较不同的包被浓度(1.0、2.0、3.0和5.0 ug/ml)对体系的影响。随着包被浓度的提高,校准品信号值升高,浓度达到3ug/ml后,校准品对应发光值开始下降,认为3ug/ml的包被浓度已经达到饱和。
3.2酶结合物浓溶优选:将酶结合物分别以1∶1000、1∶2000、1∶3000进行稀释,比较不同分析结果的影响。结果表明,在1∶2000稀释比条件下,校准品信号值、灵敏度、线性、HOOK值检出均达到最佳。
3.3温育时间:考察了不同温育时间对反应体系的影响,温育时间超过30min后,校准品信号值不再升高,表明免疫反应达到饱和,最终确定温浴时间为30min。
3.4温浴条件:考察了三种不同的温育方式,即4度、室温和37℃对反应体系的影响。37度时RLU较室温反应提高57%,同时考虑37℃恒温温育的条件更容易控制,选择37℃恒温温育作为温育条件。
3.5 性能评价
根据国家相关化学发光检测试剂质量标准,对建立的磁微粒化学发光f-PSA进行评价,结果如下:
临床考核研究选用本院电化学发光检测试剂为对照组。自2009年7月以来,收集经病理中心确诊前列腺患者血清样本43份、前列腺炎患者血清样本142份,随机收集正常男性血清样本325份。血清按照检测试剂盒要求采集的非抗凝血清,样本需清亮不混浊、样本量不少于300μl。采集后2~8 ºC冷藏,如1天内不检测,则应冷冻(-20ºC)保存,不得反复冻融。其测定值相关性及相关系数分别为:Y(磁发光) = 1.0075x (Roche)+ 0.0386R= 0.9953
4 讨论
本方法为化学发光酶联免疫系统与磁性微粒分离技术相结合的一种测定方法,它使双抗体夹心酶联免疫技术在游离标记抗体和抗原复合物中具有分离完全和快速的优点。建立的f-PSA检测方法重复性良好,线性范围宽,具有较高的精密性和准确度,特异性强。经过对510份临床血清研究表明与电化学发光检测结果符合程度达到0.99以上。
此方法操作简便、快捷,全部测定时间仅需40分钟,显著提高工作效率,满足医生及病人即刻出结果的要求。
参考文献:
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3.张灵, 计国义, 李晓萌等. fPSA/ tPSA比值优化前列腺癌早期诊断作用的研究[J],中华男科学杂志,2004,8(10):582-585
免疫学分析方法范文2
【关键词】学发光免疫分析技术；基本原理；分类；应用
文章编号：1004-7484（2013）-01-0463-01
化学发光免疫分析技术（chemiluminescence immuno-assay，CLIA），是在二十世纪八十年展起来的，它是比荧光免疫测定、酶免疫、发射免疫更先进的一种最新的免疫测定技术。这种技术主要用于对各种抗体、抗原、半抗原、脂肪酸、激素和药物的检测分析，下面就介绍一下这种技术的基本原理和分类。
1化学发光免疫分析技术的基本原理
化学发光免疫分析技术是由免疫分析和化学发光分析两个系统构成的。其中免疫分析是用标记物直接标记在抗原或抗体之上的，然后再经过抗原与抗体反应生成抗体免疫复合物，其中标记物可以是化学发光物质，也可以是某种酶。化学发光免疫分析系统是在免疫反应结束后，加入氧化剂或酶的发光底物，待发光物质氧化后就会形成一个处于激发态的中间体，会发射光子释放能量以回到稳定的基态，发光强度可以利用发光信号测量仪器进行检测，其中被测物的含量就是根据化学发光标记物与发光强度的关系利用标准曲线计算出来的。
化学发光的原理是指分子或原子中的电子吸收能量后，发生能级跃迁而释放光子的过程，能级跃迁过程是电子从基态到激发态的过程，实现了从较低能级向较高能级的跃迁。其中可以根据形成激发态分子的能量来源不同将发光过程分为化学发光（chemiluminescence）、光照发光（photoluminescence）和生物发光（bioluminescence）。
化学发光又可分为直接化学发光和间接化学发光，若参加反应的物质是一个反应产物分子，且被激发到能发射光的电子激发态，那么这就是直接化学发光过程。若参加反应的物质激发能传递到另一个未参加化学反应的分子D上，使D分子激发到电子激发态，D分子从激发态回到基态时发光，这种过程叫间接化学发光。
2化学发光免疫分析的分类
化学发光免疫分析根据应用于免疫分析体系中的方式不同，可以分为以下三类：
2.1直接标记发光物质的免疫分析这种分析方式是用吖啶酯直接标记抗体，作为抗原，然后与待测标本中相应抗体发生免疫反应，就会形成固相包被抗体一待测抗原一吖啶酯标记抗体复合物，到这一步后再加入双氧水氧化剂和氢氧化钠，这样环境就会呈碱性，吖啶酯就会在不需要催化剂的情况下分解、发光。
2.2酶催化化学发光免疫分析标本中的抗原（抗体）在发生免疫反应时所用的标记物为发光的酶，这种化学发光免疫分析方法是酶催化化学发光免疫分析。
2.3电化学发光免疫分析（ECUA）这种分析过程包括电化学和化学发光两个过程，具体是以三丙胺（TPA）为电子供体，用电化学发光剂三联吡啶钌标记抗体（抗原），在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反应。
3化学发光免疫分析在临床检验中的应用
就目前而言，化学发光免疫分析技术已经成为替代RIA的首选技术，且已经被广泛地应用于基础和临床医学的各个领域。下面就简要地谈谈化学发光免疫分析技术在临床检验中的几个应用。
3.1应用于传染性疾病的病原诊断作为评价和治疗机体免疫功能重要指标的重要血清学标志物乙型肝炎病毒表面抗原、抗体，以前诊断是否感染乙肝病毒用的是常规酶法，常规酶法的缺陷是可能使得部分低病毒含量携带者漏检。但是化学发光免疫分析具有高灵敏度和线性范围宽的特点，在传染性疾病的病原诊断方面其检测灵敏度比常规酶法高，Bowser等在测定感染人类免疫缺陷病毒的围产期儿童体内的单纯疱疹病毒、乙型肝炎病毒甲型肝炎病毒、及丙型肝炎病毒时给出了证明。
3.2应用于肿瘤标志物的分析肿瘤标志物包括蛋白质、酶、癌基因产物、激素等，它是由肿瘤细胞合成释放或机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。在患者的细胞中，血液中以及组织中都存在肿瘤标志物。化学发光免疫分析可以用于寻找新的肿瘤标志物，也可以进行体外早期辅助诊断和对术后的监测，对恶性肿瘤患者的具有重要意义。Mac等达到了对食管癌患者的诊断和病情监测，他们采用的方法就是检测血清中癌胚抗原的浓度、cyfra21-1的浓度、鳞状细胞癌抗原的浓度。Shabin和Raslan比较了AFP和人绒毛膜促线性激素这胎膜早破和健康孕妇阴道液中的两种标志物，发现AFP的敏感性和特异性最高。Sakaida等通过检测细胞色素C的含量得出C可能成为肝衰竭的新标志物。
3.3应用于心脏疾病的特征标记物测定临床上的心脏疾病常常采用同工酶定量测定，标记物为肌酸激酶和肌钙蛋白T＼肌红蛋白。Dutra等运用心肌肌钙蛋白cTnT受体分子制成了免疫传感器，可用于临床上早期检测心肌梗死。有文献报道同时检测了cTnT肌酸激酶同工酶CK-MB和肌红蛋白，相关系数分别为cTnT0.953-0.982；CK—MB0.835-0.999；肌红蛋白0.776-0.992，具有很好的相关性可用于检测临床标本。
4结束语
化学发光免疫分析技术具有高特异性和高灵敏度的特点，它将化学分析方法和免疫学分析方法的优点融合了起来，用这种方法分析简便、快速，且标记结合物稳定，没有污染，是非放射性免疫分析方法中最有前途的方法。现在在临床诊断和治疗疾病中应用的全自动化学发光免疫分析仪能够实现试剂稳定自动分析，且可以在短时间内得出精确的结果，可以说化学发光免疫分析检测技术的应用必将为未来迎来新的曙光。
参考文献
[1]魏光伟，余永鹏，魏文康，罗胜军，WEI Guang-wei.YU Yong-peng.WEI Wen-kang.LUO Sheng-jun 化学发光免疫分析技术及其应用研究进展[J].动物医学进展，2010，31（3）.
[2]郑开作.化学发光免疫分析技术测定血清TSH及临床评价.福建分析测试研究报告，2001，10（3）：1458-1461.
免疫学分析方法范文3
【关键字】放射免疫法、化学发光免疫法、血清AFP、效果分析
【中图分类号】R426 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2014）07-4045-02
临床检测血清AFP中，应该对患者采用有效生长激素检测方式，这样才可以提高检测的准确性，提升患者的身体健康质量，提高治病疗效【1】。以下针对我院从2013年1月到2013年12月期间采集的100例住院患者血清标本进行分析，探讨临床中，采取化学发光免疫法与放射免疫法检测血清AFP的效果。
1 资料与方法
1.1资料
对我院2013年1月到2013年12月的100例住院患者进行血清标本收集工作， 本次研究的血清标本采集中，均是由经验丰富的检验人员在2小时内，对清晨空腹患者抽取静脉血3 ml，并排除患者有先天性疾病、心肝重要器官疾病；试验仪器包括德国罗氏公司的检测试剂盒，以及电化学分析仪、放射免疫分析仪、深低温；将患者随机分配成对照组与试验组，且在每组中都具有50例患者的血清标本，患者在性别、身体状况以及年龄等资料方面，相互进行比较后，不存在差异，无统计学意义。
1.2 方法
对于对照组患者血清标本检测中，将会使用XAKP- 2000A/02 型 γ 计数仪【2】，并应用中国原子能科学研究所提供的AFP 试剂盒，对患者的待检测样本进行梯度稀释，使检测物浓度在12.5～8000umol/L范围间，进行放射免疫法检测；对试验组患儿50例血清标本检测中，将会使用KL1- e411 型全自动电化学发光仪进行检测【3】，并稀释其检测样本的梯度，可以保持检测物浓度为12.5～8000umol/L，进行电化学发光法测定。对两组检测方法比较中，分析比对其检测血清AFP水平差异，考察其之间的相关性；并对两组检测方法中的低值、中值、高值进行记录试验，且测定每日测定每份样本22次，连续测20天，并考察批内CV值。
1.3 统计处理
对本次两组研究结果，可以应用统计学软件SSPS 12.0【4】，针对最后两组的检测结果进行处理， 在数据处理之中，计量资料我们将会用t检验进行比较，技术资料用x2检验，设置统计学的水准是a=0.05。
2结果
两组检测结果，电化学发光法检测血清AFP线性范围更宽，电化学发光法检测血清AFP精密、灵敏度度更高，其两组检测结果之间差异非常显著（ P
3讨论
据悉，血清AFP是检测原发性肝细胞肝癌的标志物，是最灵敏性、特异性的肿瘤标志，在临床肿瘤诊断中发挥重要作用。针对血清AFP检测中，应该制定合理的检测方案，才可以取得准确的检测结果，提高肝癌患者的生活质量。因此在临床诊断检测血清AFP中化学发光免疫法，较常规放射免疫法检验有较好的效果，可以提高检测结果的准确性、灵敏性、高度特异性。
化学发光免疫法检测血清AFP，在临床中具有较好的效果，应用化学发光系统作为抗原抗体反应指示系统，定量检测抗原、抗体，并应用发光剂标记抗体，与其它检测方法相比，具有很高的稳定性，采用机器自动加样，具有准确性，化学发光免疫法检测的线性范围较放射免疫法检测更宽，更适宜于临床检测 血清AFP。在血清AFP测定中，应用电化学发光法进行检查，可以采用高度的特异性抗体【5】，有效起到清除样本干扰的作用，提高检测结果的灵敏度，减少误差，使用电化学发光法测定血清AFP，临床检验效果更稳定。
由上可知，在临床中对血清AFP检测中，应用放射免疫法与电化学发光法检测进行检验，电化学发光法检测较放射免疫法更具应用优势，具有更好重复性，精密度高，有很好的临床效果，值得在实际在推广应用。
参考文献
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免疫学分析方法范文4
【关键词】放射免疫法;电化学发光法;血清甲胎蛋白
【中图分类号】R213.7【文献标识码】A【文章编号】1004-5511（2012）06-0138-01
甲胎蛋白是肝癌初筛及诊断常用的辅助检测指标之一。临床检测一般多采用放射免疫法(RIA)，随着一些快速、精确以及安全无毒的新方法的出现，放射免疫法(RIA)的应用逐渐限制［1］。我们采用不同方法对我院100例血清标本AFP含量进行了检测，并对相关结果进行分析和比较，以期为临床检测血清AFP选择合适检测方法，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 一般资料:选择我院院2010年1月～2011年12月间门诊及住院患者100例，其中男55例，女45例，年龄43岁～74岁，平均(49.7±8.1)岁。所有患者随机分为2组，对照组采用放射免疫法检测，观察组采用化学发光免疫法检测。两组标本一般资料具有可比性。
1.2 使用仪器:对研究对象取血后分离血清，低温保存，分批检测。化学发光免疫法使用石家庄康普生科技有限公司生产的KPS-QQ80全自动化学发光仪和配套试剂盒。RIA法AFP宽范围放射免疫分析试剂盒由北京北方生物技术研究所提供，严格按照分析仪和试剂盒的质控说明书操作。
1.3具体方法 :对两者的线性关系、回收率、相关性、及灵敏度进行对比分析。线性实验将标准液分别按 12.50、 25.00、 50.00、 100.00、 200.00、 400.00和 800.00ug/L的浓度倍比稀释后分别用两种方法进行检测，并进行线性回归分析；回收实验取不同AFP浓度的混合血清(AFP 浓度为18. 6，26. 7， 35. 3 ng /ml)分别加入已知浓度的血清，分别用两种方法进行检测，计算回收率；用两种方法法同时对受检血清标本进行定量分析进行对比实验；对两种方法的低、 中、 高值质控品分别进行灵敏度试验， 并比较两种方法的批内及批间灵敏度。
1.4统计处理:所得数据均采用SPSS 13.00软件包进行统计处理，采用单因素方差分析及q检验、卡方检验及相关、回归分析，以P
2 结果
结果显示放射免疫法和化学发光免疫法分别在 5～400ng /ml 和2～940 ng /ml 范围内呈良好的线性关系。化学发光免疫法与放射免疫法的回收率分别为90.7%～106.1%，93.6%～106.7%，平均回收率分别为95.6%，98.2%，化学发光免疫法的回收率显着高于放射免疫法，两者相比差异有显着性(P0.05)，提示两法呈良好相关性（r =0. 995）。所有检测结果灵敏度 （CV）值均小于 6%，而化学发光免疫法检测的CV值均小于放射免疫法， 表明化学发光免疫法敏感性较放射免疫法高，见表1。
3 讨论
甲胎蛋白是哺乳动物胚胎期肝脏卵黄囊合成的一种糖蛋白，是肝癌细胞表达的高特异性蛋白质，很多肝癌病人（70-80%）在发病期间都有AFP基因高表达的特征，是诊断原发性肝癌的特异性肿瘤标志物，具有确立诊断、早期诊断、鉴别诊断的作用［2］ 。目前常用化学发光法、酶标法、酶标电泳法、放射免疫法检测。RIA具有较高的灵敏度和准确性，其临床应用价值已得到大家的认可。RIA法的优点是灵敏、特异、简便易行、用样量少等，常可测至皮摩尔。但是仍一下有缺点［3-4］。1.只能以免疫反应测得具有免疫活性的物质，对具有生物活性百失去免疫活性的物质是测不出的。因此RIA结果与生物测定结果可能不一致，有时会出现交叉反应、假阳性反应。2.由于使用了生物试剂，其稳定性受多种因素影响，如若组织样品处理不够迅速，不能灭活降解酶和盐及pH有时会影响结果，需要有一整套质量控制措施来确保结果的可靠性。3.灵敏度受方法本身工作原理的限制，对体内某些含量特别低的物质尚不能测定。4.由于放射免疫分析是竞争性的反应，被测物和标准物都不能全部参与反应，测得的值是相对量而非绝对量。5．存在放射线辐射和污染等问题。虽然RIA法是在测试样品时再加入标记的同位素示踪物，且示踪物的放射性强度极低，对实验者引起辐射损伤的可能性小，但是使用后的废物必须经过特殊的处理。而化学发光免疫法通过化学发光系统作为抗原抗体反应的指示系统来定量检测抗原或抗体，并以发光剂直接标记抗体，具有高度敏感性和高度特异性以及较高的稳定性，而检测过程中自动加样则减小了人为地误差［5］。本文实验表明，说明 CLIA与RIA相比灵敏度高、特异性强、试剂稳定和无毒、检测范围更广，检测时间更快等特点，在临床检测中值得推广应用。
参考文献
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［3］张红祥. 化学发光免疫法与放射免疫法检测血清 AFP 临床分析［J］.中国现代药物应用,2010,4(7)：41-42.
免疫学分析方法范文5
关键词：降钙素原；免疫比浊法；方法学评价；免疫荧光法
降钙素原（Procalcitonin PCT）在临床主要应用于感染性疾病的鉴别[1]，是诊断血行感染、菌血症、败血症的一个较好指标[2-3]。目前PCT的检测方法主要有放射免疫法、双抗体夹心法、胶体金法、免疫荧光法、免疫透射比浊法等。本研究选用国产免疫透射比浊法，具有快速、简便，且价格相对较低廉的特点。根据美国临床和实验室标准化协会9CLSI）和医学实验室认可标准（ISO15189）对实验室质量的要求[4]，实验室对检测系统（仪器、试剂、校准品等）必需进行性能验证[5]。因此，实验室需要对厂商声明的主要分析性能进行验证。本文对AU5800检测系统测定降钙素原（PCT）进行精密度、线性范围、参考区间等指标的方法学评价，再与酶免疫荧光法检测结果进行比对，观察结果相关性，以此来评价该检测方法在临床上的价值。
1 资料
1.1仪器 贝克曼AU5800全自动生化分析仪，梅里埃全自动荧光分析仪。
1.2试剂
1.2.1安徽大千生物工程有限公司生产的降钙素原测定试剂盒（免疫透射比浊法）（批号085813），标准品（批号084113）和质控品（批号084213）。
1.2.2梅里埃诊断产品（上海）有限公司进口的降钙素原测定试剂盒（酶免疫荧光法）（批号1002326640），校准品（批号1057790）和质控品（批号1057880）。
1.3 标本 患者标本为2013年10～11月实验室接收的67例临床送检标本。酶免疫荧光法随时检测送检标本，剩余血清-80℃保存用于免疫比浊法测试（一次性完成）。正常人群均为健康体检者，年龄16～77岁，选择血常规、CRP正常，即无急、慢性炎症的体检合格标本20例。
2 方法
2.1免疫透射比浊法 样品中的PCT与试剂中的PCT抗体发生抗原-抗体反应，形成复合物，从而引起透光度的减低，在一定范围内与样本中的PCT的量呈线性相关。
1.2酶免疫荧光法 结合一步免疫测定夹心法和最终荧光检测来进行测定。
2.3 精密度评价：按照CLSI EP15-A2，取2个浓度水平质控品，5d实验，每天做一批，每批每个水平3次重复测定，计算批内精密度和批间精密度的均值、标准差和变异系数。
2.4 线性评价
2.5参考区间评价
2.6相关性评价 通过67例不同病例分别用酶免疫荧光法和免疫透射比浊法测定，比较两者的相关性。
2.7统计学分析 实验数据采用SPSS 13.0软件和Microsoft Excel 2000软件进行统计分析。
3 实验结果
3.1 PCT精密度结果 精密度评价结果符合厂家声明的批内精密度CV≤8.0%、批间精密度CV≤15.0%。该检测系统的批内精密度和批间精密度均满足检测要求（见表1）。
3.2 线性结果
3.3参考区间的验证
3.4相关性实验
图2 免疫比浊法和免疫荧光法检测PCT结果比对
3 讨论
根据医学实验室认可标准（ISO15189）对实验室质量的要求，实验室对检测系统必需进行验证。对试剂验证包括：精密度、线性、准确度和参考范围等[6]。
精密度评价按照CLSI EP15-A2文件进行，实验数据显示在AU5800全自动生化分析仪上PCT测定的精密度达到了厂家的检测声明，批内和批间精密度分别小于8%和15%。线性评价即分析测量范围评价根据EP6-A文件，采用简便的平均斜率法。在AU5800全自动生化分析仪上PCT的浓度在0-58.8ng/mL范围内具有良好线性关系，由于PCT达到80ng/mL的血清标本难以获得，最高检测限58.8ng/mL偏低于厂家的最高测定值，有待于进一步验证。参考区间的验证参考NCCLSC28-A2文件，选择20份体检合格的健康人血清标本全部通过验证。与法国梅里埃诊断产品（上海）有限公司进口的降钙素原测定试剂盒（酶免疫荧光法）进行相关性实验，表明PCT免疫比浊法结果同样可靠（n=67，R2=0.9607）。
目前，检测PCT的方法很多[7]。传统的放射免疫法敏感性较高，但检测时间较长，且有放射性元素污染，使用受限；胶体金法为半定量法，不依赖仪器，操作简便快速，但敏感性低，只能作为临床筛查；免疫发光法[8]具有敏感度高、特异性强等特点，但是成本昂贵，不利于临床推广。免疫比浊法简便、快捷，适用于波长包括600nm的各种生化分析仪，可满足临床急诊及批量检测的需要；而且成本较低，可以大大减低患者的检测费用。
综上所述，免疫比浊法检测PCT的各项性能指标进行验证和评价，均能满足临床检测的要求，具有良好的发展前景。
参考文献：
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[6]杨有业，张秀明.临床检验方法学评价[M].北京：人民卫生出版社，2008.
免疫学分析方法范文6
依据课程标准：1、概述人体免疫系统在维持稳态中的作用（理解）2、关注艾滋病的流行和预防。（认同）和高考的具体要求，确定本节课的复习导引。
四个考点：1、免疫系统的组成2、体液免疫与细胞免疫比较3、记忆细胞与二次免疫4、免疫失调疾病及免疫学的应用
二、教学过程 （首先通过典型性例题切入，而后分层次进行探究。）
一）、免疫系统的组成
【问题探究】如图（图略）为某生物体中的一系列生化反应示意图，描述中不正确的是
A.场所1是人体的重要免疫器官 B.过程a是基因选择性表达的结果
C.过程b产生的物质X可以和Y特异性结合
D.细胞C和细胞E中核酸完全相同
对题目的分析、运用：
①请学生选择答案并讲明理由；②对题目的图形进行分析，利用突破点（物质x；场所1，场所2），强化审题的方法；③分析外源异物Y能否直接作用于细胞A细胞B，分析一般途径；④总结免疫系统组成的三个层次（可以利用‘免疫细胞的起源和分化’过程进行总结）。
【问题拓展】？免疫系统的组成
通过对图形进行分析，完成以下内容（图略）
①图形的进一步完善，淋巴因子的作用，免疫系统的构成
②补充溶菌酶的来源
③延伸：免疫的三道防线
【体验高考】：（2011・重庆卷，3）
某人因过量注射美容制剂而出现头昏、站立不稳等症状。经诊断后，医生为其注射了肉毒杆菌抗毒素进行治疗，目的是（ ）
A.中和体内的肉毒杆菌毒素
B.中和体内的肉毒杆菌凝集素
C.刺激机体产生特异性抗体发挥体液免疫作用
D.刺激机体释放出淋巴因子发挥细胞免疫作用
二）、特异性免疫的有关内容
问题导引：如图（图略）表示人体某种免疫过程，下列关于此图的叙述正确的是
A.图中细胞A是效应淋巴细胞
B.该过程是人体免疫的第三道防线
C.该过程属于特异性免疫
D.该防线能防御多种病原体
题目的运用：①吞噬细胞的分布特点，与T、B细胞分布的区别；②吞噬细胞的作用；③免疫调节的方式
【过渡】特异性免疫分为体液免疫和细胞免疫两种， 对这两类免疫中的有关问题咱们做一个简单的探究
1、体液免疫与细胞免疫的比较
【问题探究】
①完成表格的填写（表格略）
②对照表格和之前的内容，请同学们尝试写出体液免疫和细胞免疫的过程
2、体液免疫和细胞免疫的过程 【问题拓展、核心突破】
①以学生为主导，分别写出体液免疫和细胞免疫的过程； ②讨论、完善免疫过程，并延伸到二次免疫；
③进一步探讨考试中经常出现的问题
【过渡】在这部分内容中，抗原与免疫活性物质也是高考常考的考点。
3、抗原和抗体比较 【核心突破】
①由抗原的异物性，探讨免疫的功能（防卫、监控、清除）；②抗原大多为蛋白质，可以与基因工程联系；③由抗毒素和凝集素分析抗体的具体作用；④利用下面的高考题分析做题的方法技巧，对学生进行解题方法的指导，进一步介绍淋巴因子的有关内容。
（2011・大纲全国卷，5）研究发现两种现象：①动物体内的B细胞受到抗原刺激后，在物质利用甲的作用下，可增殖、分化为浆细胞；②给动物注射从某种细菌获得的物质乙后动物对这种细菌具有了免疫能力。则这两种物质中
A.甲是抗体，乙是抗原 B.甲是抗体，乙是淋巴因子
