典型病例分析范文1
【关键词】 非典型；川崎病；冠状动脉病变；诊断
川崎病（KD）近年来发病率逐渐增高，是儿童时期主要累及小型动脉的急性全身性非特异性血管炎，其中以累及冠状动脉最为重要，其继发的冠状动脉病变如冠状动脉瘤、冠状动脉狭窄等可引起冠状动脉瘤破裂、心肌梗死等严重的并发症，是决定病情严重程度及预后的主要因素，其防治的关键在于及时诊断和采取有效的治疗措施。KD的诊断主要依据是其临床特征性表现即持续发热5 d以上、多形性皮疹、球结膜充血、口唇充血皲裂、口腔黏膜弥漫充血、杨梅舌及手足硬肿等，结合化验检查血沉增快、血小板进行性上升以及超声心动图示冠状动脉病变等。但非典型KD因其症状表现不典型易导致误诊，且因其冠状动脉受累的发生率高而危及患儿的生活质量，故近年来受到临床重视。由于其临床症状、体征的不典型，早期诊断具有一定困难，故我们对近9年来收治的非典型KD病例的临床资料进行回顾性分析，与典型KD比较，以期早期诊断、及时治疗、防止和减轻冠脉病变程度而改善预后。
1 资料与方法
1.1 诊断标准
（1)典型KD的诊断标准通常采用第三届国际KD会议修订的KD诊断标准进行诊断，即凡具备以下6个症状中5个以上者（其中发热为必备条件）可以作出诊断：①对抗生素无效的、持续5 d以上的发热；②眼球结膜充血；③口腔黏膜改变；④肢端改变；⑤多形性皮疹；⑥淋巴结肿大。（2)非典型KD诊断为发热持续5 d以上，具备2～6项中不足4项者。
1.2 临床资料
所选病例为我院2000年1月至2009年2月间收治的KD患者。其中典型KD 60例，男38例，女22例，男∶女＝1.73∶1。非典型KD 37例，男22例，女15例，男∶女＝1.47∶1。发病年龄：非典型KD组～6月7例，～1岁22例，～3岁4例，～5岁3例，＞5岁1例，平均22个月。典型KD组～6月5例，～1岁18例，～3岁30例，～5岁5例，＞5岁2例，平均26个月。
1.3 两组患儿临床表现
所有患儿均有持续5 d以上的发热，其他病状、体征出现的比例典型KD组均高于非典型KD组，差异有统计学意义（P＜0.05)，两组临床表现比较见表1。而非典型KD组20例患儿出现肛周充血脱屑症状，16例出现卡斑（卡介苗接种处红斑)，其他非特征性表现有咽痛、咳嗽3例，呕吐、腹泻、腹痛10例，四肢关节痛5例，易激惹惊厥2例。表1 非典型KD患儿与典型KD患儿临床表现比较（略）
1.4 研究方法
分别统计非典型KD和典型KD两组患儿性别、年龄、主要临床表现、实验室指标、超声检查结果、诊疗效果及预后等，使用SPSS13.0统计软件对数据进行统计学分析。
2 结果
2.1 性别、年龄
两组患儿性别差异无统计学意义（χ2＝0.29，P＞0.05）；两组平均年龄差异无统计学意义（χ2＝0.78，P＞0.05）；但非典型KD组1岁以内患儿比例与典型组差异有统计学意义（χ2＝6.88，P＜0.01)。
2.2 实验室检查
两组外周白细胞计数、血小板、C－反应蛋白、血沉等指标差异无统计学意义，详见表2。表2 两组KD患儿实验室资料比较（略）
2.3 心脏彩超检查
凡超声心动图显示有冠状动脉管壁增厚、回声增强、内膜回声不均匀、冠状动脉扩张超过同年龄组标准或冠脉瘤形成者视为有冠状动脉病变（CAL），结果显示：非典型KD组患儿检出CAL 19例占51.3 %，典型KD组检出CAL 20例占33.3 %。两组CAL发生率比较，差异有统计学意义（χ2＝4.65，P＜0.05）。
2.4 治疗结果与预后
两组病例急性期均应用阿斯匹林每天30～50 mg/kg，至热退3 d后减至每天5 mg/kg维持治疗6～8周，若有CAL者用药至冠脉病变消失。非典型KD组34例给予大剂量静脉丙种球蛋白（IVIG）每天1 g/kg，连用2 d；2例每天仅用400 mg/kg，连用5 d；1例未用。典型KD组全部给予大剂量静脉丙种球蛋白每天1 g/kg，连用2 d。首次使用IVIG时机：非典型KD组为发病后平均7.45 d，KD组为6.88 d，且非典型KD组中5例、典型组中4例为IVIG无反应型KD，均3 d后重复使用原剂量IVIG，其中1例共重复使用3次方可退热，非典型KD组出现无反应型KD比例与典型组差异无统计学意义（χ2＝1.18，P＞0.05）；但是非典型KD组中未用IVIG者出现Ⅳ房室传导阻滞使用甲强龙每天20 mg/kg冲击治疗3 d后症状缓解，但出院后随访超声检查仍有冠状局限性扩张后转北京儿童医院治疗。全部患儿治疗后无1例死亡。
3 讨论
川崎病即皮肤黏膜淋巴结综合征，近年来发病率逐渐增高，已取代风湿热成为小儿后天性心脏病的主要原因之一。川崎病是一种原因不明的免疫系统过度活化所致的全身性血管炎，也是儿童时期主要累及小型动脉的急性全身性非特异性血管炎[1]，其中以累及冠状动脉最为重要，其继发的冠状动脉病变如冠状动脉瘤、冠状动脉狭窄等可引起冠状动脉瘤破裂、心肌梗死等严重的并发症，是决定病情严重程度及预后的主要因素，且与青年时期的冠心病动脉硬化、心肌纤维化有相关性而日益受到重视[2]。近年来非典型川崎病的报道日益增多，由于其临床症状的不典型更易误诊漏诊，延误治疗。深入研究其临床特点是及时诊断和采取有效治疗措施的关键[3]。
川崎病主要累及5岁以下儿童，但好发于6～18月婴儿[4]。在本研究中，非典型川崎病与典型川崎病组5岁内患儿比例分别为89.2 %和90.4 %，两组差异无统计学意义，但1岁以内患儿比例非典型川崎病组高于典型川崎病组，差异有统计学意义，提示非典型川崎病更易发生在小年龄婴幼儿。临床症状中，两组所有患儿均有5 d以上不同程度发热，非典型川崎病组患儿眼结膜充血、口腔黏膜充血、口唇皲裂及杨梅舌、手足硬肿、亚急性期甲周脱皮、多形性皮疹、颈部淋巴结肿大等症状发生率均低于典型川崎病组，差异有统计学意义。因此对临床发热5 d以上的小儿出现川崎病诊断指标中的一个或几个症状时既要考虑到川崎病存在的可能，并及早对冠状动脉进行超声检查，及时确诊治疗，避免冠脉损害加重。除临床诊断指标中的症状、体征外，在非典型KD早期，有 48.6 %的患儿出现肛周皮肤充血、脱屑， 43.2 %的患儿在原卡介苗接种瘢痕处出现红斑，属非特异性的表现，发生率也较高。此外，部分患儿还出现咽痛、咳嗽、呕吐、腹痛、腹泻、四肢关节痛及婴幼儿的激惹、惊厥等，故在临床上应注意到川崎病的多系统受累和症状、体征的多样性，并与有类似表现的猩红热、麻疹等出疹性传染病、EB病毒感染、小儿类风湿关节炎、呼吸道和消化道感染、神经系统疾病等相鉴别[5]。
在川崎病病程中，实验室指标如白细胞计数、C-反应蛋白、血小板、血沉等常有异常改变，本研究发现：非典型KD虽然临床主要指标达不到诊断标准，但其实验室指标改变与典型KD相比基本相同，差异无统计学意义，与国内报道一致[5]。所以在不完全具备主要临床指标的情况下实验室指标异常有诊断价值。目前国内学者多认为，全身炎症指标C-反应蛋白＞30 mg/L及血沉＞40 mm/h结合临床指标支持川崎病诊断，但是上述实验室指标亦缺乏特异性[5]。
虽然非典型KD临床症状、体征较典型KD少，但其冠状动脉病变发生率并不低。在本研究中非典型KD组患儿经二维超声检查检出累及冠脉者为51.3 %，高于典型川崎病组冠脉病变33.1 %的发生率，差异有统计学意义，提示非典型KD患儿更容易并发冠状动脉病变，与文献报道一致［6］。因此对临床疑似KD的患儿应及时进行超声检查发现冠脉病变以期早期明确KD的诊断，并给予相应治疗以阻断冠脉病变继续加重。KD的基本病理变化是抗原介导的免疫功能紊乱，阿司匹林给药基础上应用大剂量IVIG可以阻断免疫异常激活，降低细胞因子水平，减轻冠脉损伤[7]。研究表明冠脉病变发生高峰期在发病后12 d左右，应用大剂量IVIG可有效降低冠脉病变的发生率和程度。对于一部分首次应用丙球蛋白无反应型KD多主张重复使用IVIG，2次大剂量IVIG治疗仍无效者可考虑选用糖皮质激素治疗[8]。本研究中KD患儿均在发病10 d内应用IVIG，随访冠脉病变程度及预后较为理想。因此，加强对非典型KD的重视，以期及时诊断，及时应用IVIG治疗，从而减轻冠脉病变，对改善预后具重要意义[9]。
参考文献
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典型病例分析范文2
【关键词】肠套叠;烧伤;病例分析
doi:10.3969/j.issn.1006-1959.2010.08.099文章编号:1006-1959(2010)-08-2078-02
小儿肠套叠和烧伤一直是儿科临床医学的常见病例。肠套叠指一段肠管套入邻近肠管,是婴幼儿肠梗阻最常见的原因。本文首先针对肠套叠不同病例的治疗情况,现对手法复位的方法、作用及注意事项加以探讨;然后又以小儿烧伤的常见病例为例,进行病例的分析和探讨。
1.小儿肠套叠病例分析与探讨
1.1临床资料:本组收集了2001年5月至2006年4月两院采用空气灌肠手法辅助复位9例,男6例,女3例,年龄5个月～6.7岁。临床表现:起病急,均有阵发性哭闹、腹痛、呕吐。4例有血便,3例有低烧,2例有上呼吸道感染症状。发病4h～31h到放射科就诊,手法辅助复位前均采用过单纯空气灌肠复位。套叠类型:回结型6例,回回型2例,回回结复套型1例。
1.2适应证的选择与治疗方法:术前6542肌肉注射,5mg/次～10mg/次,及10%水合氯醛5ml直肠内灌注。由插入Foley氏管,在透视下注气,气压为10kPa～15kPa。当空气灌肠整复套头受阻于回盲瓣区时,在保持气压的情况下,实施手法辅助复位。首先用左手放于套头上方腹壁轻柔地朝外下(逆时针方向)按摩3min～5min,再以一手深压套头内侧固定套头,另一支手沿套头退缩方向缓缓的用力推动。如不成功,且患儿一般情况良好,可用双手十指分开按压全腹部,朝套头退缩方向持续缓和用力,持续3min～5min。以上两种方法可间隙使用,但要防止长时间的整复损伤套头及过量的放射损伤。
1.3结果:6例回结型及1例回回型肠套叠套入头在退缩至回盲瓣区时较长时间停留,采用手法局部按摩推压,4例在15min成功,1例效果欠佳改用全腹十指按压2次后套入头顺利通过回盲瓣,成功复位。1例术后肠粘连复位成功3d后复发肠套叠,再次手法复位成功。1例回回结复套型经过20min的努力,出现“回缩征”,改用手术治疗,并证实术前诊断。对复位成功的病例留观24h及随访,未见有不良反应及并发症。
2.小儿烧伤病例分析与探讨
小儿烧伤是儿科临床医学常见病例之一,下面对其临床治疗作简单介绍。
2.1治疗方法:
2.1.1干疗组。本组病例多数创面选择头面部、颈部、躯体部、手足及会。患儿入院常规清洗创面,创面处理后应用1%SDAG外涂,同时应用红外线烤灯治疗。在渗出期创面不能及时干燥结痂,每天外涂1%SDAG数次,一般1d～3d创面全部干燥结痂,直至创面在痂下愈合,痂皮自然脱落。
2.1.2湿疗组。本组病例多数选择四肢、躯体部位创面。患儿入院常规清洗创面,创面处理后应用湿润烧伤膏,每天创面涂药4次～6次,等渗出期过后每天创面涂药1次。直至创面愈合为止。
2.2典型病例:病例1:患儿A,女性,10个月,被开水烫伤背部及双下肢1h入院。入院时烧伤部位呈现大水泡型,总面积10%,均为浅Ⅱ度创面,体温37℃,脉搏140次/min,血压未测。入院常规清洗创面,去掉泡皮,创面处理后应用湿润烧伤膏揉于单层纱布上贴于创面,外层应用数层纱布包扎。用时应用抗生素预防感染,补液,补血浆。经以上处理30min后患儿安静下来。前3天每天换药3次,后3天每天换药1次,第7天创面全部愈合并出院。
2.3结果:本组26例患儿均全部治愈。应用干燥疗法治疗小儿烧伤最早13d,而应用湿润疗法治疗小儿烧伤最早7d。烧伤创面用药是治疗烧伤关键性措施之一。本组病例明显看出应用烧伤湿润膏对小儿烧伤治疗疗效最佳,在治疗时间上明显缩短,本组病例显示,应用湿润疗法治疗烧伤15d内85%的患儿愈合,而应用干燥疗法15d内只有30%的患儿愈合。
2.4讨论:
2.4.1烧伤后早期成为全病程中突出的易感期。休克后暴发的败血症,在我国救治大面积烧伤的历史中曾有深刻的记录。对小儿来说本组病例11%也是大面积烧伤,但由于处理好,治疗方法适当,无一例感染败血症。
2.4.2疼痛明显减轻。在应用湿润烧伤膏后患儿很快安静下来,说明患儿疼痛减轻,在治疗上及液体输入得到了保证。而应用干燥疗法后患儿仍然哭闹不安,只好用镇静药来保持患儿安静,然而镇静药也不能长期应用,从而给治疗上带来一定困难。
2.4.3渗出明显减少,机体内环境稳定,为休克期治疗提供了方便。休克期渡过平稳,患儿好管理,给创面愈合和创面不再加深打下良好基础,从而使患儿治疗疗程明显缩短。本组病例显示应用湿润疗法在3d内渗出期明显停止,而应用干燥疗法第6天仍有渗出,从而使干燥疗法推迟了愈合时间。
2.4.4用药方便,不受条件限制,患儿好管理,有一定的活动度。本组病例显示应用湿润疗法后,患儿不受限制,能卧床,能抱起,患儿身心愉快,而应用干燥疗法后患儿要受一定的限制,在管理上诸多不方便,故笔者认为在广大的农村地区对小儿烧伤应用湿润疗法更为好一些。
参考文献
典型病例分析范文3
doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2013.07.102文章编号：1004-7484（2013）-07-3597-01
典型心肌梗死根据临床表现、心肌坏死标记物、心电图改变易于诊断，而对于无典型胸痛发作、疼痛性质及部位不典型、临床表现非特异，主要表现为反酸、恶性、胸骨后烧灼感或腹痛则需详细询问病史、密切注意病情变化，在短期内反复进行心电图观察和血清心肌坏死标记物或心肌酶的测定才能最终做出正确诊断、进行有效治疗，现将我院2010年元月――2013年元月，以消化系疾病为主要表现收住本科，经确诊为急性心肌梗死的16例患者的临床资料进行综合对比分析，介绍如下：
1临床资料
本组男13例，女3例，年龄49-82岁，临床表现缺乏特异性、胸骨后疼痛不明显。其中疼痛位于上腹部9例，颈部1例，颈部及食管3例，食管胃3例，多数患者因恶性、呕吐、腹痛或夜间发作性反酸表现而入院，3例因上消化道出血，2例因黑便及休克入院，治疗经过：经全面体检、详细询问病史，多次反复复查心电图及心肌坏死标记物而确诊，经转科或在本科治疗好转出院。
2分析
2.1急性心肌梗死出现消化系症状的原因引起消化系症状的原因为心脏感觉纤维进入脊髓后根与食管胃脏器的感觉纤维共同聚合于同一脊髓神经元，经同一途径上传，因而心脏感觉冲动传入丘脑和大脑皮质后产生腹痛的感觉；迷走神经的传入感受器几乎都位于心脏后下壁表面，当心肌缺血缺氧时刺激迷走神经，产生腹痛，患者表现为突发上腹痛、多数伴恶心、呕吐，易误诊为急性胃肠炎，有的伴反射性腹肌痉挛，出现局部压痛，因而常被误诊为急性胰腺炎、胆囊炎、胃痉挛等，有的因心排出量降低，组织灌注不足，休克等所致胃肠供血不足及老年人胃肠功能减退，出现肠麻痹误诊为肠梗阻，少数因应激性溃疡误诊为上消化道出血。
2.2反流性食管炎易误诊为心绞痛的原因反流性食管炎典型症状为反酸、胸骨后烧灼感，由于解剖位置与心脏相毗邻，极易误诊为心绞痛[1]、非典型心肌梗死，部分病人需做心脏动脉造影才能鉴别。
2.3对策凡收住本科病人，均应详细询问病史，常规心电图，短期多次心电图检查，对上腹痛患者经解痉、止痛症状加重者要动态观察患者的心电图及心肌坏死标记物的变化，对持续腹痛止痛不缓解者，可预防性含硝酸甘油及镇静剂，可减轻患者对疼痛引起的精神过度紧张和降低迷走神经的张力。对抑酸无效夜间发作性出现反酸、胸闷、憋气者要考虑到本病的可能，对老年人突发休克、严重心律失常、心力衰竭、上腹胀痛或呕吐等表现而原因不明者要首先考虑急性心肌梗死、排除此诊断后再做消化系诊断，或考虑有合并症发生，对于年老患者有较重而持久的反酸、胸骨后烧灼感、胸闷，即使心电图无特征性改变，亦应考虑急性心肌梗死，或考虑急性心肌梗死合并有消化系的疾病，具体措施为反复复查心电图、动态观察病情及心电图变化，动态观察心肌坏死标记物变化，可大大提高本病及合并本病的诊断率。
2.4常见急性心肌梗死不典型表现包括上腹痛、上臂痛、下颌、颈部痛、食管反流性吐酸发作，发病早期常有恶心、呕吐、上腹胀痛等，肠胀气也常见，重症者可发生呃逆，少数患者在整个病程中都无疼痛或其他症状，笔者曾见1例患者，仅表现为夜间反复发作性流涎、吐酸，经查心电图及心肌酶才得以确诊。
2.5共存的特征临床上两系统疾病共存的现象也有很多，有的各具特征，易于诊断，有的模糊不清，需仔细鉴别。反流性食管炎典型症状为反酸、胸骨后烧灼感，由于解剖位置与心脏相毗邻，极易误诊为心绞痛[1]、非典型心肌梗死，部分病人需做心脏动脉造影才能鉴别。对于患有急性心肌梗死的老年病人，合并有消化系疾病的情况也有很多，即便原没有消化系病变，由于急性心肌梗死可产生应激性溃疡，也会相应出现消化系症状。应兼顾考虑，综合治疗。
典型病例分析范文4
1 引 言
氨基酸是生命的基石，是人体基本营养物质，也是蛋白质的组成单位。自然界中已发现的氨基酸有180多种，人体内重要的氨基酸有40多种，包含10种必需氨基酸、20多种蛋白氨基酸和一些有重要生理意义的氨基酸，统称为“全谱氨基酸”（见表1）。全谱氨基酸的失衡是众多疾病的诱因或表现形式，涉及代谢、肿瘤、免疫、病毒感染、心脑血管、神经系统、肾病、糖尿病、亚健康、老年病等各类疾病和儿童生长发育、营养健康、肌肉骨骼生长、激素分泌、解毒功能等人体各种健康环节。因此，检测全谱氨基酸对于人体健康和疾病的诊断筛查及研究等具有重要意义\[1\]。
目前，氨基酸检测技术繁多，1958年Spackman等首先提出了用阳离子交换色谱与柱后茚三酮衍生结合的方法分析蛋白质中的氨基酸，实现了氨基酸分析的自动化。其后，新的氨基酸分析方法不断涌现，柱前衍生反相高效液相色谱法、高效阴离子交换色谱积分脉冲安培检测法、毛细管电泳法、质谱法等相继应用于氨基酸分析\[2～10\]。
采用液相色谱串联质谱法（LCMS/MS）测定体内化合物，具有选择性好、灵敏度高、分析时间短等优点，已普遍应用于生物体内研究。稳定同位素标记相对和绝对定量（iTRAQ）技术是近年来最新开发的一种新的蛋白质组学定量研究技术，具有较好的定量效果、较高的重复性，并可对多达4种不同蛋白质样本同时进行定量分析，iTRAQ已成功应用于小分子氨基酸LCMS/MS和GCMS的定量检测\[11～13\]。本实验室在文献基础上探索全谱氨基酸iTRAQ试剂稳定同位素标记的准确定量方法，精确度和重复性都有很好的保证，与传统的毛细管电泳法、HPLC法、氨基酸分析仪比较，无论是精度、还是检测的范围和检测结果的准确度都有很大的提高和改善。2 实验部分
2.1 仪器与试药
3200QTRAP型液相色谱串联质谱仪（美国Applied Biosystem公司），配有电喷雾离子化源（ESI）以及Analyst 1.4.2 数据处理软件；UltiMate3000标准型液相色谱仪（美国戴安公司），包括双三元梯度泵，自动进样器，柱温箱，切换阀；氮吹浓缩仪（日本东京理化器械株式会社）。
iTRAQTM试剂盒（200人份），批号：0709002（美国Applied Biosystem公司），包括：400
SymbolmA@ mol/L正异亮氨酸的10%磺基水杨酸溶液、标记缓冲液（0.45 mol/L硼酸盐缓冲液，pH 8.5, 含有20
SymbolmA@ mol/L正缬氨酸）、115iTRAQ衍生化试剂（15人份/瓶，每瓶用70
SymbolmA@ L异丙醇稀释后使用）、1.2% 羟胺水溶液、iTRAQ114同位素标记的44种氨基酸内标（用0.5%甲酸标准稀释液溶解后使用），氨基酸信息见表1。
分 析 化 学第40卷
第5期飞等： 稳定同位素iTRAQ标记/高效液相色谱串联质谱法同时定量分析人体中42种氨基酸及典型病例
注：m/z 114.11为同位素内标iTRAQ114衍生化后子离子，m/z 115.11为生物样本中氨基酸iTRAQ115衍生化后子离子。
（m/z 114.11: ionpairs of iTRAQ reagent 114labeled amino acid isotope internal standard; m/z 115.11: ionpairs of iTRAQ reagent 115labeled amino acid in biological samples）.[BG）W][HT][]
2.2 溶液的配制
稀释的iTRAQ115衍生化试剂：将每瓶所需的115iTRAQ试剂放至室温，涡流并旋转离心，使溶液滑至底部，加入70
SymbolmA@ L异丙醇，涡流混匀并旋转离心，在瓶上记录当前时间，稀释的iTRAQ试剂冷藏保存，有效期1个月。
iTRAQ114同位素标记的44种氨基酸内标液：加入要求体积的0.5%甲酸水标准稀释液，涡流混匀1 min，旋转离心，iTRAQ试剂114标记氨基酸的最终浓度均为5
SymbolmA@ mol/L。
[FQ（122\.22,Y－WZ][HT5”SS][*4]表2 梯度洗脱条件
Table 2 Conditions of gradient elution
[HT6SS][BG（][BHDFG4,WK6\.2，WK8。2W]时间
Time
（min）流速
Flow rate
（
SymbolmA@ L/min）
流动相Ⅰ
Mobile phase Ⅰ
（%）
流动相Ⅱ
Mobile phaseⅡ
（%）
0.0085098210.00850722810.10850010016.00850010016.1085098225.00850982[BHDFG5*2,WKZQ0W] 流动相（Mobile phase） Ⅰ：水（0.01%七氟丁酸和0.1%甲酸）（0.01% Heptafluorobutyric acid and 0.1% formic acid in water）；流动相（Mobile phase）Ⅱ：乙腈（0.01%七氟丁酸和0.1%甲酸）（0.01% Heptafluorobutyric acid and 0.1% formic acid in acetonitrile）。[BG）W][HT][]
2.3 色谱条件
色谱柱：AAAC18柱（150 mm×4.6 mm I.D.，5
SymbolmA@ m，AB SCIEX公司）；流动相：水（含有0.01%七氟丁酸、0.1%甲酸）乙腈（含有0.01%七氟丁酸、0.1%甲酸）, 梯度洗脱条件见表2；柱温：50 ℃；进样量：2
SymbolmA@ L。
2.4 质谱条件
离子源：离子喷雾离子化源正离子化模式；离子喷射电压：3000 V；离子源温度：580
SymbolpB@ C；源内气体1（GS1，N2）压力：345 kPa；气体2（GS2，N2）压力：414 kPa；气帘气体（N2）压力：138 kPa；扫描方式为多重反应监测（MRM）；碰撞气（N2）压力：Medium；解簇电压（DP）为：35 V；碰撞能量（CE）为：30 eV；全谱氨基酸用于定量分析的离子对见表1。
2.5 生物样品处理
移取40
SymbolmA@ L样品（血浆/尿液/脑脊液）置于1.5 mL EP管中，加入10
SymbolmA@ L 10%磺基水杨酸（含有400
SymbolmA@ mol/L正异亮氨酸），漩涡混匀30 s，10000 r/min离心2 min沉淀蛋白。移取10
SymbolmA@ L上层液体置另一个1.5 mL EP管中，加入40
SymbolmA@ L标记缓冲液（含有20
SymbolmA@ mol/L正缬氨酸），漩涡混匀，瞬时离心。移取10
SymbolmA@ L上层液体置于另一个1.5 mL EP管中，加入5
SymbolmA@ L稀释的iTRAQ115衍生化试剂，漩涡混匀，瞬时离心，室温下孵化至少30 min。加入5
SymbolmA@ L 1.2%羟胺，漩涡混匀，瞬时离心，终止衍生化反应。样品在氮吹仪上45
SymbolpB@ C氮气吹干。加入32
SymbolmA@ L含iTRAQ114同位素标记的内标液，漩涡混匀，旋转离心。进样2
SymbolmA@ L进行LCMS/MS分析。
2.6 定量分析及数据处理
样本处理后经LCMS/MS平台上特定的采集方法运行，得到总离子流图（图1），提取44种氨基酸对应的iTRAQ115和iTRAQ114的MRM离子流图， 进行积分处理。每2
SymbolmA@ L进样中，含有10 pmol从内标溶液中带入的每种iTRAQ114试剂标记的氨基酸，根据特定的校正系数计算样[TS（][HT5”SS] 图1 全谱氨基酸总离子流图
Fig．1 TIC of full spectrum of amino acid[HT][TS）]本中氨基酸含量。正异亮氨酸和正缬氨酸属于非人体内氨基酸，样品测试中同时含有10 pmol正异亮氨酸和正缬氨酸。正异亮氨酸在样品预处理步骤引入，用于检验经过沉淀后氨基酸的回收率，通过正异亮氨酸回收率校准每种氨基酸的测定结果。正缬氨酸在标记步骤引入，用于检验标记反应的效率，反应效率在80%～120%为合格，超过此范围则此例分析数据作废。
3 结果与讨论
3.1 全谱氨基酸高通量检测的基本情况
样本采集前禁食12 h，采血时注意空腹，不能饮用饮料或服用药品。血样采集使用肝素抗凝管，采集全血样本大于0.5 mL，采血后立即颠倒混匀5～6次，于30 min以内离心分离血浆，
Symbolm@@ 20
SymbolpB@ C冰冻保存待测。同时填写调查问卷，主要包括基本资料（姓名、性别、年龄、籍贯、民族、职业等）、健康状况（作息、吸烟、饮酒、睡眠、运动、压力、近期饮食、营养补充等）、疾病状况（现病史（接触史）、既往史、家族史、初步诊断、用药/保健品情况）等。
3.2 典型病例
3.2.1 病例1含硫氨基酸代谢通路异常所致的视力下降 患者，男，66岁，既往高血压史，突发视力下降，左眼0.1，怀疑遗传型鸟氨酸血症所致。经全谱氨基酸质谱检测与分析，蛋氨酸、谷氨酰胺偏高，苏氨酸、胱硫醚、同型半胱氨酸偏低。综合分析：蛋氨酸升高，其它含硫氨基酸降低，怀疑含硫氨基酸代谢通路异常，否定遗传型鸟氨酸血症所致。可能是蛋氨酸酸腺苷转移酶（MAT） 和/或胱硫醚合成酶有异常，从而导致蛋氨酸和同型半胱氨酸结缔组织堆积，致晶体异位（Ectopia lentis）或半脱位（Subluxation）。属遗传性疾病。建议：用高剂量Vb6 100～1200 mg/d，同时补充叶酸。若还未控制，应进一步限制蛋氨酸摄入（肉类含较多蛋氨酸），补充胱氨酸、甜菜碱和叶酸。
3.2.2 病例2 急性四氯乙烯中毒及其所致氨基酸代谢紊乱 患者，女，46岁，因职业经常接触洗衣液（主要成分为四氯乙烯），且房间属新装修，未充分通风散味。就诊后查心电图、TCD（经颅多普勒超声）、血常规、肝肾功、雌激素、甲状腺功能及毒物检测，均未发现明确异常。全谱氨基酸检测结果显示,鸟氨酸、天门冬氨酸、甲硫氨酸和3甲基组氨酸含量分别偏高56.1%, 98.5%, 80.3%和75.5%。根据患者接触四氯乙烯职业史以及神经系统、呼吸系统为主的临床表现，结合全谱氨基酸检测结果，排除其它疾病，诊断为急性四氯乙烯中毒及其所致氨基酸代谢紊乱。患者经吸氧、服用乳果糖口服液、绿豆解毒后症状消失，目前状态平稳。
3.2.3 病例3 色氨酸缺乏导致强迫症 患者， 女， 21岁，3年前曾突发精神类疾病，多方诊断为精神病并采用药物治疗，未有明显进展。全谱氨基酸检测结果表明，组氨酸、亮氨酸、色氨酸、缬氨酸、天门冬酰胺及胱氨酸多个氨基酸偏低；氨基酸代谢组学分析认为， 精神状态及神经系统异常，如抑郁、失眠、精神分裂等； 另外，肌肉和骨骼肌生长代谢、骨骼重吸收、肌肉损伤、剧烈运动等均有异常。色氨酸是5羟色胺前体，色氨酸缺乏导致的神经元外周组织的5羟色胺降低，5羟色胺有中和肾上腺素与去甲肾上腺素的作用，并可改善睡眠的持续时间。初步诊断为色氨酸缺乏导致强迫症。分析认为天门冬氨酸和谷氨酰胺偏高是由于补充色氨酸代谢通路影响所至，色氨酸总体浓度偏大。患者降低色氨酸剂量为原剂量2/3后，症状控制良好，并无其它明显不适。
3.3 LCMS/MS全谱氨基酸高通量检测方法讨论
氨基酸和氨基酸衍生物分子量均较小，宜选用较小的离子喷射电压，本实验的流速为850
SymbolmA@ L/min，离子喷射电压不宜太低，离子喷射电压在1500～5500 V信号均较高且变化不大。因此，设定离子喷射电压为3000 V。离子源温度650 ℃离子化温度过高，易造成离子化过程中部分中性基质碳化或焦化，污染离子源，实验中液相流速为850
SymbolmA@ L/min，过低的离子化温度易造成离子化程度不充分，从而影响氨基酸检测响应值和定量结果。经优化，离子源温度设置580 ℃后，离子化效果影响较小且不易焦化。
使用含有0.01%七氟丁酸和0.1%甲酸的乙腈和水为流动相，在本实验梯度条件下，采用高保留色谱柱进行分离，在15 min可以同时检测88种离子对，涉及44种氨基酸及对应的同位素内标、同分异构体（肌氨酸、丙氨酸、β丙氨酸，γ氨基丁酸、β氨基异丁酸、α氨基正丁酸，缬氨酸、正缬氨酸，亮氨酸、异亮氨酸、正异亮氨酸，1甲组氨酸、3甲组氨酸等）均能够基线分离，见图2。极少量七氟丁酸可以促进氨基酸在色谱柱上的保留，当七氟丁酸含量升高时反而会抑制质谱信号，三氟乙酸促保留能力不及七氟丁酸， 且离子化抑制高于七氟丁酸，加入甲酸可以提供质子，增强正离子化信号，并提高氨基酸色谱峰信噪比。
[TS（][HT5”SS]图2 氨基酸同分异构体基线分离
Fig．2 Chromatographic baseline separation of isomeride amino acids[HT][TS）]
iTRAQ试剂标记的过程比较复杂，若样本批量较大时，可以采用96孔板处理，提高工作效率。运用iTRAQ试剂标记氨基酸可以将氨基酸碎片离子从低分辨率的背景中脱离出来，提高检测的灵敏度。每个氨基酸都有自己的独立同位素内标，色谱行为、质谱的离子化效率和基质效应均能完全一致，可以通过质谱准确定量，灵敏度（pmol级）和精确性均较高，线性范围宽不受柱效降低影响检测结果。
由于氨基酸检测受影响因素较多，生理样品采集一定要保证采集前禁食12 h，采血时注意空腹，不应服用饮料、药品。本研究结果表明，全血中氨基酸浓度明显高于血浆氨基酸浓度，全血中由于活细胞的存在，放置过程对氨基酸有所消耗，且复杂基质不利于检测，因此，选择血浆进行体内氨基酸浓度测定，且应于采样后快速分离血浆（30 min内）。尿液和脑脊液采集后需高速离心后进行样品前处理。
本方法结合氨基酸代谢组学研究已成功用运于临床诊疗和营养评估。检测的氨基酸涉及尿素循环、鸟氨酸循环、神经内分泌代谢、氨能量代谢、硫代谢、运动代谢组学等多个代谢组学系统，可为氨基酸代谢组学分析研究提供技术支持和参考。
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Simultaneous Determination of 42 Amino Acids in Human Body by
Stable Isotope Isobaric Tage for Relative and Absolute
Quantitation LabeledLCMS/MS with Typical Example Cases
LI PengFei1, WANG Yan1, TAO BeiBei2, WANG Jing1,
LUO Jing1, ZHANG XuDe2, AN ZhuoLing1, LIU LiHong*1
1（Pharmacy Department of the Second Artillery General Hospital, Beijing 100088, China）
2（Beijing Amino Medical Research CO., LTD, Beijing 100088, China）
Abstract To develop a LCMS/MS method for the simultaneous determination of 42 amino acids in human body by stable isotope isobaric tage for relative and absolute quantitation （iTRAQ） labeled. After preciptitated by sulfosalicylic acid and labeled by iTRAQ reagent 115, the biological samples were added iTRAQ reagent 114labeled amino acid as isotope internal standard, and separated on an AAAC18 column using water and acetonitrile （both containning 0.01% heptafluorobutyric acid and 0.1% formic acid） as mobile phase by gradient elution. Detection was carried out by multiple reaction monitoring （MRM） on a 3200QTRAP LCMS/MS system. Quantitation was completed by isotope internal standard which also could remove the systematic error. 42 amino acids and isomers were chromatographic baseline separated. The assay was successful applied to clinical diagnose and treat. The method is a rapid, sensitive, selective and highflux for the determination of amino acids metabolism disease and nutritional evaluation.
Keywords Liquid chromatographytandem mass spectrometry; Full spectrum of amino acid; Highflux quantitating; Isobaric tage for relative and absolute quantitation
（Received 16 August 2011; accepted 27 October 2011）
庆祝《分析试验室》创刊30周年暨分析测试技术学术交流会
为庆祝《分析试验室》创刊30周年，回报长期以来关心、支持《分析试验室》杂志的广大分析测试工作者，发挥《分析试验室》期刊作为专业媒体的作用，拓宽和强化学术交流平台，促进分析测试工作的交流与发展，北京有色金属研究总院、中国分析测试协会联合《分析试验室》期刊，定于2012年联合举办“分析测试技术学术交流会”。
会议时间：2012年10月
会议地点：北京
会议将邀请专家针对分析测试技术在矿物、新型材料、环境保护、食品与药物、生物分析等领域的应用及最新进展作大会专题报告，并以"《分析试验室》创刊30周年纪念专辑"的形式隆重出版大会论文集。现开始向全国各行业分析测试专业人士征稿，并欢迎各界人士前往参加会议进行交流。
典型病例分析范文5
【关键词】 非典型川崎病；冠状动脉；临床特征
作者单位：465200 河南省固始县人民医院儿科 KD目前是一种病因尚不清楚的疾病，是以全身血管出现变态性发炎为主要病症的小儿急性的发热性疾病，主要是根据临床的病症作为诊断的依据。如果治疗不及时则可能出现冠状动脉受损等并发症。目前临床上对KD还缺乏确诊性的检查方法，因此，对于一些临床上表现非典型的KD病例则很容易出现误诊或漏诊，从而延误对非典型KD患儿的治疗［1］。本组实验于2008年1月至2012年1月进行就诊的30例非典型KD患儿以及45例典型的KD患儿的临床资料进行总结和分析，为临床上诊治病症较隐匿的KD患儿提供依据，现对分析结果作如下的分析。
1 资料与方法
11 一般资料 选取2008年1月至2012年1月收治的30例非典型KD，以及45例典型KD患儿作为研究的对象，75例患儿的临床症状均符合第三届国际KD会议上修订的川崎病诊断标准。在非KD组中男患儿20例，女患儿10例，患者年龄在4个月至5岁，其中患儿年龄在4个月至1岁的有24例。在典型KD组中男性患儿25例，女性患者20例，其中患儿年龄在6个月至5岁，其中患儿在6个月至1岁的有11例。两组患者在临床资料上不存在差异性(P>005)，具有可比性。
12 临床表现 患儿均出现发热症状，且持续的时间5 d以上，最长的患儿发热时间长达14 d，平均发热时间为82 d。典型KD组患儿出现的临床体征较非典型KD组明显，具有统计学差异(P
14 研究方法 对非典型KD及典型KD患儿的年龄、性别、临床表现、超声检查结果、实验室指标、诊疗的效果以及预后等进行分析和统计［2］。
2 结果
21 患者年龄、性别 两组患儿在年龄及平均年龄上均没有统计学的差异(P>005),但两组患儿在发病的阶段上非典型KD组的患儿比例高于典型KD组的患儿，存在统计学的意义(P
22 实验室的检查结果 两组患者在白细胞计数、C反应蛋白、血小板、血沉等指标上不存在显著的差异性(P>005),结果见表2。
表1 非典型KD与典型KD病症分析 n=例
表2 两组患儿在生化指标上的比较 n=例23 彩超检查 对两组患儿进行彩超心动图检查，如果心电图中显示回声增强，动脉管壁增厚，内膜回声异常，冠状动脉抗张等视为患儿出现CAL。结果显示：在非典型KD组中检查出CAL的患儿共有22例(7333%)，在典型KD组中出现CAL的患儿有8例(1778%)，两组患者的CAL发生率比较具有统计学意义(P
24 治疗的效果 两组患者每天给予IVIG(丙种球蛋白)400 mg进行静脉治疗，连续注射5 d，或采用单剂量的阿司匹林50~80 mg，服用3次/d，同时配以潘生丁，持续用药3 d，直至血小板及血流量恢复正常。在30例出现冠状动脉患者中，有10例患者的冠状动脉增宽3~8 mm,5例患者出现动脉瘤，其余出现冠状动脉受损的患儿在接受治疗后3个月内均恢复正常。
3 讨论
川崎病(KD)属于一种淋巴结皮肤黏膜综合征，在5岁以下的儿童发病率较高，其病因至今还尚未清楚。KD疾病对冠状动脉造成侵犯，从而形成冠状动脉瘤、冠状动脉狭窄以及形成血栓，导致患儿出现心肌梗死。目前KD造成的冠状动脉损害已成为患儿后天性心脏病的发生的主要原因之一。KD除了损害冠状动脉外，还会伤及脾、胃、肝、肠以及大脑［3］。
目前认为该病的发生原因是由于患儿感染病原后引起的全身性免疫介导血管炎症。KD疾病目前的诊断主要是依据临床表现，在临床上缺乏相应的检测以及确诊的手段。不典型KD的日益增多，将导致KD早期的临床症状不能达到AHA的诊断要求，在临床表现中，两组患儿均出现持续5 d以上的发热现象，非典型KD患儿 临床表现的症状为口腔黏膜出血、口唇出现皲裂、眼结膜充血、手足肿硬、皮疹的发生以及淋巴肿大等症状与典型KD患者相对比具有差异性。因此对于出现持续发热5 d以上的患者即可能是非典型的KD也可能是典型的KD， 由于不典型KD的症状在临床上表现得较隐蔽，所以容易导致误诊和漏诊的发生［4］。增加冠状动脉的诊治，通过同冠状动脉受损的程度判断不典型KD病例，对于临床上及早治疗不典型KD有着积极的意义。KD对冠状动脉的损害治疗的有效性与IVIG的应用有关，IVIG的应用可以将KD引起的冠状动脉受损降低20%~25%，因此及早发现非典型KD可有助于患儿的康复。
参 考 文 献
［1］ 张晓梅,孙景辉川崎病诊治进展.实用儿科临床杂志,2011,26(1):5255.
［2］ 张伟川崎病发生冠状动脉病变危险因素的Logistic回归分析.中国实用儿科杂志,2006,21(1):5153.
典型病例分析范文6
【关键词】 儿童变异性咳嗽；典型哮喘；危险因素
DOI：10.14163/ki.11-5547/r.2015.19.068
典型性哮喘（CA）危险性发病因素的研究近年来受到了专家学者的重视， 尤其是从变异性咳嗽转变为典型性哮喘之间的发病机制存在着相似性[1]。针对变异性咳嗽患儿治疗不及时， 非常容易转变为典型性哮喘， 所以对变异性咳嗽转变为典型性哮喘危险因素的研究对疾病的防控具有非常重要的作用[2]。本文选取本院2012年1月～2013年12月收治的120例变异性咳嗽儿童进行研究， 将研究的详细情况报告如下。
1 资料与方法
1. 1 一般资料 选取本院2012年1月～2013年12月收治的120例变异性咳嗽儿童为研究对象， 经过对其资料分析实现对转变为典型性哮喘的危险因素探究。其中有48例治疗之后转变为典型性哮喘， 其中男25例， 年龄0～13岁， 平均年龄（8.8±1.1）岁， 女23例， 年龄1～14岁， 平均年龄（8.2±1.3）岁；72例未转变为典型性哮喘患儿， 男35例， 年龄1～13岁， 平均年龄（8.5±1.3）岁， 女37例， 年龄0～14岁， 平均年龄（8.7±1.4）岁。入选试验研究标准：符合变异性儿童咳嗽症状， 年龄0～14岁患儿可入选， 变异性咳嗽哮喘诊断依据2008年制定的《咳嗽变异性哮喘的诊断标准》；排除标准：患儿具有先天性气管炎、呼吸道感染之后咳嗽、气道咳嗽综合征、肺发育异常、支气管淋巴结核、支气管异物、嗜酸粒细胞性支气管炎、胃食管反流病、药物引发咳嗽、耳源性咳嗽以及先天性心脏病咳嗽等。
1. 2 方法 本次研究为回顾性资料调查研究， 主要对患儿的基本资料进行调查， 包括：性别、年龄、名字、住址、家庭成员、临床症状、咳嗽持续时间以及查体情况。根据在治疗过程中主要对患儿开展抗哮喘治疗， 包含了口服白三烯受体拮抗剂、吸入支气管扩张剂、吸入糖皮质激素等治疗， 然后对120例变异性咳嗽患儿进行随访， 按照哮喘诊断标准对随访的120例患儿进行确诊， 出现48例典型性哮喘患儿， 然后对其进行单因素的Logistic危险因素分析， 接着再从单因素Logistic回归分析中进行多因素分析， 从而获得变异性咳嗽患儿转变为典型哮喘危险因素的研究资料。
1. 3 统计学方法 采用SPSS17.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验；计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验；多因素分析应用Logistic回归模型进行分析。P
2 结果
2. 1 单因素分析结果 典型性哮喘患儿和非典型性哮喘患儿年龄、性别比较， 差异无统计学意义（P>0.05）， 而根据Logistic回归分析， 患儿在民族、病情持续时间、严重程度以及过敏史上比较， 差异无统计学意义（P>0.05）。在特应性体质、呼吸道感染、家族哮喘史、环境潮湿方面比较， 差异有统计学意义（P
2. 2 多因素分析结果 根据多因素Logistic回归分析之后特应性体质、近期呼吸道感染、家族哮喘史、治疗依从性为儿童咳嗽转变为典型哮喘的危险性因素。见表2。
3 讨论
变异性咳嗽和典型性哮喘均是由于患儿体内出现慢性炎症、气道重塑等疾病的发展所致， 此时患儿气道反应性增高成为其主要的表现。由于变异性咳嗽患儿和典型性哮喘患儿在病理的改变上存在着很大的相似性， 主要由于患儿嗜酸性粒细胞浸润呼吸道， 造成了慢性炎症从而引发咳嗽。
根据本院的回顾性资料研究， 其中典型性哮喘患儿和未出现典型性哮喘患儿在年龄、性别上比较， 差异无统计学意义（P>0.05）， 而根据Logistic回归分析， 患儿在民族、病情持续时间、严重程度以及过敏史上比较， 差异无统计学意义（P>0.05）。但是根据多因素Logistic回归分析之后特应性体质、近期呼吸道感染、家族哮喘史、治疗依从性为儿童咳嗽转变为典型哮喘的危险性因素。
参考文献
[1] 李涛. 儿童咳嗽变异性哮喘转为典型哮喘的危险因素分析.新疆医科大学， 2011.
