超声波医师工作总结范例6篇

超声波医师工作总结

超声波医师工作总结范文1

【关键词】超声波 快速石蜡切片 术中 病理诊断

中图分类号:R361.2 文献标识码:B 文章编号:1005-0515(2011)5-113-02

术中快速病理诊断是手术过程中快速确定病变性质,为临床确定手术方案提供依据的重要诊断方法。我院采用DCSK-Ⅱ型超声波人体组织快速处理仪进行术中快速制片、病理诊断,效果满意。现总结如下:

1 材料与方法

1.1材料 对我院2006年1月至2010年12月术中快速病理诊断诊断病例217例进行回顾性分析,并与术后石蜡切片对比、总结,其中乳腺82例,胃31例,大肠43例,甲状腺23例,子宫16例,卵巢13例,肾4例,肝2例,膀胱3例。

1.2 方法 术中送检标本取病变组织1.5×1.0×0.2cm大小,依次入AF液3min,丙酮Ⅰ5min,丙酮Ⅱ5min,浸蜡5min。以上过程均在DCSK-Ⅱ型超声波快速组织处理仪中进行。水浴箱温度设置75-80℃,浸蜡石腊预先溶化备用,固定液预热,浸蜡时待组织下沉不再出现气泡时将组织包埋于预制的蜡块内,快速冷却,切片,染色,阅片。剩余组织常规石蜡切片,并作结果对照,分析快速石蜡片病理诊断的准确性。

2 结果

术中快速切片良、恶性诊断明确者209例(其中良性78例,恶性131例)诊断率96.4%,与术后石蜡切片相符;术中未定性,需待普通石蜡切片进一步明确诊断者8例(占3.6%),此8例术后石蜡切片诊断2例为甲状腺微状癌,3例为乳腺导管内状瘤,2例为卵巢交界性粘液性囊腺瘤,1例为胃间质瘤。

3 讨论

3.1 术中为了及时、准确确定病变性质,了解肿瘤切除范围是否干净,给术者提供可靠依据,通常采用冷冻切片或传统加温石蜡切片方法进行快速病理诊断[1]。冷冻切片偏厚,细胞肿胀变形,易造成误诊,冷冻切片机价格昂贵,基层医院难以承受,且以住病理技术规范要求冰冻切片报告需二名副主任医师以上的病理医师同时签发报告,这对基层医院来说准入门坎太高。传统加温石蜡切片在加热煮沸过程中制片,温度不易控制,细胞易收缩变形。超声波快速组织处理仪工作原理是机器发出80万次/秒高速振荡的超声波[2],加之75℃水浴箱温度使溶剂介质和熔融石蜡高速震荡产生周期性缩胀运动,从而使组织内的水份很快被有机溶剂替代出来,并加速熔融石蜡渗入组织,使病理切片的前期(固定、脱水、浸蜡)过程缩短至20min左右,并能保持组织细胞的原有形态,切片质量接近常规石蜡切片,优于冷冻切片和传统加温石蜡切片,能为术中提供准确快速的诊断,且性价比高,适宜在基层医院推广应用。

3.2 超声波快速组织处理仪尚能用于脱钙,为偏远山区群众提供便民优质服务。

参考文献

超声波医师工作总结范文2

【关键词】医用超声源 声强 超声检测仪

随着科学技术、医疗计生事业的快速发展,超声在医学领域广泛应用,为医学诊断提供依据。然而数据研究表明,超声对准胚胎的辐照过长即可对胚胎的正常发育造成影响,超声诊断的安全性和其潜在的危险性令人担忧。超声源输出声强成为医用超声检测仪的重要安全性指标。

1医用超声源的种类

在日常生活中,我们通常把20000赫兹以上,人耳难以听到声音定义为超声;医学超声是超声学的分支,其主要研究超声波在人体中的传播规律,进而分析其对人体组织产生的效应。从商品化仪器的角度,医用超声源主要分为两大类:诊断仪和治疗机,其中以诊断仪的种类尤其丰富,主要包括A型、B型、M型、D型。

目前,我们使用的超声诊断仪主要有脉冲式超声诊断仪,其主要是运用超声波脉冲反射原理制成。另一种是超声切面成像仪,也就是我们通常所说的B超;以亮度调制方式显示超声换能器或换能器阵列声束扫查平面内的人物或动物体的断面超声图像的脉冲-回波式超声诊断仪[1]。根据其显示方式不同,脉冲-回波式超声诊断仪又可分为A型、B型和M型。

2医用超声源输出声强的检定

根据JJG639-1998《医用超声诊断仪超声源 》中规定,我们对于医用超声源的检定主要是针对计量性能的检定。

声强是指在声场的某一点处,一个与指定方向垂直的单位面积上在单位时间内通过的平均声能,单位为W/O,目前,声强的测量方法主要有热学法、光学法、电学法、力学法。尤其以光学力法使用最早,范围最广。

医用超声源声强往往通过对B超探头的输出声功率得到,在测量时,先将被检测仪器预热30分钟,水平放置毫瓦级功率计,连续测量三次,取其算术平均值,最后根据被测仪器探头的有效辐射面积,计算出声强。由声强的定义可知,在测量过程中,我们要求超声波的发射方向必须与靶的横截面相垂直,而这对于凹形面等是比较苛刻的,在国际标准中提出了“有界输出功率”的概念,其主要通过专门制作的、中间留有宽1厘米左右窗口的“掩膜”将两侧的非垂直射入的声源屏蔽[2],只取其垂直射入的声源面积,进行计算。

3医用超声源输出声强检定的注意事项

对于被检测的超声检测仪器,我们应允许将其功能调试到最佳状态,使其各方面的性能得到充分的发挥,随着科学技术的不断发展,超声检测仪器也在不断的更新换代,每年厂商都要推出一两项新的技术应用于设备上,在检测输出的声强时,我们一定要将仪器的总增益值放大到最大值。在测试时,一定要对被检仪器进行预热加温,使得仪器进入稳定工作后在对其进行检测,测量时,要注意探头是否完好无损,是否有裂缝,防止探头在进入水中而烧毁设备。

在测量时,要注意调节毫瓦级超声功率计平衡旋钮的位置,以免在测量时产生误差,被测医用超声源的探头要对准耦合声窗的中心位置,这两者之间不能留有间隙,若有间隙,会使得部分的声超能量耦合到毫瓦级超声功率计的水槽中,会导致测量误差的产生[3],对于探头的有效面积,可以根据超声诊断仪的使用说明获得,也可根据公式S=L1*L2计算得到。

4医用超声源输出声强检定的意义

医用超声诊断仪是一种无损伤、非侵入、高灵敏度、价格较低的现代影像诊断设备,应用范围广,在临床上,主要用于对心脏等内脏器官的疾病的诊断,同时也大量的服务于生殖健康和计划生育领域,诊断仪性能的优劣直接关系到诊断结果的准确性、临床阶段的有效性,更加关系到人类的生命健康和生命繁殖的质量。

在医学运用中,我们要求:输出声强一般不得大于10mW/O,当声强达到一定强度时,超声具有的物理能量作用于人体组织而产生超声的生物效应,进而影响人们的身体健康。医用超声源检测规程中规定,对于输出强度大于10mW/O的医用超声检测仪要加以标注,并标明“严禁用于孕产妇作胎儿检查”[4]。所以,在医学上对超声波仪器的使用,应该引起社会和医疗机构的高度重视。大量的数据研究表明,当超声波输出声强超过8.3 mW/O时,血液中染色体发生病变的可能性大大增加,这也就意味着胎儿发生畸形和先天的几率大大增高。因此许多国家呼吁,胎儿在三个月成型期内避免做B超检查。

对于超声诊断我们往往并不需要超声的生物效应,在满足诊断需要的同时,生物效应越低越好,而目前超声行业尤其是彩色多普勒超声的研究和设计过程中存在的主要矛盾就是往往声功率越大,超声设备的成像越清晰,因此对患者带来的身体伤害也越大。能否准确的测量超声诊断设备的最大声输出值对于安全使用超声诊断设备以及超声诊断技术的发展显得尤其重要。

5结语

目前,我们在临床诊断中诊断设备的操作往往是由临床医师承担,在操作过程中通常只关心与设备有效性相关的部分,在胎儿检查时甚至存在怎么清楚怎么调的现象,而对患者的健康的关注基本无从谈起。在对外的招标采购中,采购方也往往只关注产品的成像如何清晰,三维成像效果等。针对这种状况,我们对于超声技术的运用应采取谨慎的态度,加强对医师的安全使用的宣传,严格落实我国相关标准并与国际接轨,在保证患者健康安全的前提下促进临床诊断的高效发展。

参考文献:

[1]王冰.医用超声源输出声强检测仪的研制[D].郑州大学,2007.

[2]李敏毅,许月珍,杨德俊.医用超声源检定中需要注意的事项[J].中国计量,2009,02:108-109.

超声波医师工作总结范文3

多媒体教学是手段

教育心理学研究表明:人获取的外界信息中,83%来自于视觉,11%来自于听觉,增加视觉、听觉信息量是多获取信息最可取的方法。多媒体技术可以把各条神经所在位置的解剖层次、与周围组织的毗邻关系、穿刺的进针路线转换为图文并茂、情景交融、视听结合的教学方式,使以往呆板的教学形式变得丰富多彩,增强了教学感染力和教学内容的内在魅力[3]。除了临床麻醉学教研室提供的区域神经阻滞术的教学录像资料外,我们多年临床教学中所采用的超声显像技术还为我们带来了非常丰富、生动、直观的教学录像,供研究生拷贝,并将图片、动画、录像等资料上传至麻醉学院网站,学生可利用人机对话的交互式教学,突破时空的限制,根据自己的学习情况选择学习时问,反复学习操作要点,从而更加巩固了研究生们对超声显像技术在区域神经阻滞术中的运用的理性认识。

模拟教学是关键

区域神经阻滞的教学是实践性很强的操作性课程,没有感性认识是不易掌握的。而在临床带教时学生在患者身上实际操作的机会并不多,且因所遇病例和带教教师的不同,教学无法标准化。临床技能教学是医学教育的关键,如何在教学中有效提高临床技能是高等医学教育实践教学改革的关键。模拟教学正成为我国医学教育改革中的一个重要方面,可以改变传统的教学模式,提供了虚幻而安全的教学环境,可以在不损害病人利益的前提下,提高医学生的各项临床操作能力和临床诊断能力,培养敏捷正确的临床思维,从而减少在临床实践中的医疗事故和纠纷。在超声显像技术在区域神经阻滞中的运用的临床带教中,我们采用了医学模拟系统和学生模特超声显像学习相结合。医学模拟系统可模拟各种临床环境和病例,使学生可以对临床医学知识、技能和诊断进行综合训练,以高科技为基础,以模拟临床实际情况为前提,以实践教学、情景教学和个体化教学为特征,以其有医疗环境而无医疗风险为突出优点。教师可将重点的内容反复向学生演示,学生可以在不伤害病人和准许发生错误的情况下,反复多次进行操作训练,强化感性认识,直到完全掌握[4]。同时,我们利用超声显像技术的直观、实时、无创等特点,每堂课选择一个学生自愿者做我们的实习模特,系统观摩肋间神经、眶下神经、颈丛神经、臂丛神经、坐骨神经、股神经等神经的走行和它们与周围组织的解剖关系,使得学生对区域神经阻滞有了一个更为具体的感性认识。

超声波医师工作总结范文4

目前,临床医学专业的超声教材的内容比较简单,只是简单介绍超声诊断原理、正常声像图和异常声像图之间的区别,超声诊断学与内科学、外科学等临床学科的教学不同步,往往出现讲到的相应系统疾病的超声特征时,相关疾病在内科学、外科学中并未讲解,学生无法理解超声诊断与疾病特征之间的关系,不利于学生对疾病超声诊断的整体认识,而且容易造成学生诊断思维的混乱。此外,超声诊断学内容具有综合化、融合化的特点,超声诊断学教学学时少(20~30学时)与教学大纲规定教学内容多、超声诊断学概念抽象、相关专业知识更新较快等诸多问题存在一定的矛盾。因此,要求超声诊断学任课教师在授课过程中在强调超声诊断学教学内容的基础性、系统性和完整性以外,应重点强调临床常见病的超声诊断原则及鉴别诊断。教学中应密切联系生活及临床实践,多举例,联系疾病讲解分析,如讲到超声检查时,让学生回忆以前体检或到医院做超声检查的经历。这样既吸引了学生的注意力,也丰富了课堂教学内容。超声诊断学是联系基础医学课程与临床课程的汇合点,在超声诊断学教学实践中最基本的要求就是临床医学专业的学生在学习超声诊断学以后能够迅速判断患者是否适合进行超声波检查,以及选择什么样的影像检查手段是最优的(比较影像学范畴),能够理解超声诊断报告的内容,从而及时准确地对疾病做出诊断。在每次授课结束前,授课教师应对本次授课及近期授课内容做简要总结,突出了超声诊断学的课堂教学重点,可以起到良好的教学效果。如何优化超声诊断学的教学课程,合理安排超声诊断学的讲解内容,是一门需要长期练习的技巧。

二、加强对学生超声诊断思维方法的培养

我国传统教育注重对学生知识的传授,却忽视对学生动手能力和独立思考能力的培养。超声诊断学是医学中的形象思维学科,观察超声图像时要有三维立体思维概念,改变学生单纯的平面观念,使其建立良好的立体思维习惯,对学好超声诊断有重要意义。超声检查可以从不同方位和角度观察病变的回声强度(强回声、等回声还是低回声)、形状是否规则、最大直径、病变的边缘是否清晰以及邻近组织器官的压迫或浸润情况。超声诊断学教师在教学中应逐步使学生认识到科学的思维习惯在日常学习和临床工作中的重要性,使其较好地掌握利用超声波分析诊断疾病的正确思维方法,提高学生的综合诊断能力,如条件允许,可以将便携式移动彩色超声诊断仪(床头彩超)带进课堂直接应用于理论教学,使学生有机会接触彩色超声诊断仪(此方法也已被用于心电图教学过程中),以增加学生对本课程的感性认识,此外,我校设有超声诊断实验室,拥有多台教学用彩超,使学生都能上机操作,让他们有亲身的体验和感受。

三、改进超声诊断学教学的方法和手段,合理应用多媒体教学方法

超声诊断学需要从观察图像来诊断疾病,传统的教师讲授利用板书、挂图或绘图的方式有很大的局限性,学生觉得枯燥乏味,对一些内容难以理解,单纯依靠死记硬背,遗忘较快,使学生在超声诊断学的学习中总处于被动状态。采用多媒体辅助超声诊断学教学具有形象、动态、直观、交互式等优点,可以真实形象、直观具体地反映超声波诊断的特点,为超声诊断学教学提供了现代化的教学手段,是超声诊断学目前最主要的教学手段,使传统的超声诊断学教学思想和观念发生了巨大变化。多媒体教学虽然已广泛应用于超声诊断学的课堂教学,但超声诊断学多媒体教学中也应注意在幻灯制作上必须多下功夫,教学内容难度适中,重点突出,图文并茂,背景和文字要对比鲜明(在超声诊断学教学实践中采用白底黑字效果较好),适量加入动画、声音或实际患者超声诊断录像,对超声图像加以讲解、分析,可以极大提高超声诊断学的教学效果。避免对超声诊断学教学幻灯片的简单复述,放映幻灯片过程中避免速度过快,讲授时语速适当,讲到重点时应放慢速度,给学生思考和记忆的时间,善于使用肢体语言(例如眼神、声音和动作等)突出超声诊断学的重点知识和内容,注意语音、语调的变化,最好在讲授过程中能做到抑扬顿挫。超声诊断学教学过程中应该合理使用多媒体教学,但是不能过分依赖,应根据超声诊断学教学的需要和特点,在多媒体教学过程中融入实物标本、教学模型等传统教具,使超声诊断学教学内容更加生动、直观,激发学生对超声诊断学的学习兴趣,从而有效地实现突出超声诊断学的教学重点,解决教学难点。利用联想式、启发式、探讨式和回顾式等教学方法,把难懂的超声诊断学概念、专业术语用通俗易懂的语言表达,便于学生课后复习记忆。有些重点部分,还可利用板书等传统教学手段。必要时可采取PBL教学法或CBL教学法提高教学质量。注重激发培养学生对超声诊断学的学习兴趣和独立思考判断的能力,尽量将复杂问题简单化,有利于学生对超声诊断学课程难点、重点的理解和掌握,提高学生的自学和实际工作能力。

四、积极调动学生的学习主动性,加强师生沟通

超声诊断学的教学需要有针对性,不能简单地利用“填鸭式”教育完成超声诊断学的教学任务,否则是对学生的不负责任,医学生的学习是长期持续的过程,并且应该持续终生。目前,一般医学院校的教育不可能在有限的时间里将所有医学知识全部传授给学生(因为这是不现实,也是不可能的),支撑医学生终身学习的是对医学的兴趣和自身的责任感与使命感,这也是每个医学生学业、事业成功的关键和决定性因素。现代大学医学教育学强调医学生是医学学习的主体,医学生应具有较强的自我学习的能力,但是目前医学院校的医学生大多为“80后”、“90后”的独生子女,以“90后”的独生子女居多(对这一群体笔者并无偏见),但客观上不少学生在自立方面比较薄弱,依赖性较强,自理能力较差,没有正确的学习目的和端正的学习态度,不能客观、全面地了解自己的知识需求和知识结构,缺乏对超声诊断学的学习兴趣和动力。为解决上述问题,超声诊断学授课教师应积极主动改善教学方式、方法,向临床医学学生明确学习超声诊断学的重要性、实用性和必要性,严格课堂纪律,激发学生对超声诊断学的学习兴趣。此外,超声诊断学任课教师均为附属医院的超声心电科医生,而非学校专职教师,师生之间相处时间短,日常沟通较少,师生感情较为淡薄。因此,超声诊断学授课教师应做好自我介绍,给出联系方式(手机、固定电话、QQ号码、微信和E-mail地址等),当学生在生活学习中遇有任何问题而不方便课堂提问的,均可向超声诊断学授课教师咨询或与教师讨论,做到教学相长。

五、完善超声诊断学的考核方式

超声波医师工作总结范文5

我是一名教师,从教20多年了,最近经常感觉右侧小腿乏力、酸胀、发麻,一节课都坚持不下来。去医院看了,医生说是轻度的下肢静脉曲张。这种病有好的治疗措施吗?能根治吗?

河北 李磊

中国人民总医院血管外科副教授熊江:静脉曲张是临床上最常见的静脉疾病之一,其治疗方法主要包括非手术治疗(主要是穿弹力袜或者弹力绷带外部加压)、硬化剂注射和压迫疗法、手术疗法。您目前病情较轻,穿弹力袜可延缓疾病的发展,但并不能根治;若病情加重,穿弹力袜就无效了。当然,还可以选择其他的治疗方案,如:激光、硬化剂注射、传统手术及旋切刀微创治疗等。激光及硬化剂注射的优点是创伤小,缺点是治疗不彻底,术后易复发,且易形成血栓等。手术是目前能达到根治效果的最理想治疗方式。

专家门诊:周五下午

B超监测可否发现质量不佳的卵子

我结婚5年,2次怀孕都以自然流产告终。做了各种检查,发现我糖耐量异常、胰岛素拮抗,医生说这会严重影响卵子质量,从而导致自然流产。我想知道,通过B超监测排卵、观察卵子形态,是否能避免质量不佳的卵子排卵受精呢?

上海 张佳源

复旦大学附属妇产科医院副主任医师王凌:B超观察排卵,可以排除部分形态欠佳的卵子(如小卵泡排卵),不过,还是有部分卵子虽然形态上与正常卵子没有差别,但长期暴露于卵巢局部异常的生殖内分泌-代谢-免疫微环境中,基因表达受到了一定影响。对于这部分形态无异常的卵泡,B超监测是无法识别出来的。建议你还是针对糖耐量异常及胰岛素抵抗进行生活方式改变和相关治疗,纠正后再备孕。

专家门诊:周二全天(黄浦院区),周四全天(杨浦院区)

小耳畸形聋儿可戴助听器吗

我女儿两岁,由于先天性小耳畸形,宝宝一直不能听到外面的声音,因此也没能学会说话。由于孩子没有外耳道,不能佩戴常规的耳塞式助听器。我最近看到一则消息,说是有一种骨锚式助听装置可以使用,是这样吗?

浙江 吴海容

上海交通大学附属第六人民医院耳鼻咽喉科主任医师时海波:骨锚式助听装置不需要外耳道对声音的传播,而是通过颅骨传导声波振动,直接刺激感受声音的神经结构,从而形成听觉。整个装置由声音处理器、基座和钛合金植入体三部分组成。钛合金植入体就像一颗“小螺丝”,通过微创手术固定于耳朵后上方的骨质。这种植入方式就类似于种植牙,并不复杂,安全性高。随着植入体与周围骨质的良好骨融合,可以真实地将感受器发出的声波振动传入颅骨。基座上的声音处理器大约相当于一枚较大的纽扣,可以隐藏在头发下,对外貌影响非常小。在工作、运动、娱乐时都可佩戴,携带和使用都很方便,也不会产生传统助听器的耳堵塞感、啸叫等不适。洗头、洗澡、睡觉时可将声音处理器摘下。日常可使用专用的清洁刷进行护理,每天洗澡时用清洁刷蘸温和的香皂水刷洗基座即可,非常简单。对于5岁以下婴幼儿,可将声音处理器通过软带固定于颅骨,待孩子颅骨生长至一定厚度时再进行骨锚植入,听觉改善效果会更好。

专家门诊:周四全天

白血病会不会传染

我有2个女儿,大女儿得了白血病,小女儿会被传染吗?大女儿曾经输过血,这与白血病有关吗?

超声波医师工作总结范文6

[关键词] 槐米;芦丁;紫外辐射;正交试验

[中图分类号] R284.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2015)08(a)-0018-05

Study on extraction technology and ultraviolet absorption of sunscreen constituent of rutin from Flos Sophora

SHI Fangchao QIAO Liye LU Yin SU Hua REN Haixiang

Department of Preparation Division, Nanjing General Hospital of Nanjing Military Command, Jiangsu Province, Nanjing 210002, China

[Abstract] Objective To optimize the extraction of Flos Sophora. Methods The samples were scanned from 200 to 400 nm by ultraviolet spectrophotometry, then the average ulrtaviolet absorption was calculated in UVC, UVB and UVA. The quantity of rutin was determined by HPLC. With ultraviolet absorption, rutin content and extraction rate as indexes, the single factor tests and orthogonal experimental design tests L9 (34) were applied to investigate the influence of each factor during ultrasonic extraction. Results The extraction of Flos Sophora had strong UV absorption effect in the UVA, UVB, UVC range. The optimal conditions for extracting were as follows: 70% ethanol concentration, 1∶30 solid-liquid ration, 30 min and 65℃ ultrasound extraction. Conclusion The extraction of Flos Sophora has good ability of ultraviolet absorption and broad-spectrum sun protection. Ultrasonic wave extraction has high extraction yield and requires short time which can be used to extrat sunscreen formulation from Flos Sophora.

[Key words] Flos Sophora; Rutin; Orthogonal design; Ultraviolet radiation (UVR)

槐米为豆科植物槐(Sophora japonica L.)的花蕾,已有2000多年药用历史,《神农本草经》还将其列为上品。槐米中含有芦丁、槲皮素、三萜皂苷、多糖黏液质等成分,芦丁为主要成分[1]。芦丁是天然的黄酮类化合物,维生素P的主要组分之一[2]。近年来有不少国内外医药工作者对芦丁的药理作用进行过研究,槐米中芦丁的含量高达12%~20%[3]。研究表明,芦丁有抗癌防癌、镇痛、降血压、预防中风、抗菌抗病毒、抗衰老、抗炎抗过敏、抗自由基及抗氧化等多种作用[4-5]。芦丁能增强毛细管的韧性,增强血管壁的弹性,对高血压患者具有防止脑血管破裂功效,具有较强的药理作用[6]。本研究采用超声波提取法提取槐米,以多指标考察提取成分,并以槐米中芦丁含量为考察指标进一步研究,最后确定了槐米主要防晒成分芦丁的提取工艺,为槐米芦丁在工业化生产及化妆品防晒霜中的开发提供了实验依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Agilent1260型高效液相色谱仪,KQ5200DE型数控超声波清洗器(昆山超声仪器有限公司),UV-2100型紫外-分光光度计(岛津仪器上海有限公司),AE240电子分析天平(METTLER TOLEDO精密仪器有限公司),FA1204S分析天平(上海市精密仪器有限公司),密封式摇摆型粉碎机CF-6A(江苏金坛市医疗药材器械厂)。

1.2 试药

槐米(批号:121010,南京海源药事服务有限公司中药饮片厂),经南京总医院王曙东主任药师鉴定为豆科植物槐(Sophora japonica L.)的干燥花蕾。芦丁对照品(批号:100080-200707,中国食品药品检定研究院);甲醇为色谱纯;其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 槐米的提取

将槐米粉碎后,取0.5 g槐米细粉置50 mL容量瓶中,加入15 mL 70%乙醇,在65℃下超声提取30 min。超声后过滤并定容至50 mL容量瓶中,重复提取两次,合并提取液,精密吸取提取液1 mL,定容到25 mL容量瓶中制成供试品液。

2.2 槐米提取液的紫外吸收

取槐米供试品液1 mL,加70%乙醇定容至25 mL容量瓶中,以70%乙醇为空白,在200~400 nm范围内进行紫外扫描,确定各波长下的吸光度值。分别计算UVC(200~280 nm)、UVB(280~320 nm)、UVA(320~400 nm)各区间平均吸光度值。

2.3 芦丁的含量测定[7]

2.3.1 最大吸收波长的选择 精取一定量的对照品于50 mL量瓶中,用甲醇定容,进行紫外扫描,测得最大吸收波长为257 nm。见图1。

图1 对照品芦丁的紫外吸收图

2.3.2 色谱条件的选择[8-9] 色谱柱:Lichrospher柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:甲醇-0.5%冰醋酸(45∶55),流速1 mL/min,检测波长257 nm,柱温30℃。样品溶液过0.45 μm微孔滤膜,进样10 μL。见图2。

1:芦丁;A:芦丁对照品;B:槐米提取液供试品

图2 芦丁HPLC图

2.3.3 对照品储备液的制备 精密称取于110℃干燥至恒重的芦丁对照品20.48 mg,加甲醇定容至50 mL容量瓶中,摇匀,作为对照品储备液(含芦丁0.4096 mg/mL)。

2.3.4 供试品溶液的制备 样品溶液的制备:精密称取本品(药材)0.03 g,置50 mL容量瓶中,加70%乙醇适量,65℃下超声提取30 min使溶解,取出放冷至室温,70%乙醇定容至刻度,摇匀,再用0.45 μm微孔滤膜过滤,弃初滤液,取续滤液作为供试品溶液。

2.3.5 线性关系考察 分别精密吸取“2.3.3”项下芦丁对照品储备液各0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mL,置10 mL容量瓶中,加甲醇定容至刻度。经0.45 μm的微孔滤膜滤过后,分别精密吸取10 μL,注入液相色谱仪中,按“2.3.2”项下方法进行测定,以对照品的进样量为横坐标(X),对照品的峰面积为纵坐标(Y)进行线性回归,得回归方程Y=18 630X+9.9292(r=1,n=5)。结果表明芦丁进样量在0.02048~0.32768 mg/mL范围内与峰面积呈良好线性关系。

2.3.6 精密度试验 取“2.3.3”项下芦丁对照品溶液,按“2.3.2”项下液相色谱条件,连续进样5次,芦丁峰面积的RSD为0.15%(n=5)。

2.3.7 重复性试验 分别精密称定本品5份,按照“2.3.4”项下供试品溶液制备得到5份供试品溶液,分别精密吸取10 μL注入液相色谱仪中,记录芦丁峰面积,以外标法计算各供试品中芦丁的含量,结果平均含量为207.98 mg/g,RSD为0.8%(n=5)。

2.3.8 稳定性试验 照“2.3.4”项下方法制备供试品溶液,采用“2.3.2”项下液相色谱条件,分别在 0、2、4、6、8 h进样10 μL,记录芦丁峰面积,测定供试品标示含量,RSD为0.23%,表明供试品溶液在8 h内稳定性良好,符合实验需要。

2.3.9 加样回收率试验 精密称取槐米细粉(60目)0.015 g,共9份,分别置9个50 mL量瓶中,分别精密加入“2.3.3”项下的芦丁对照品溶液作为储备液。储备液4、5、6 mL各3份,制成低、中、高浓度三组,按“2.3.4”项下的方法制备即得。分别精密吸取10 μL注入液相色谱仪,计算各供试品含量,结果平均加样回收率为98.15%,RSD为2.25%(n=9)。

2.4 单因素考察

2.4.1 紫外吸收的单因素考察 以乙醇为提取溶剂,分别从乙醇浓度、超声时间、超声温度、料液比、提取次数方面对槐米提取液的吸光度值的变化进行考察。见图3。

由图3A可见,在不同乙醇浓度下,槐米提取液在各紫外区间的平均吸光度值先升高后降低,在乙醇60%浓度下为最高,紫外辐射UVR(UVR=UVA+UVB+UVC)=1.741(n=3);图3B显示,在不同的料液比条件下,槐米提取液的紫外平均吸光度值先升高后降低,在料液比1∶30条件下,紫外平均吸光度值相对最高,UVR=1.576(n=3);图3C表明,在不同的超声温度条件下,槐米提取液的紫外平均吸光度值先升高后略有降低,在50℃时紫外平均吸光度值最高,UVR=1.973(n=3);图3D表明,各超声时间下除10 min外其他条件下紫外平均吸光度值基本差不多;图3E表明,提取次数实验中,槐米提取液在各区间的紫外平均吸光度值基本一样,提取5次时紫外平均吸光度值最高,UVR=1.658(n=3)。

2.4.2 芦丁含量的单因素考察 分别从乙醇浓度、料液比、超声时间、超声温度、提取次数方面对槐米提取液中芦丁含量的变化进行考察。见图4。

由图4A可见,芦丁的提取率先升高后降低,以60%乙醇浓度时为最高,芦丁含量为188.1 mg/g(n=3),因此选择60%乙醇浓度。随着溶剂量的增加,在料液比1∶10~1∶30之间芦丁的含量逐渐升高。图4B显示,当溶剂量超过30倍量时,芦丁含量随着溶剂量的增加反而降低。故选择料液比1∶30,此时芦丁含量最高,为189.0 mg/g(n=3)。图4C表明,芦丁在30~50℃的含量随温度的升高而增加,而当温度进一步升高时,易引起芦丁结构的破坏和生物活性丧失,其含量反而略有下降。因此,选择超声温度50℃,芦丁含量为184.6 mg/g(n=3)。由图4D可见,在超声时间30 min左右芦丁的提取率最高。超过30 min后芦丁含量反而下降,超声时间过长可能使芦丁受到破坏。因此,选择超声时间为30 min,芦丁含量为191.1 mg/g(n=3)。由图4E可见,提取2次时芦丁的提取率最高,芦丁含量为177.1 mg/g(n=3)。

提取时温度越高,分子热运动越激烈,使溶剂与提取物分子间的传递加速,有利于目标产物的溶出,有效成分的提取率就越高,而超声时间决定生产周期,因此,它是工艺研究中一个十分重要的考察因素。由图4E所示,在提取次数单因素试验中表明,多次提取会造成芦丁氧化从而使得芦丁含量下降,而且使得实验步骤过于繁琐,因此选择提取2次为最佳。

2.5 正交试验考察

根据“2.4”项下的结果,超声波提取法中主要影响因素为乙醇浓度(A)、料液比(B)、超声时间(C)、超声温度(D)4个因素。以四因素三水平建立因素水平表,并依此设计L9(34)正交表进行正交试验,见表1、2。

由表3槐米紫外吸收方差分析所示,从方差比的大小可知,D>A>B>C,影响槐米紫外吸收的主次因素顺序为超声温度>乙醇浓度>料液比>超声时间,超声温度差异有统计学意义(P < 0.05),最佳提取条件为A3B2C2D3。由表4芦丁的正交试验方差分析表明,从方差比的大小可知,D>A>B>C,影响槐米中芦丁含量的主次因素顺序为超声温度>乙醇浓度>料液比>超声时间,而其中超声温度、乙醇浓度和料液比差异均有统计学意义(P < 0.05),最佳提取条件为A3B2C2D3。综合上述结果,最佳提取条件为A3B2C2D3。

2.6 最佳工艺验证试验考察

取槐米0.5 g,置于50 mL容量瓶中,加入70%乙醇15 mL,在65℃下超声提取30 min,重复提取2次。在最佳工艺条件下重复实验3次,分别测定槐米提取液的紫外吸收度、芦丁含量,取平均值,由表5结果可知,槐米药材中芦丁的UVR达到1.834,芦丁含量为198.63 mg/g ,该提取工艺稳定,提取率高。

3 讨论

3.1 槐米提取方法

中药槐米的提取方法一般有醇提法、热水提取法、碱提酸沉法、超声波提取法等[10-11]。超声波法具有提取时间短、操作简单、能避免高温对提取成分的影响等优点,最终采用超声波提取法制备槐米提取液。

3.2 槐米芦丁的防晒作用

槐米芦丁能增强和恢复血管壁的弹性,降低毛细血管的通透性,增强毛细血管的韧性,对皮肤有着较强的抗自由基氧化和抗辐射作用,对紫外线具有很强的吸收作用,有明显的清除细胞活性氧自由基的作用,是目前较为理想的一种天然广谱防晒剂[12]。

3.3 太阳光中各波段紫外线作用

太阳光中的UVA为长波紫外线,有强穿透力,能使皮肤干燥,加速表皮细胞中黑色素形成,使得肤色变黑[13],这也是诱发皮肤癌的重要原因之一。UVB为中波紫外线,中等穿透力,但对皮肤作用力最强,能使皮肤表皮细胞中的核酸或蛋白质变性,长期或过量照射会使皮肤晒黑,并引起红肿和脱皮。UVC短波紫外线对皮肤的伤害最大,短时间内照射就能灼伤皮肤,长时间或高强度的照射还会诱发皮肤癌[14-15]。所以本研究在对槐米提取物的紫外各区间进行紫外吸收度的考察。

3.4 单因素考察试验

单因素考察试验表明,槐米提取液的紫外吸收值大小与芦丁含量高低成正比,这也说明槐米提取液的紫外吸收与其芦丁的含量有着密切的关系。因此,笔者对它们同时进行了正交试验考察[16]。紫外吸收方差分析结果表明,温度有显著差异。芦丁提取方差分析结果显示,乙醇浓度、料液比和温度均有显著差异,两者最佳提取条件一致,这也表明了芦丁含量是考察槐米提取液紫外吸收能力的重要指标。最终选择优化条件为:称取适量槐米细粉,加入30倍量的70%乙醇,超声温度65℃,超声30 min,重复提取2次。提取的芦丁含量可达198.63 mg/g。

本研究对槐米防晒成分芦丁的紫外吸收及其提取工艺进行了详细研究,对开发有关槐米防晒产品提供了实验依据,将会在今后研制防晒中药复方剂型的实验中进一步研究。

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