微生物培养基报告范例6篇

微生物培养基报告

微生物培养基报告范文1

关键词:微生物检验分析前后质量管理质量控制

Doi:10.3969/j.issn.1671-8801.2014.01.552

【中图分类号】R9【文献标识码】B【文章编号】1671-8801(2014)01-0375-01

临床微生物检验全面的质量管理包括:分析前质量管理、分析中质量管理、分析后质量管理。平时我们说质量控制,大多数临床医师甚至实验室工作人员都会认为这是实验室的事,也就是只注重了分析中的质量控制。有学者对发生在不同阶段的误差率进行了统计,发现由于分析前各种因素导致的误差率占总误差率的46.0%-68.2%,由于分析中产生的误差率在占总误差的15%以下,由分析后原因导致的误差率占总误差的18.5%-47.0%。由此可见,分析前因素是目前全面质量管理中最薄弱的环节,分析后的质量管理也不容忽视。因此,加强对分析前、分析后质量管理对微生物检验结果的准确可靠,提高医疗质量是非常重要的。

分析后质量控制是全面质量管理的最后一道程序,随着微生物实验室各项服务的进一步完善和临床需求的不断增多,实验室和临床之间的沟通在分析后质量管理中也越来越重要。如今国内外大多数学者认为分析后质量管理包括临床微生物检验后结果确认、规范报告、授权、传送报告、结果解释与咨询服务、临床微生物室样本的保存等。

1对微生物检验结果分析后的系统性评审

就是检验后要对分析的整个过程进行回顾,以评价检验结果与已知的患者的临床信息的符合程度。这一点目前已引起越来越多微生物实验室的高度重视。包括:①样本采集前患者的准备情况,及《标本采集手册》的执行情况。样本采集是否合格,如血培养采集时间的要求,痰培养、尿培养患者的准备情况等。②至采集样本到微生物实验室接收样本的这段时间里,医护人员对样本的处理是否得当,例如:室温、冷藏、保温、立即送检等。③微生物实验室是否按相关规定接收或拒收临床样本。让步标本、拒收标本应有详细的记录,并在检验报告单上备注栏给予说明,结果解释时也要说明,供临床医师参考。④对微生物检验结果进行全面核对。检查是否存在错报、漏报,是否书写错误。药敏结果的审查,对不常见或患者药敏结果前后不一致(鉴定为同一种菌),应检查是否存在污染,复查平板上菌落的纯度,和以前的药敏比较,必要时重做药敏或鉴定。

2报告填写要规范

检验项目要清楚,检验样本性质要明确,患者信息准确全面,包括:姓名、性别、年龄、科别、床号等;样本的采集时间和日期,接收标本时间,报告日期与时间,医师可据此推算出整个检验的全过程所经历的时间;报告实验室的名称;血培养应注明报阳时间,据此可帮助医师鉴别其为感染菌或污染菌;尿培养要报告菌落计数,如果有3种以上的细菌生长,考虑污染,不必再做鉴定和药敏,报:多种细菌生长。要注意检验结果与检验项目的一致性。如痰培养阴性应报告:培养48小时正常咽喉杂菌生长。如果样本是深部痰,培养却无细菌生长,则报告无细菌生长,不能报正咽;可结合涂片分析,如果培养不长菌,而涂片可见较多细菌,可考虑厌氧菌感染,在备注栏给与说明,提示临床考虑厌氧菌感染。粪便培养长出较纯的肠球菌,在备注栏注明:纯培养。这种情况可能是抗生素用得太多,导致菌群失调。血培养阴性应注明培养时间。菌株的药敏结果至少要参照上一年的标准。备注栏可以注明相关的微生物检验结果的解释。

3危急值报告和分级报告决不可少

临床微生物实验室应建立危急值报告制度和分级报告制度,并按制度执行。血培养、脑脊液培养要进行分级报告,以便让临床医师及时了解检验信息,为患者的治疗争取时间。需要报危急值的微生物检验项目有:血培养报阳、脑脊液培养、脑脊液染色镜检,国家规定要上报的传染病如:羊布鲁菌感染、鼠疫耶尔森等要报告当地疾病预防与控制中心,并完成传染病上报程序。报告方式一般选择电话报告,危急值报告要作好记录,包括:患者信息、被通知人姓名、通知人姓名、报告时间、日期、微生物初步检验结果,并保证通知到管床医师知晓。

4微生物检验结果的解释与咨询服务

随着现代医疗诊治的需要,微生物实验室应对临床医师和患者提供结果解释与咨询服务。对于医师和患者的疑惑,从实验室的角度给医师和患者以合理的解释,指导医师看懂微生物检验报告单。通过和医师、患者的沟通,我们也可以了解更多的临床知识,积累更多的经验,更好的服务于临床。

5作好微生物检验样本的保存工作

菌种的保存要符合生物安全的要求,要选择合适的保存方法,对分离到的临床菌株进行分类保存,一方面以备复查时用,另一方面完善微生物室的菌种库。对于检验后不用的样本,各种培养基及其他感染性材料要放入有专门标记的黄色垃圾袋中,注射器的针头、玻片等利器应放入利器盒内。微生物实验室不得存放垃圾,装满的垃圾及时运走,放在指定的安全的地方。感染性医疗垃圾和非感染性垃圾要分开存放,感染性医疗垃圾必须经高压灭菌处理后方可离开实验室,非感染性垃圾可以不高压,按生活垃圾处理。

目前,随着微生物检验技术的不断进步,各种设备的不断更新,微生物检验已深入临床。临床医师对我们的微生物检验结果也越来越重视,微生物实验室和临床的联系越来越紧密。在有限的抗生素的大环境下,指导临床医师合理使用抗生素,防止耐药菌株的出现,微生物实验室和临床应该紧密合作,加强对分析前后的质量管理,更好的服务于临床。

参考文献

微生物培养基报告范文2

【关键词】卫生微生物学;实验教学;改革探索

卫生微生物学是预防医学重要的专业课程也是必修的考试课程,而卫生微生物实验教学是卫生微生物学教学的重要环节,实验教学的质量直接关系到学生对这门课的兴趣及其学习效果,除此之外实验能力的培养在培养符合社会需要的人才方面也具有不可替代的作用。卫生微生物学检测的目标对象不仅包括病原微生物,也包含了非致病和条件致病性微生物,标本的来源除了人体之外,也来源于空气、水、食品、药品、化妆品等人类与之息息相关的生境,并且致病微生物的数量在各种生境标本中也很低,因此,卫生微生物学实验的教学在采样方法、采样量、样品处理方法等方面与医学微生物学和临床微生物学实验的教学存在很大的区别。

十年前“非典” 事件的突然发生,充分暴露出了我国目前在公共卫生与预防保健事业方面的薄弱。近几年随着公共卫生体系和相应的应急机制的建立,公共卫生方面的人才也相对紧缺并且也应加紧培养,特别是在培养具有卫生检验方面能独立工作、解决实际问题且具有扎实的实验操作能力的专业人才是预防医学高等教育中需要迫切解决的重要课题。那么作为教学人员,如何在一学期的时间里,让学生对卫生微生物学的知识体系有一个整体、扼要、明确的认识,如何有效引导学生对所学的知识以及实验操作技能能够学以致用,是我们应该去面对和解决的课题。针对社会对卫生检验人才的需要,我们应该深入地改革实验教学方法,积极努力地培养学生的动手能力、实践能力以及创新能力。近年来,我们总结经验,努力创新,主要从以下四个方面对卫生微生物学实验课程的教学进行改革和探索。

一、设计合理的实验课教学内容

1、基本技能训练模块,加强基本实验技能训练

学习预防医学的基础是医学微生物的学习,鉴于医学微生物课程的学习是在大二时设置的,考虑到一些学生对基本的微生物操作有所遗忘,在初始的实验模块中我们主要是加强学生对基本的微生物实验能力的培养和巩固,以规范学生的无菌操作意识和安全意识,不断培养实验严谨作风和提高责任意识。

基本的微生物实验能力的培养比如玻璃器皿的清洗包扎和干热灭菌、培养基的配制和高压蒸汽灭菌,无菌接种方法、细菌生理生化实验的复习与巩固、显微镜油镜的使用、细菌染色标本片的制备及观察等等。只有不断地提高学生基本实验操作能力,才能保证在公共卫生检验方面出具的报告具有一定的准确性。安全意识比如进入实验室之前必须穿好白大褂系好扣子,绝对地严禁在实验室里吃东西、喝水,所带的其他物品一律放在非污染区,禁止吸烟、化妆,不能在实验室大声喧哗,如果在实验过程中出现意外一定要及时报告实验老师,不能擅自处理,实验结束后双手消毒、清洗干净后方能离开等。严谨作风和责任意识培养主要是鉴于学生以后主要工作是面对各种卫生材料进行检验,因此只有加强这方面的教育才能为社会大众交出一份合格可实的报告。

2、综合实验模块,培养良好的实验兴趣,重视实验总结和撰写实验报告

综合实验模块我们重点是加强对几种生境中常见的检样进行检验。目前我们开设的主要包括水生境、空气生境、食品生境、化妆品和药品这几块。这其中包括了细菌总数、大肠菌群、真菌总数、常见致病菌的检测方法的学习。这一模块的学习主要是以集体学习的方式为主,每一小组都是针对同样的检品进行检验,这样有利于教师对学生基本入门时所出现的问题进行掌握和及时的解决。为了进一步加强学生的实验兴趣,我们在学习每一生境样品检验的同时也让学生自己提供检样来进行检测,在满足好奇意识的同时加强了实验操作能力和实验兴趣。近几年我们在化妆品生境模块中,学生自己提供的各种护手霜中均检出了铜绿假单胞菌。这也表明了目前市场上价位比较低的一些品牌的护手霜的安全性还有待于提高。

在此模块中通过卫生微生物学实验课教学,还应该让学生重视实验总结和撰写实验报告。这样才能不断强化检验的流程意识:正确的采样和规范的送检是我们完成检验工作的必要前提;实验材料的准备以及正确的操作是我们完成检验的保证;对结果的充分分析和讨论是实验的关键,若面对出现的实验结果不能进行正确的分析和结论,所做的实验就没有任何意义。

3、创新实验模块,培养一定的科研潜力

微生物培养基报告范文3

革兰染色法是丹麦细菌学家christian gram在1884年创建的细菌鉴别染色法(differential staining),是鉴定细菌最基本的方法 标本直接或沉渣涂片革兰染色(简称涂片染色,下同)是临床微生物检验的日常检查方法,也是卫生部《全国检验操作规程》所规定的必检内容 革兰染色,一百多年来沿用至今,仍具有重要的使用价值 本文重点阐述涂片染色在临床微生物检验工作中的具体作用,表现在以下几个方面

有助于正确鉴别标本来源和性质,排除污染,确定感染

正确留取标本,对报告结果至关重要 如下呼吸道感染患者送检的标本是来源于呼吸道还是口腔 除肉眼观察外,更可靠的方法是涂片染色镜检 呼吸道标本以脓细胞 黏液丝 柱状上皮细胞为主;口腔唾液以鳞状上皮细胞为主 涂片染色可直接反映标本留取是否合格

涂片染色镜检是鉴别炎性标本与非炎性标本的可靠方法,脓细胞的数量直接反映感染存在的可能性及感染的程度;另一方面,涂片染色与培养结果符合与否,可以帮我们排除污染,确定感染

有助于判断机体某些系统微生态是否平衡

由于细菌培养受培养基 环境因素 培养条件以及细菌本身生长速度等多种客观因素的影响,培养生长的微生物种类及数量不一定能客观反映某些系统为生态情况;而标本涂片革兰染色不受这些因素的影响,能够真实客观地反映微生物包括某些厌氧菌的生态平衡情况 涂片染色对上呼吸道 口腔 下肠道 泌尿生殖道等有菌部位标本尤其重要

有助于对感染菌的判断

正常情况下,人体与常居菌形成一种稳定的微生态平衡 由于某些原因,一旦机体的这种微生态平衡遭到破坏,某种非优势菌取得优势的时候即可引起机体的免疫反应,进而可引起感染 脓细胞参与对感染菌的吞噬作用 因此,脓细胞所大量吞噬的细菌即是引起感染的病原菌

有助于提高标本阳性检出率

标本涂片染色镜检见较多脓细胞,而找不到病原菌时,就要考虑结核杆菌 军团菌 病毒等感染的可能,并进一步有针对地做相应的特殊培养 如果标本涂片中脓细胞伴随细菌出现,而普通培养没有相应细菌生长,应考虑厌氧 某些需氧菌 生长缓慢的细菌,对所用抗生素敏感细菌的感染以及培养失控的可能性,进一步作厌氧培养或其他特殊培养 由于各种先进技术在微生物领域的应用,新病原菌不断发现,且都需要特殊培养才能生长,有的甚至不能体外培养 因此,为了尽可能减少漏检,标本涂片革兰染色具有特别重要的价值

有利于临床早诊断 早治疗

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抽取样品环节

在采样过程中,需严格无菌操作,采样数量及方法与检验目的应相适应,同时监控采样现场的温度、湿度及卫生状况。在餐饮食品微生物检验中,样品的正确抽取是检验的一个重要环节,其操作的熟练和正确与否直接影响检验结果的准确性。

在采集样品的过程中应注意如下几个问题:

采样前应准备好灭菌彻底的采样工具和容器或者无菌采样袋。采样工具和容器严禁用消毒剂消毒,样品中不得加入防腐剂,以免影响检验结果的准确性。

在采样时,严格遵守无菌操作,防止污染样品。在严格无菌操作的条件下,按照规定的样品采集标准均匀而准确的取样,并及时封口,使样品具有代表性和准确性。

抽样须秉承随机原则,在餐饮样品抽取的过程中,要从具有代表性的样品中随机抽取,抽样方案与抽样工作应保持统一,样品的数量应满足样品各项检验的需要。鲜榨果蔬汁饮料及熟食卤制品等高风险餐饮食品的抽取需优先选择被抽样单位的新鲜制品,使其抽检样品达到质量研究和控制的效果。

抽取的样品应当严格按照样品的物理、化学和生物学等特性,或其标签标识上注明的储运条件储藏运输,以确保样品在检测前的完整性和原始性。运送冷冻和易腐蚀食品应用车载冰箱或在手提保温箱内加适量的冰袋,保证储藏运输。运输途中应防止样品升温腐败或融化现象,已保证检测结果的真实性和准确性。

检验过程中应注意的问题

培养基的选择。食品微生物检验所用培养基,必须由专业厂家生产,产品的质量必须符合有关的质量标准,保存应符合相应要求,防止潮解、结块、变色等情况。在实际的操作中要尽量缩短开盖时间,取用过的培养基要及时放置低温干燥的环境中保存。一些商品化即用型培养基平皿应对培养基作外观检查,细致检查该类培养基是否开裂、灌注是否均匀、有无过多的气泡,清晰度和有无肉眼所见的污染。培养基的配置应按照规定的方法配置,并做好原始记录,在配置时选用清洗干净的玻璃器皿和耐高温的食品级塑料器皿,避免使用铜、铁等器皿,以避免对微生物生长的造成影响。

检验用水的选择。餐饮食品微生物的检验用水需选择蒸馏水或纯净水。自来水中有较高浓度的余氯、氰化物、钙、镁、汞、砷、等物质,会抑制细菌的生长,造成细菌总数、真菌和酵母菌数量检验值偏低,引起某些致病菌检验的假阴性结果,使本来不合格的食品流入餐饮流通环节,给人民群众的身体健康造成危害。

严格的操作步骤。食品检验应由专业培训的工作人员负责操作。进入无菌室从样品的制备到检验都要为防止二次污染采取必要的措施。进行微生物操作的整个过程要严格无菌操作,防止检测样品在操作过程中的污染,操作过程中培养基的温度及倾倒的量应严格按照要求操作,将温度应控制在40℃~45℃之间,培养基的倾倒量应确保每个平皿的倾注量在15ml~20ml之间,并将培养基与检样和菌悬液充分混合。操作人员必须牢固树立无菌观念,在整个操作过程中均要求无菌操作,尽量靠近火焰动作,从微生物的分离、纯化到接种手法应规范迅速。

检验报告及结果的准确性控制

检测流程中,应及时观察培养的样品并记录结果,出具检验报告时用回归分析法和方差分析法进行数据处理,去除不必要的误差,并对照相应标准对餐饮食品的微生物质量进行合理的评价。

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关键词: 临床微生物学 基本技术 实验考核 方法 应用

医学检验专业的学生毕业后大多从事医学检验和实验室工作,除了理论知识外,熟练的实验操作和技能是他们立足的基础。临床微生物学检验是医学检验专业的重要专业课,是一门实践性和应用性均很强的学科。随着感染性疾病类型的改变,新发和再发病原体的不断增加,临床微生物学在临床检验工作中占据重要地位,并对培养合格的临床微生物学检验的专业人才提出了更高要求[1]。另外,临床微生物学接触的多为病原微生物,必须树立“有菌观念”,保证“无菌操作”,充分掌握生物安全的相关知识,才能适应临床和科研工作。因此,在临床微生物学检验实验教学中,教师必须高度重视对学生的基本实验技能训练和培养良好的实验习惯,做到从头从严抓起,使学生熟练掌握各项基本实验技术,融会贯通,并加强探索和创新等科学素养的培养。

为提高教学质量,我们实行在完成微生物学基本技术教学后,对学生进行标准化实验考核。多年的经验显示,对微生物学基本技术进行标准化考核,不仅可评价学生对基本技术的掌握程度,进一步规范基本技术操作,促进学生学习的主动性和积极性,而且是评价和提高教学质量、推进教学改革的有力依据。

一、临床微生物学基本技术标准化实验考核内容及考核目标

在临床微生物学中,实验基本技术重要包括显微镜使用、革兰染色、培养基制备、消毒与灭菌、细菌分离与培养[2]。根据教学大纲和实际情况,我们选择革兰染色和分区划线两个项目作为实验考核项目,并要求在20分钟内完成操作并作出染色结果报告。其中革兰染色主要检查学生对革兰染色技术的掌握情况,染色结果判断和报告准确性,以及显微镜使用和维护;分区划线除了考核学生对分区划线技术的掌握情况外,还包括无菌操作、接种环使用、开/拿平皿及划线的手法、实验材料标记、清理台面等实验习惯的考核。

二、临床微生物学基本技术标准化实验考核方法

目前临床微生物学实验课都是小班教学,我院基本上是一个教师负责28―32名学生,每个年级由3―4位教师带教。为避免教师个人习惯和师承的差异,在临床微生物学实验教学中实行规范化带教,对教学内容、教学方法,以及实验操作基本技术等方面均进行统一。这样,可以有效避免因教师因素引起的差异,使标准化实验考核能顺利进行。

临床微生物学基本技能标准化实验考核,包括实验考核组织、标准化操作方法、标准化监考和记录、标准化评分标准、修正和预防措施。具体方法和操作过程如下。

1.实验考核组织

在实验课的第一堂课,即告知学生要进行基本技术考核。在考核前1周,教研室统一对学生讲解考核要求和纪律,考核内容及评分标准等文件。考前2天,实验室准备好考核用玻片、试管架、接种环、记号笔、培养基、各种试剂、显微镜等材料和仪器。考前1天转移考核用菌种,保证细菌处于对数生长期。教研室对参加考核的所有学生随机安排考试地点和时间,考核名单及具体安排于考前1天张贴在实验室门口,由非带教老师担任监考老师。

2.标准化实验考核内容

选择金黄色葡萄球菌ATCC25923和大肠埃希菌ATCC25922作为考试用菌种。每个学生一个菌种,编写不同号码。要求在20分钟内完成革兰染色和分区划线两个项目操作,并作出染色结果报告。

3.标准化操作方法

严格无菌操作。革兰染色包括做好标记,正确制片;自然干燥;火焰固定;结晶紫初染,卢戈碘液媒染,95%酒精脱色,稀释石碳酸复红复染;吸水纸吸干;油镜观察;结果报告;油镜和玻片清洗;台面整理。分区划线包括标记,划线的姿势;平皿打开的手法,平皿放置;平皿开口朝向;划线分布;放培养箱培养。

4.标准化监考和记录

按照考核安排表,学生在规定时间和地点进行操作并报告结果,每位教师在每个时间段负责3―4名学生,对学生的每一个操作进行监督并记录,当学生在油镜下找到细菌后,监考教师检查染色结果并记录。学生在记录单上填写染色结果报告并签名。加强考场纪律,用计时器提醒学生。教师不回答学生任何与考核有关的问题。

5.标准化评分标准

实验考核成绩以20分计,直接计入课程总成绩。分数分配如下。

(1)革兰染色技术9分。标记0.5分;制片1分;固定1分;染色步骤2分(结晶紫初染,卢戈碘液媒染,95%酒精脱色,稀释石碳酸复红复染每个步骤各0.5分);染色结果正确1分;报告正确1分;显微镜使用和维护2分;玻片清洗及台面清理0.5分。

(2)分区划线9分。平皿底部标记0.5分;平皿放置0.5分;无菌操作2分(接种环灭菌及冷却、平皿开口朝向、单手开平皿、酒精灯正确使用各0.5分),划线姿势和手法1分;送培养箱培养1分;划线分布2分;分离结果2分(划线分布和分离结果由老师在培养后第二天评分)。

(3)其他2分。在规定时间20分钟内按要求完成所有操作。超时1分钟扣0.5分,超时2分钟扣1分,超时3分钟扣2分,超时4分钟扣3分,超时5分钟扣5分。超过5分钟未完成操作,参加补考。补考以总成绩为18分计,通过者实验考核成绩为12分。

6.修正和预防措施

对不会用显微镜(包括油镜下找不到视野,不会使用油镜等),结果报告错误(与镜下结果不符,如球菌报告为杆菌,红色报告为革兰阳性等)的学生,无论前面各项操作结果如何,一律重考。

考核结束后,进行分析并做总结。除了对学生考核成绩进行分析外,还特别注意在考核过程中出现的各种问题,并针对考核中常见的特殊性问题,在实验教学中加以改进和提高。

三、标准化实验考核应用体会

临床微生物学基本技术实验考核是以教学大纲为质量标准的考试,目的是检验学生是否达到教学大纲要求和学业成绩的差异。主要考核学生对常用临床微生物学实验技能的掌握程度。实验考核结果不仅可评价学生对临床微生物学知识和技术的掌握程度,而且是评价教师教学质量的有力依据。

对医学检验专业学生,我们一直非常重视他们的临床微生物学基本技能训练,在教学中做到以小组为单位,由带教教师讲解并进行操作示教。在学生自己操作过程中,教师在实验室内巡回,仔细观察学生操作,对不规范和错误的操作及时纠正,下课前总结并提醒学生在试验中出现的问题。由于学生普遍对医学检验检验专业和临床微生物学的认识,加上学生均知道要进行操作技术考核,绝大部分学生在实验过程中能做到较积极主动地学习。

自2005年开始建立标准化实验考核体系,2006年开始实践以来,我们发现建立和应用标准化的实验考核体系,一方面可更好地促进学生的学习积极性:实施标准化考核以来,学生对基本技术的重视较以往明显提高,每次实验中都认真操作,完全不需要教师像以前一样进行检查,真正做到自觉、认真,甚至有部分学生利用课余时间联系实验室进行强化联系。另一方面可使实验考核规范化,做到有据可依的评分,避免人为因素等诸多可变因素对学生成绩的影响,做到有据可依、客观、合理、公正地评价和评分。另外,由非带教教师进行监考和评分,避免了因带教教师个人喜好等因素影响学生成绩,也可进一步促进实验带教的规范化。

总之,与以前的实验考核比较,标准化实验考核体系不仅能进一步促进学生的学习积极性和独立解决问题的能力,标准化的评分标准使学生在完成考核后对自己的成绩已经心中有数,避免少数学生对自己成绩有意见的现象,而且能促进学生在操作过程中养成良好习惯。临床微生物学基本技术标准化实验考核是公正、客观考核学生学习效果、评价教学质量的重要手段。

参考文献:

[1]王跃,程曦,王频佳.临床检验微生物学课程体系改革的探索[J].现代预防医学,2011,38(1):73-74.

微生物培养基报告范文6

关键词:农村饮用水微生物污染

水是生命之源,是生活中不可或缺的东西,饮用水水质的好坏直接关系到人的身体健康,我省农村居民大多数直接饮用水源水,集中式供水率低,且对饮用水质量没有必要的检测手段,水质无法得到基本的保证。随着农村经济的不断发展和生活水平的提高,居民对身体健康的关注越来越多,对生活饮用水水质的卫生质量意识也在不断增强。为了改善本省农村居民直接饮用源水的现状,国家已基本完成了我省农村饮水工程的安全建设,为了了解本省农村饮水工程水质微生物的污染状况,对我省农村饮水工程水质进行微生物指标中细菌总数,总大肠菌群和耐热大肠菌群污染调查,为相关部门提供依据。

1、材料与方法

1.1内容 调查2010年海南省农村饮水工程水质微生物指标中细菌总数,总大肠菌群和耐热大肠菌群的污染状况。

1.2水样来源、试剂与仪器 在海南省范围内,对已进行供水的饮水工程进行采样,2009年至2010年共采水样259个。营养琼脂、乳糖蛋白胨培养液、伊红美蓝培养基、EC培养基、革兰氏染色液由广东环凯微生物科技有限公司提供。LRH-250生化培养箱、GHP―9050隔水式恒温培养箱、HH・B11(420)电热恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅等,在检定周期内使用。

1.3检验方法

1.3.1菌落总数:按GB/T5750.12-2006中1.1.5.1条,以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1ml充分混匀的水样注灭菌平皿中,做一平行接种,同时另用一个平皿作为空白对照,分别倾注15ml已融化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基,于36 ℃±1 ℃培养48h,进行菌落计数,按GB/T5750.12-2006表1规定的限值,超出标准为阳性结果。

1.3.2总大肠菌群:按GB/T5750.12-2006中2.1.5条,取10 mL水样5份分别接种到5份10 mL双料乳糖蛋白胨培养液中,将接种管置于36 ℃±1 ℃培养24h±2h观察结果,如所有乳糖蛋白胨培养管都不产气产酸则可报告为总大肠菌群阴性,如有产酸产气者,则继续往下鉴定。

从产酸产气的发酵管中取一环划线接种于伊红美蓝琼脂平板上,于36℃±1℃培养18h~24h,观察菌落形态,挑取特征菌落进行革兰氏染色、镜检。并将染色镜检为革兰氏阴性无芽孢的菌落同时接种乳糖蛋白胨培养液,于36 ℃±1 ℃培养24h±2h,有产酸产气者就证实有总大肠菌群存在。根据其阳性管数,查表2(MPN检索表),报告每100ml水样中总大肠菌群最可能的MPN值。

1.3.3耐热大肠菌群:按GB/T5750.12-2006中3.1.5条,自总大肠菌群乳糖发酵试验中的阳性管中取1滴转种于EC培养基中, 置44.5 ℃隔水式恒温培养箱内(水浴箱的水面应高于试管中培养基液面),陪养24 h±2h,如所有管均不产气则报告耐热大肠菌群阴性;如有产气者,划线接种伊红美兰平板,于44.5 ℃培养18h~24 h,查看菌落特征,有典型菌落者,即耐热大肠菌群阳性,根据阳性管数查表2(MPN检索表),报告每100 mL水样中耐热大肠菌群最可能数MPN值。

2、结果

本次调查是对已进行供水的饮水工程进行采样检测,共259份水样,结果见表

水样数(份) 细菌总数

合格数 合格率 总大肠菌群

合格数 合格率 耐热大肠菌群

合格数 合格率

259 231 89.2% 130 50.2% 147 56.8%

3、讨论

从本次调查的结果来看,我省农村饮水工程水质微生物污染状况比较严重,259份水样的检测中,细菌总数、总大肠菌群和耐热大肠菌群单项合格率分别为89.2%、50.2%和56.8%。

菌落总数是指在被检样品的单位质量(g)、容积(ml)或表面积(cm2)内,在一定条件下培养后所生成的好氧细菌菌落的总数。而饮用水中菌落总数的测定和计算是指在营养琼脂培养基上,1ml水样经36 ℃±1 ℃培养48h后所生出来的总菌数(包括腐生和致病细菌),可反映出饮用水被微生物污染的情况。菌落总数越多,说明饮用水被微生物污染的程度越严重,卫生状况差,检出病原菌的几率大,因而对人体健康的威胁就大,因此菌数的高低是评定饮用水卫生质量的重要指标;大肠菌群系指一群好氧及兼性厌氧,在36 ℃±1 ℃经24h±2h能发酵乳糖产酸、产气的革兰氏阴性无牙孢的小杆菌。它的检出标志着饮用水受粪便的近期和远期污染,是卫生质量评价的指标菌;耐热大肠菌群指的是具有某一些特性的一群细菌,与总大肠菌群相比,在人和动物粪便中所占的比例较大,而且由于在自然界容易死亡等原因,耐热大肠菌群的存在可认为饮用水直接或间接的受到了比较近期的粪便污染。因而耐热大肠菌群的检出,与大肠菌群相比,说明饮用水更为不清洁,肠道致病菌和中毒菌的可能性更大。故其更能贴切地反映饮用水受人和动物粪便污染的程度。

众所周知,水与人们的生活息息相关,饮用水水质的状况直接关系到人们的身体健康。饮用水不应含有病原菌,污染病原菌的水除可引起中毒外,还引起传染病的发生。有报道称[1]2003年山南地区扎囊县吉如乡小学饮用水受到微生物污染造成细菌性痢疾暴发流行。[2]1990 ~ 1994 年江苏省有75%伤寒暴发由水污染引起。钟学峰[3] 报道的伤寒水型暴发流行, 以及良[4] 报道的水型腹泻暴发流行就是因为饮用水水源分别受伤寒病人粪便和致病性大肠埃希菌污染所致。以上可知,饮用水受微生物污染后可能会造成严重后果,相关管理部门应引起足够的重视。

本次调查还发现,259份水样的检测中,余氯合格水样74份,合格率28.6%。通过询问和了解知道,多数饮水工程未进行有效消毒及净化处理措施。其原因主要有三种:第一、缺乏必要的卫生防护;第二、工程本身没有设计消毒设施;第三、工程设计了消毒设施,但没有进行安装;第四、工程设计并安装了消毒设施或消毒要求,但没有按要求使用;第五、农村的地理环境和生活环境使水体容易遭受人和动物粪便的污染,也同时给饮用水的消毒处理增加难度。再有供水工程缺乏专业知识和专业技能的管理人员、消毒物品难购买和工程建好后,未能及时进行相应的维护和管理也是造成微生物指标合格率低的重要原因。为确保本省农村饮水工程水质安全各级管理部门应严格对水源水的选址和管理,建立消毒物品购买的有效渠道。加强监督监测,做好水质监测和供水的卫生安全,加强水源水和管网末梢水的检查、日常维护和清洗消毒工作,确保农村居民饮水安全,保障农村居民的身体健康。

参考文献:

[1]赵瑜.农村生活饮用水微生物污染状况调查分析《科技》2009年10期

[2]周伟忠,倪大新,李孝风,等.江苏省1990-1994年伤寒流行病学分析[J].江苏预防医学,1995,6(4):13-14.