小豚鼠范文1
江西吉安师范附小四（4）班 周逸晨
“吱、吱、吱”，听吧，又是我家的这个“小贪吃鬼”——小豚鼠。这只小豚鼠是妈妈在“六一”儿童节送给我的礼物，我给它起了个名字叫“欢欢”。
欢欢有一身褐白相间的毛，摸上去十分柔软。那半黄半黑的脸上挂着两颗小电灯泡似的眼睛，不停地闪呀闪。两只木耳似的小耳朵，连一根针掉在地上的声音也不会放过。六根细鱼骨头似的胡须不断地摇摆着，这样子怪叫人喜爱的。
小豚鼠吃食的时候很有趣，它可是个贪吃鬼。有一次，我拿了一片空心菜去喂它，把这片空心菜挂在了笼子上，欢欢发现这个悬挂在自己家门上的“不明飞行物”，便伸出头谨慎地闻了闻，确定可以吃，欢欢便放开胃口，大吃特吃起来，还不时地东张西望，好像害怕有人抢走它的美食。吃饱了，欢欢不停地向我点头，好像在说：“小主人，谢谢你给我喂食。”
小欢欢休息时也很有趣。瞧，它收起四肢，把身子缩了起来，真像一个小小的毛绒球。过了一会儿，欢欢便闭上双眼睡着了。不过，它睡不香，一点小动静都会惊醒它。
小豚鼠范文2
【摘要】 目的 观察檀香挥发油对豚鼠离体回肠和小鼠小肠推进的影响。方法 采用离体实验方法、炭末推动法，以正常、新斯的明负荷、肾上腺素负荷为研究模型。结果 檀香挥发油对豚鼠离体回肠自发活动有抑制作用，且对乙酰胆碱、组胺、氯化钡所致的离体肠痉挛有对抗作用(P
【关键词】 檀香挥发油;离体肠;小肠推进
ABSTRACT: Objective To study the effect of sandalwood essential oil on isolated ileum smooth muscle of guinea pigs and the small intestine movement function of mice. Methods We used the experiment method of isolating ileum smooth muscle of guinea pigs and intestine propulsion of carbon ink in mice. We constructed the models of healthy mice， neostigminetrested mice and adrenalineloaded mice. Results Sandalwood essential oil had an inhibitory effect on the spontaneous movement of guinea pigs isolated ileum and an antagonistic action on intestinal spasm caused by acetylcholine， histamine and barium chloride (P
KEY WORDS: sandalwood essential oil; isolated intestine; small intestine propulsion
檀香为檀香科植物檀香Santalum album L.的木质心材。主产于印度、澳大利亚、印度尼西亚，性温味辛，入脾、胃、肺经，具有行气止痛，散寒调中的功效，主治心腹疼痛、胃寒疼痛、噎膈呕吐，胸膈不舒，心绞痛等。目前，檀香挥发油等方面研究较多，但对胃肠作用的报道较少。本研究主要考察檀香挥发油对豚鼠离体回肠和小鼠小肠运动的影响，为探讨寻找其行气物质提供参考。
1 材料与方法
1.1 动物 健康豚鼠20只，体重200～300g，雌雄各半;健康昆明小鼠150只，体重18～22g，雌雄各半;购自长沙市开福区东创实验动物科技服务部，动物许可证号scxk(湘)20060001。
1.2 檀香 购于湖南岳阳医药总公司中药饮片加工厂长沙经营部，经本校中药资源教研室刘塔斯教授鉴定为正品。
1.3 挥发油的制备 称取檀香200g，药材加6倍水，水蒸气蒸馏法蒸馏15h，得挥发油1.4mL，挥发油加50g/L吐温80助溶。水溶液浓缩至200mL，保存另用。
1.4 试剂 硫酸阿托品注射液(天津药业集团新郑股份有限公司，批号：060718);甲硫新斯的明注射液(上海信谊金朱药业有限公司，批号：070522);盐酸肾上腺素注射液(广州明兴制药厂，批号：050501);乙酰胆碱(国药集团化学试剂有限公司，批号：070612);磷酸组胺(上海三杰生物技术有限公司);氯化钡(广东汕头市西陇化工厂，批号：070812)。
1.5 统计学处理 采用SPSS15.0软件进行统计处理，方差齐用t检验，方差不齐时用秩和检验。
2 结 果
2.1 檀香挥发油对豚鼠离体肠自发活动的影响[12] 取豚鼠猛击头部致死，迅速剖腹，取近盲肠部约10cm回肠，置于盛有冷台氏液之器皿中，沿肠壁剪去肠系膜，将肠管剪成1.5～2cm的小段备用。调节恒温平滑肌槽 ，使水温保持在(37±05)℃。将压力换能器与BL420生物机能实验系统连接。取回肠一段，两端各穿一线，其中一线固定于L型通气管上，放入有20mL台氏液的浴漕内，溶液pH=7.3，溶液呈无色透明，固定L型通气管，并调节恒温平滑肌槽，缓慢通入气泡(2个气泡/s)。肠管另一端与压力换能器 相连，加1g负荷，打开BL420生物机能实验系统，待肠管运动恢复正常后，记录一段肠管正常活动曲线，开始滴加给药，给药方法采用拉丁方设计给药(表1、图1)。由表1可知，檀香挥发油对豚鼠离体肠具有明显的抑制作用，表现为频率降低，振幅减少。表1 檀香挥发油对豚鼠离体肠自发活动的影响
2.2 檀香挥发油对豚鼠离体回肠肠痉挛模型的影响[12] 在恒温水浴槽中分别加入0.1g/L乙酰胆碱(Ach)、0.1g/L磷酸组胺(His)和10g/L氯化钡10μL，造成肠痉挛后加入檀香挥发油0.5mL，使其在台氏液中浓度为50g/L，见肠活动明显抑制后加入上述等量的3种致痉剂，比较檀香挥发油加入前后3种致痉剂对肠活动的影响，给药方法采用拉丁方设计给药(表2、图2)。
由表2可见，檀香挥发油对于乙酰胆碱、组胺、氯化钡所致的肠痉挛有对抗作用。提示檀香挥发油可能通过拮抗肠平滑肌上胆碱能受体、组胺受体的作用及能对离子通道产生作用。表2 檀香挥发油对豚鼠离体肠肠痉挛病理模型的影响
2.3 对正常小鼠小肠推进功能的影响[3] 小鼠50只，体重16～22g，雌雄各半，随机分成5组，每组10只，分为正常对照组、阿托品组和檀香挥发油给药组，挥发油剂量分别是2.3、1.15、0.57μL/kg，给药组用檀香挥发油(挥发油加50g/L吐温80，用时搅拌)灌胃，每日1次，每次0.25mL/10g，连续3d，正常对照组以等体积蒸馏水灌胃。灌胃前禁食12～16h，第3天给药后30min，各组均灌胃50g/L的炭末混悬液，用量0.1mL/10g。阿托品灌胃0.01g/kg，20min后，将小鼠颈椎脱臼处死，立即剖腹取出小肠全长，记录炭末自前沿至幽门的距离，即炭末推进的长度，并计算占小肠全长的百分比，各给药组与正常对照组比较(表3)。
由表3可见，檀香挥发油对正常小鼠小肠功能无显著推进作用(P>0.05)。
2.4 对肾上腺素所致小鼠小肠推进抑制的影响[3] 小鼠50只，体重16～22g，随机分成5组，每组10只，分为正常对照组、肾上腺素组和檀香挥发油给药组，剂量分别是2.3、1.15、0.57μL/kg。正常对照组和肾上腺素组均给予等体积的蒸馏水，每日1次，每次0.25mL/10g，连续3d。实验前禁食12～16h，第3天给药后30min，除正常对照组外，各组均进行皮下注射盐酸肾上腺素0.5mg/kg，15min后，各组小鼠灌胃50g/L的碳末混悬液，用量为0.1mL/10g，20min后颈椎脱臼处死，立即剖腹取出小肠全长，记录炭末自前沿至幽门距离，计算占小肠全长的百分比，给药组与肾上腺素和对照组比较(表4)。表3 檀香挥发油对正常小鼠小肠推进功能的影响表4 檀香挥发油对肾上腺素所致小鼠小肠推进抑制的影响
结果显示：0.5mg/kg肾上腺素与正常对照组比较，可以显著地抑制小鼠小肠推进运动(P0.05)。
2.5 对新斯的明所致小鼠小肠功能亢进的影响[3] 小鼠50只，体重16～22g，随机分成5组，每组10 只，分为正常对照组、新斯的明组和檀香挥发油给药组，剂量分别是2.3、1.15、0.57μL/kg。给药组以檀香挥发油灌胃，对照组和新斯的明组均给予等体积的蒸馏水，每日1次，每次0.25mL/10g，连续3d(表5)。实验前禁食12～16h，第3天给药后30min，表5 檀香挥发油提取物对新斯的明引起肠亢进的影响
除正常对照组外，各组均进行皮下注射新斯的明0.11mg/kg，15min后，各组灌胃50g/L的炭末混悬液0.1mL/10g，20min后颈椎脱臼处死，立即剖腹取出小肠全长，记录炭末自前沿至幽门距离，计算占小肠全长的百分比。
结果显示：新斯的明与正常对照组比较，可显著地加快小鼠小肠推进运动(P
3 讨 论
实验结果表明，檀香挥发油对豚鼠离体回肠自发活动有抑制作用，且对乙酰胆碱、组胺、氯化钡所致的肠痉挛有对抗作用。提示檀香挥发油可能通过拮抗肠平滑肌上胆碱能受体、组胺受体的作用及能对离子通道产生作用。檀香挥发油能抑制新斯的明所致的小鼠小肠功能亢进。其作用机制可能使乙酰胆碱释放增多，而加强胃肠蠕动[4]。
对胃肠运动功能有影响的中药可分为3类：促进胃肠运动、抑制胃肠运动、双向调节胃肠运动[5]。檀香归属行气药，中医行气主要是针对气滞，气滞中医主要表现为“满、胀、痛”，当“满、胀”时平滑肌呈松弛状态，“痛”是其主要表现，平滑肌呈现痉挛状态，檀香挥发油能抑制肠痉挛，从而达到行气的作用。檀香味辛，辛味具有行气的作用，中医行气与胃肠功能的运动有一定的关系。目前，研究大多数辛味药物中含有挥发油和萜类[6]，檀香挥发油从另一方面也证明了其具有的行气的作用，故檀香挥发油是其行气的物质之一。挥发油中行气作用的物质基础以及檀香挥发油是否具有活血、发散作用还需进一步研究;阐明其药效的物质基础，将为研究五味中辛味药物的行气作用提供研究方法和思路奠定基础。
参考文献
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[4]张昌绍. 药理学 [M]. 北京：人民出版社， 1965: 390391.
小豚鼠范文3
【摘要】 【目的】 观察诱生型一氧化氮合酶(inos)在脉冲噪声暴露白色和杂色豚鼠耳蜗中的表达,以探讨黑色素对耳蜗损伤的保护作用机理。【方法】将白色和杂色豚鼠暴露于脉冲噪声,复制耳蜗损伤的模型。采用免疫组织化学的方法观察inos在两组豚鼠耳蜗的表达。 【结果】inos在两组脉冲噪声暴露豚鼠耳蜗中均呈阳性表达,以血管纹和螺旋神经节的表达较强,而且inos在白色豚鼠耳蜗的表达显著强于杂色豚鼠。【结论】耳蜗黑色素拮抗耳蜗损伤的作用可能是通过抑制耳蜗inos表达来实现的。
【关键词】 耳蜗/损伤;耳蜗/病理学;脉冲噪声;黑色素;疾病模型，动物;豚鼠
一氧化氮(nitric oxide, no)有多种生物学作用,由l精氨酸在一氧化氮合成酶(nitric oxide synthase, nos)的催化作用下产生。有研究表明诱生型nos(inos)参与噪声的耳蜗损伤机制[1],而黑色素对杂色豚鼠耳蜗的损伤有拮抗作用[2]。目前有关黑色素拮抗豚鼠耳蜗损伤的机理尚不清楚[3],本研究应用免疫组织化学方法观察inos在脉冲噪声暴露损伤白色和杂色豚鼠耳蜗的表达,以探讨黑色素是否通过抑制inos的表达而拮抗耳蜗损伤。现报道如下。
1材料与方法
11实验动物选用健康白色红目豚鼠(白色组)和杂色豚鼠(杂色组)各8只,耳镜检查鼓膜正常,耳廓反射灵敏。豚鼠来源于广东省医学实验动物中心,3月龄,体质量250 g左右,雌雄兼用,合格证号：0017410。
12主要试剂与仪器抗inos抗体、链酶亲和素生物素过氧化物酶复合物(sabc)免疫组化试剂盒(sa1022)均为sigma公司产品。86式自动步枪来源于广东省军区军训靶场，pathfinder i型听功能测试仪(nicolet公司)。
13造模方法[4-5]脉冲噪声发生源为86式自动步枪,脉冲噪声发生环境为军训靶场,将豚鼠置于距步枪口15 cm处,测得该处声压为170 db。步枪连续激发6发,每次激发间隙10 s。
14听觉脑干诱发电位(abr)检测abr阈值采用听功能测试仪记录,短声刺激,声音由耳机通过与豚鼠外耳道耦合的塑料小管输入,以第3波为基准测反应阈,测定脉冲噪声暴露前后听阈值。两组豚鼠在脉冲噪声暴露前及暴露后24 h行abr检测。
15取材最后1次检测abr后,豚鼠在全麻下开胸,以磷酸盐缓冲液(pbs)心脏灌流,在灌流液清亮时,改用40 g/l多聚甲醛灌注固定5 min。迅速取下双侧颞骨,将耳蜗置于4℃、40 g/l多聚甲醛液中,在解剖显微镜下摘除镫骨,用细针于蜗顶钻一小孔,轻轻以40 g/l多聚甲醛灌流耳蜗,耳蜗在40 g/l多聚甲醛固定12 h以上,pbs漂洗数次,100 g/l乙二胺四乙酸(edta)脱钙,石蜡包埋,切片,每片厚度6 μm。
16免疫组织化学染色两组豚鼠耳蜗切片以二甲苯及酒精脱石蜡后,tris缓冲盐溶液(tbs)漂洗10 min×3次,体积分数2%双氧水处理20 min。tbs漂洗10 min×2 次后,2 g/l triton处理10 min。tbs漂洗10 min×2次,50 g/l胎牛蛋白封闭60 min。加抗inos抗体(以8 g/l胎牛蛋白稀释为1∶800,sigma公司,从兔血清制备)，在4℃冰箱过夜。加入二抗(羊抗兔, 用tbs稀释为1∶400)1 h,tbs漂洗后加入辣根过氧化物酶标记链霉亲和素(strephrp,用tbs稀释为1∶100)1 h,tbs漂洗10 min×4次后,用二氨基联苯胺(dab)显色液显色,显色在光镜下控制进行。阴性对照以8 g/l胎牛蛋白代替抗inos抗体,以庆大霉素损伤豚鼠肾脏切片为阳性对照。inos在两组豚鼠耳蜗的表达强度以+～+++表示进行半定量分析[6]。
17统计学方法采用spss 115软件进行数据的统计学分析。
2结果
21两组豚鼠abr听阈变化由表1可知,两组豚鼠在脉冲噪声暴露后abr比较差异具有显著性意义(p<001),杂色豚鼠的平均听阈比白色豚鼠约低17 db左右。表1两组豚鼠abr听阈变化比较
22两组豚鼠耳蜗inos表达比较
inos在两组豚鼠耳蜗反应均呈阳性,而且在耳蜗的各转都呈阳性,inos在白色豚鼠耳蜗的表达明显强于杂色豚鼠。在corti氏器,支持细胞如：hensen细胞、deiter细胞、内外柱细胞、边缘细胞inos反应均呈阳性。感觉细胞(内、外毛细胞)inos染色呈阳性,外毛细胞染色较强,内毛细胞染色较弱。蜗神经的inos染色在光镜下呈阴性。图1结果显示：白色豚鼠耳蜗血管纹和螺旋神经节细胞inos反应均呈强阳性 (图1-a,b),杂色豚鼠耳蜗血管纹和螺旋神经节细胞inos反应均呈弱阳性 (图1-c,d)。inos在两组豚鼠耳蜗的表达强度见表2。表2两组豚鼠inos耳蜗表达强度比较
3讨论
噪声能导致耳蜗的损伤,噪声引起耳蜗的损伤包括机械性和代谢性两种机制,一般认为先有机械性损伤,之后继发代谢性损伤。杂色豚鼠耳蜗黑色素能拮抗噪声对耳蜗的损伤作用,但是黑色素拮抗耳蜗损伤的作用机理不清楚[3]。研究证实inos是参与噪声耳蜗损伤的主要病理因素之一[1]。本研究结果表明在脉冲噪声损伤时inos在杂色豚鼠耳蜗的表达强度显著低于白色豚鼠耳蜗的强度,证明杂色豚鼠耳蜗黑色素通过代谢途径抑制inos活性,从而拮抗豚鼠耳蜗的损伤。inos在脉冲噪声损伤耳蜗中表达阳性,尤以血管纹和螺旋神经节细胞为甚。inos在正常的组织中不表达,一旦在病理因素的刺激下表达则持续催化产生大量no[7],而大量no则对组织产生损伤作用。另外,no与过氧化物反应产生过氧亚硝酸盐[8-9],过氧亚硝酸盐能迅速解离氢氧根自由基,亦导致细胞损伤。同时,no能激活n-甲基-d-天冬氨酸受体的负反馈机制,而导致内耳的神经阻滞[10]。豚鼠耳蜗在暴露脉冲噪声后血管纹和螺旋神经节inos的表达较强,从而产生大量no而损伤血管纹和螺旋神经节细胞。血管纹是整个耳蜗包括内外毛细胞及支持细胞能量的主要来源[11],血管纹的损伤导致耳蜗功能的失调。螺旋神经节细胞是听觉传导路的一级神经原,其损伤导致听觉传导的阻滞。综上所述,脉冲噪声能引起耳蜗inos的表达,而杂色豚鼠耳蜗黑色素通过代谢途径抑制inos活性,从而拮抗脉冲噪声耳蜗的损伤。
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小豚鼠范文4
【摘要】 【目的】观察Caspase3在暴露于脉冲噪声中的白色和杂色豚鼠耳蜗中的表达，以探讨黑色素对耳蜗损伤的保护作用机制。【方法】选用白色和杂色豚鼠各8只，暴露于脉冲噪声中复制耳蜗损伤模型。取耳蜗用石蜡包埋、切片，采用免疫组织化学法观察Caspase3在两组豚鼠耳蜗的表达。【结果】Caspase3在两组脉冲噪声暴露豚鼠耳蜗中均呈阳性表达，以血管纹和螺旋神经节的表达较强，而且Caspase3在白色豚鼠耳蜗的表达显著强于杂色豚鼠。【结论】耳蜗黑色素拮抗耳蜗损伤的作用是通过抑制耳蜗Capase3活性，从而抑制耳蜗细胞的凋亡来实现的。
【关键词】 耳蜗疾病； 耳蜗/病理学； 细胞凋亡； 黑色素； 疾病模型，动物； 豚鼠
研究表明，黑色素对杂色豚鼠耳蜗的噪声损伤有保护作用［1］，但其抗损伤机制尚不完全清楚。细胞凋亡是耳蜗损伤的一种重要机制，而细胞凋亡是受细胞内源性基因、酶类和信号传导途径调控的一个"瀑布式"激活过程［2］，Caspase家族（又称天冬酰胺特异酶切的半胱胺酸蛋白酶家族）是一切凋亡信号传导的共同通路，正由于此家族的激活最终导致内源性核酸酶的激活和细胞骨架重新组合所致的细胞结构解体，形成不可逆的凋亡［3］。Caspase家族现有13名成员，其中Caspase3由于其具有的凋亡执行作用而成Caspase家族中的核心成员［4］，它的表达意味着细胞在发生凋亡。本研究应用免疫组织化学方法检测并比较Caspase3在白色和杂色豚鼠耳蜗的表达，以探讨耳蜗黑色素是否通过影响Caspase3活性而对耳蜗脉冲噪声损伤起拮抗作用。现报道如下。
1 材料与方法
1.1 动物 采用健康白色红目豚鼠和杂色豚鼠各8只，耳镜检查鼓膜正常，耳廓反射灵敏。豚鼠来源于广东省医学实验动物中心，3月龄，体质量250g左右，合格证号：0017410。
1.2 主要试剂与仪器 抗Caspase3抗体（BA0588）、链酶亲和素生物素过氧化物酶复合物（SABC）免疫组化试剂盒（SA1022）均为Sigma公司产品；86式自动步枪来源于广东省军区军训靶场；Pathfinder I 型听功能测试仪（Nicolet）。
1.3 造模方法［56］ 脉冲噪声发生源为86式自动步枪，脉冲噪声发生环境为军训靶场，将豚鼠置于距步枪口15cm处，测得该处声压为170dB。步枪连续激发6发，每次激发间隙10s。
1.4 听觉脑干诱发电位（ABR）检测 ABR阈值采用Pathfinder I型听功能测试仪记录，短声刺激，声音由耳机通过与豚鼠外耳道耦合的塑料小管输入，以第3波为基准反应阈，测定两组豚鼠造模前及造模后24h的听阈值。
1.5 取材 最后1次检测ABR后，豚鼠在全麻下开胸，以磷酸盐缓冲液（PBS）心脏灌流，在灌流液清亮时，改用40g/L多聚甲醛灌注固定5min。迅速取下双侧颞骨，将耳蜗置于4℃、40g/L多聚甲醛液中，在解剖显微镜下摘除镫骨，用细针于蜗顶钻1小孔，轻轻以40g/L多聚甲醛灌流耳蜗，耳蜗在多聚甲醛中固定12h以上，PBS漂洗数次，100g/L乙二胺四乙酸（EDTA）脱钙，石蜡包埋，切片，每片厚度6μm。
1.6 Caspase3表达检测 采用免疫组织化学染色法。两组豚鼠耳蜗切片以二甲苯及酒精脱石蜡后，Tris缓冲盐溶液（TBS）漂洗10min×3次，体积分数2%双氧水处理20min；TBS漂洗10min×2次，2g/LTritonX处理10min；TBS漂洗10min×3次，50g/L胎牛蛋白封闭60min；加抗Caspase3抗体（以8g/L胎牛蛋白稀释为1∶600），在4℃冰箱过夜；加入二抗（羊抗兔，用TBS稀释为1∶400）1h，TBS漂洗后加入链球菌过氧化物酶（StrepHRP，用TBS稀释为1∶100）1h，TBS漂洗10min×4次后，用二氨基联苯胺（DAB）显色液显色，显色在光镜下控制进行。阴性对照以8g/L胎牛蛋白代替抗caspase3抗体，以庆大霉素损伤豚鼠肾脏切片为阳性对照。
1.7 统计学方法 采用SPSS11.5软件进行统计学分析。
2 结果
2.1 两组豚鼠ABR听阈变化比较 由表1可知，两组豚鼠在脉冲噪声暴露后ABR听阈比较具有显著性差异（P＜0.01），杂色豚鼠的平均听阈比白色豚鼠约低17dB左右。 表1 两组豚鼠ABR听阈变化比较 统计方法：t检验；①P＜0.01，与杂色组比较
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2.2 Caspase3在耳蜗的表达 Caspase3在两组豚鼠耳蜗反应均呈阳性，阳性区域主要位于耳蜗血管纹和螺旋神经节，而且在耳蜗的各转都呈阳性，Caspase3在白色豚鼠耳蜗的表达明显强于杂色豚鼠。在Corti 氏器，支持细胞如：Hensen 细胞、Deiter 细胞、内外柱细胞、边缘细胞Caspase3 反应呈弱阳性；感觉细胞（内、外毛细胞）Caspase3 染色亦呈弱阳性，外毛细胞染色较内毛细胞稍强。蜗神经的Caspase3 染色在光镜下呈阴性。Caspase3 在血管纹和螺旋神经节细胞的表达呈强阳性，且其表达在白色豚鼠（图1-a，b）和杂色豚鼠（图1-c，d）差异显著。Caspase3 在两组豚鼠耳蜗的表达强度见表2，并对Caspase3 的表达强度以＋～＋＋＋表示进行半定量分析［7］。 表2 两组豚鼠Capase3耳蜗表达比较统计方法：秩和检验；①P＜0.05，与杂色组比较
3 讨论
噪声能导致耳蜗的损伤，其损伤包括机械性和代谢性两种机制，一般认为先有机械性损伤，之后继发代谢性损伤。杂色豚鼠耳蜗黑色素能拮抗噪声对耳蜗的损伤作用，但是黑色素拮抗耳蜗损伤的作用机理不清楚。研究证实Caspase3 在正常的耳蜗中不表达，但Caspase3 是参与噪声耳蜗损伤的主要病理因素之一［8］。本研究结果表明Caspase3 在脉冲噪声损伤耳蜗中表达阳性，尤以血管纹和螺旋神经节细胞为甚，而且Caspase3 在杂色豚鼠耳蜗的表达强度显著低于白色豚鼠耳蜗的表达强度，表明杂色豚鼠耳蜗黑色素可能通过代谢途径抑制Caspase3 活性，从而拮抗豚鼠耳蜗的损伤。
Caspase3 是近年来发现的类半胱氨酸蛋白酶家族成员之一。Caspase3 是细胞凋亡中的关键蛋白酶，它单独或协同参与水解许多与凋亡有关的蛋白质［9］。正常情况下，Caspase3 以无催化活性的酶原形式存在于细胞质内，不危害细胞。但当细胞进入凋亡过程时，Caspase3 则经由特异的Asp残基处的蛋白水解作用而被激活，从而产生了蛋白水解作用形成的Caspase3 自我放大级联反应［10］，进而裂解DNA损伤细胞。Caspase3 阳性表达意味着细胞凋亡在进行过程中。本实验结果观察到Caspase3 在脉冲噪声损伤耳蜗的血管纹和螺旋神经节细胞表达阳性，预示着耳蜗血管纹和螺旋神经节细胞发生凋亡，提示细胞凋亡在脉冲噪声耳蜗的损伤中起重要作用。而Caspase3 在白色豚鼠耳蜗的表达强度显著强于杂色豚鼠，意味着白色豚鼠耳蜗细胞凋亡数目显著多于杂色豚鼠。白色豚鼠和杂色豚鼠耳蜗血管纹均存在黑色素细胞，但是它们的区别是白色豚鼠的黑色素细胞不产生黑色素［11］。是否杂色豚鼠耳蜗血管纹黑色素细胞通过分泌黑色素抑制耳蜗细胞的凋亡，从而对噪声损伤起拮抗作用，有待进一步研究证实。
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［5］Sendowski I，Abaamrane L，Raffin F，et al.Therapeutic efficacy of intracochlear administration of methylprednisolone after acoustic trauma caused by gunshot noise in guinea pigs［J］. Hear Res，2006，221（1-2）：119.
［6］Sendowsdi I， Raffin F，BraillonCros A.Therapeutic efficacy of magnesium after acoustic trauma caused by gunshot noise in guinea pigs［J］.Acta Otolaryngol，2006，126（2）：122.
［7］于萍，步宏，王华，等.免疫组化结果的图像分析与人工计数方法的对比研究［J］.生物医学工程杂志，2003，20（2）：288.
［8］汪建，熊敏，何青莲，等.Caspase 3在豚鼠噪声损伤耳蜗中的表达［J］.广东医学，2005，26（1）：46.
［9］Srinivasula SM，Ahmad M，Fenandes Alnemri T，et al.Molecular ordering of the Fasapoptosis pathway:the Fas/APO1 protease Mch5 is a CrmAinhibitable protease that activates multiple Ced3/ICElike cystein protease［J］.Proc Nat Acad Sci USA，1996，93：14486.
［10］Boldin JP，Goncharov TM，Goltsev YV，et al. Involvement of MACH，a novel MORTI/FADDinteracting protease， in Fas/APO1 and TNF receptorinduced cell death［J］.Cell，1996，85：803.
小豚鼠范文5
【关键词】 平喘宁；哮喘；可溶性细胞间粘附分子-1；白三烯B4
Abstract：Objective To observe the effect of Pingchuanning on the levels of LTB4 and sICAM-1 of guinea pigs with asthma. Methods The model guinea pigs of asthma were sensitized with ovalbumin (OVA)， the changes of the delitescence of asthma was observed. The levels of LTB4 in serum and sICAM-1 in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) were also observed by means of enzyme-linked immunosorbent (ELISA). Result Comparing with the model group， the delitescence of asthma was obviously prolonged in guinea pigs treated by Pingchuanning. The levels of LTB4 and sICAM-1 of guinea pigs with asthma treated by Pingchuanning were significantly lowered (P
Key words：Pingchuanning；asthma；sICAM-1；LTB4
支气管哮喘是一种气道的慢性炎症性疾患，许多细胞(如嗜酸粒细胞、肥大细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等)和细胞组分在哮喘发病过程中起作用。上述炎性细胞能合成和释放肿瘤坏死因子、细胞间粘附分子-1(sICAM-1)、血小板活化因子(PAF)、白三烯(LTs)等大量炎性介质和细胞因子，引发气道炎症。气道炎症导致气道高反应性的加重。本研究通过复制豚鼠哮喘病模型，主要观察平喘宁对实验动物血清中白三烯B4(LTB4)、支气管肺泡灌洗液(BALF)中sICAM-1含量的影响，评价其治疗哮喘的相关生物学机制。
1 实验材料
1.1 动物
雄性健康豚鼠80只，体重250～350 g，安徽医科大学实验动物中心提供，合格证号：皖医动实准第01号。
1.2 药物与试剂
平喘宁由麻黄、细辛、苏子、杏仁、半夏、陈皮、地龙、五味子等中药依处方比例组成。中药饮片由安徽中医学院国医堂提供。经水煎煮制成合剂，依剂量的大小分别制成浓度为含原药材4.2(大剂量)、2.1(中剂量)、1.05 g/mL(小剂量)。醋酸地塞米松片，每片0.75 mg，信谊药业有限公司，批号040722。氨茶碱片，每片0.1 mg，南京白敬宇制药厂，批号040606。桂龙咳喘宁，山西桂龙医药有限公司，批号031209。卵白蛋白， Sigma公司(A5253)。豚鼠LTB4 ELISA检测试剂盒TPI InC USA(041567)，豚鼠sICAM-1 ELISA检测试剂盒DR Lab Caliornia USA(2004090517)。
1.3 主要仪器
402AI型医用超声雾化器，江苏鱼跃医疗设备有限公司， Spectra Classic型酶标分析仪。
2 实验方法
2.1 分组
将80只健康雄性豚鼠随机分为8组，每组10只。即正常组、模型组、平喘宁大剂量组、平喘宁中剂量组、平喘宁小剂量组、地塞米松组、氨茶碱组、桂龙咳喘宁组。
2.2 造模[1]
豚鼠腹腔注射含10%卵蛋白的生理盐水1 mL致敏。自注射第14天起，每天上、下午各1次将豚鼠置于气雾缸内(正常组除外)，用1%卵蛋白溶液超声雾化，进行诱喘攻击，至哮喘发作。当豚鼠出现咳嗽、呼吸困难和喘息、点头、抽搐，提示造模成功，连续7 d。
2.3 给药
正常组：按造模组方法，用生理盐水代替卵蛋白作腹腔注射与雾化吸入。自注射第14天起，给予等体积生理盐水灌胃。模型组：自注射第14天起，按上述方法造模致敏豚鼠，给予等体积生理盐水灌胃。平喘宁组：按上述方法造模致敏豚鼠，每天给予平喘宁灌服(其大、中、小剂量组按4∶2∶1进行浓缩)。地塞米松组：按上述方法造模致敏豚鼠，每天给予灌服地塞米松，剂量为0.4 mg/kg。氨茶碱组：按上述方法造模致敏豚鼠，每天给予灌服氨茶碱，剂量为0.08 g/kg。桂龙咳喘宁组：按上述方法造模致敏豚鼠，每天给予灌服桂龙咳喘宁，剂量为10.00 g/kg。各组均于当天两次激发间隔时间内给药，每天1次，连续7 d。
2.4 豚鼠血清的收集
将豚鼠用25%乌拉坦按照1.2 g/kg腹腔注射麻醉后，固定于手术台，打开腹腔，快速抽取腹主动脉血液约5 mL，注入无菌试管，置于室温约1 h后，以1 500 r/min离心30 min，无菌吸取上层血清装于无菌瓶内，储存-20 ℃冰箱备用。
2.5 豚鼠BALF收集[2]
将豚鼠用25%乌拉坦按照1.2 g/kg腹腔注射麻醉后，固定于手术台上，在下颌下沿支气管方向做一切口，切开皮肤，分离暴露气管，在气管上方做一“T”形切口，插入注射针头，扎紧，用10 mL注射器抽取PBS液进行灌洗，每次抽取3 mL，经反复灌洗5～6次后，吸出灌洗液，计5次，加入标号的试管中，灌洗液回收率应达80%以上。
2.6 观察指标
2.6.1 引喘潜伏期[3]
实验第14天，将豚鼠放入4 L的玻璃罩内，喷入1%卵蛋白气雾。观察豚鼠喘息动作(咳嗽、呼吸困难和喘息、点头、抽搐)，记录其引喘潜伏期(由喷入1%卵蛋白开始至哮喘发作所需的时间)。末次给药后再次观察引喘潜伏期。
2.6.2 血清中LTB4的检测
采用酶联免疫吸附反应技术(ELISA)，按说明书进行操作。酶标仪在450 nm波长下读取吸光度A值，以标准品A值绘制标准曲线，未知含量从标准曲线查得。
2.6.3 BALF中sICAM-1的检测
BALF 1 000 r/min，离心10 min，上清液-20 ℃保存，采用ELISA法测定，按照试剂盒说明书操作。
2.7 统计学方法
数据采用x±s，所有统计应用SPSS10.0软件进行。
3 结果
(见表1、表2)表1 各组豚鼠引喘潜伏期的比较(略)注：与模型组比较，*P
4 讨论
细胞粘附分子是众多介导细胞间或细胞与细胞外基质间相互接触和结合分子的统称。目前，研究较多且与哮喘有关的粘附分子主要包括：细胞间粘附分子(ICAM-1)、血管细胞间粘附分子(VCAM-1)和整合素家族的极迟抗原4(VLA-4)。其中ICAM-1在过敏性炎症形成过程中起关键作用。ICAM-1在哮喘发病中主要作用是介导炎症细胞，特别是嗜酸性粒细胞的聚集和跨血管内皮转移至炎症部位，释放多种炎症介质，而导致气道高反应性，也可能直接参与变态反应性炎症或作为鼻病毒受体，介导鼻病毒感染后引起气道炎症和AHR[4]。白细胞、血管内皮细胞或其他细胞表面的粘附分子可以被内吞进入细胞，也可以脱落下来，进入血液成为可溶性粘附分子。此外某些粘附分子的mRNA存在着不同的剪接形式，其中有的mRNA翻译后可能不表达在细胞表面，而是直接进入血液，成为可溶性粘附分子的另一个重要来源。除血清外，某些可溶性粘附分子还可在脑脊液、BALF、腹水等中出现，反映了局部粘附分子的表达可代谢状态。sICAM-1是血清中与细胞表面ICAM-1同型的蛋白分子，同样具有与淋巴细胞功能相关抗原1结合的活性，可通过与ICAM-1竞争配体而起到调节气道炎症的作
用，sICAM-1的升高反映了气道局部细胞表面ICAM-1表达的上调[5]。
本实验研究证实：抗原激发后哮喘豚鼠BALF中sICAM-1含量显著升高，提示sICAM-1可能参与了哮喘的发病过程，其在哮喘中的作用机制可能是增强EOS的氧化代谢过程，增加其颗粒毒性蛋白的释放，而导致AHR。而经过平喘宁治疗后明显降低，提示平喘宁有明显的抑制气道炎症作用。
LTB4同花生四烯酸其他代谢产物，如PGs、LTA4等类似，主要由中性粒细胞产生。它是一种局部作用的炎性介质，可趋化中性粒细胞，对EOS具轻微趋化作用，体内研究表明LTB4能促使白细胞从血管进入组织间隙。接触LTB4后多核白细胞迅速聚集，稍后便出现EOS的聚集，LTB4还可刺激超氧阴离子分泌及白细胞释放其颗粒成分，并影响B淋巴细胞低亲和力IgE受体的表达。研究表明，虽然LTB4无直接收缩支气管平滑肌的作用，但它具有强大的中性粒细胞和EOS趋化作用，比5HETE强100倍。
本实验结果显示哮喘模型组豚鼠血清中LTB4表达水平较正常组显著升高，提示LTB4水平增高在哮喘的发病中起一定的作用。其原因可能是LTB4促进中性粒细胞在气道的聚集，从而介导一系列的炎症过程。平喘宁各剂量组均能显著降低豚鼠血清中LTB4水平以达到阻止炎性递质释放而治疗哮喘的目的。
实验研究结果表明平喘宁能明显延长哮喘豚鼠的引喘潜伏期，降低哮喘豚鼠BALF中sICAM-1及血清中LTB4水平，提示平喘宁具有平喘作用，而其通过对相关细胞因子的调节而减轻哮喘炎症，降低气道高反应性，可能是本药治疗哮喘的作用机制之一。
【参考文献】
[1] 郭 鹞.人类疾病的动物模型复制[M].北京：人民卫生出版社，1982.235－236.
[2] 陈 奇.中药药理研究方法学[M].北京：人民卫生出版社，2000.1103－1104.
[3] 刘 宏，赵鸣武，耿秋明，等.博本霉素致肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液磷脂组分变化[J].中华结核和呼吸杂志，1993，16(4)：197－201.
[4] Ciprandi G， Tosca MA， Fasce L， et al. Allergen specific conjunctinal challenge in children with allergic asthma， A clinical tool[J]. Allergy，1994，49(6)：489.
[5] Shiota Y， Wilson JG， Marukawa M， et al. Soluble intercellular hesion molecule(ICAM-1) antigenin sera of bronchial asthmatics[J]. Chest，1996，109：94.
【摘要】 目的 观察平喘宁对哮喘豚鼠白三烯B4(LTB4)、可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)含量的影响，探讨其治疗哮喘的相关生物学机制。方法 以卵蛋白致敏复制豚鼠哮喘病模型，观察豚鼠引喘潜伏期的变化；运用酶联免疫吸附反应技术(ELISA)测定豚鼠血清中的LTB4和支气肺泡灌洗液(BALF)sICAM-1的含量。结果 平喘宁给药后，豚鼠的引喘潜伏期显著延长；平喘宁能显著降低哮喘豚鼠血清中LTB4和支气管肺泡灌洗液(BALF)中sICAM-1含量，与哮喘模型组比较，P
【关键词】 平喘宁；哮喘；可溶性细胞间粘附分子-1；白三烯B4
Effect of Pingchuanning on the Levels of LTB4 and sICAM-1 of Guinea Pigs with Asthma
ZHAO Bao-lin， FANG Xiang-ming
1.Anhui Junior College of TCM， Wuhu 241000， China；2. Anhui College of TCM， Hefei 230038， China
Abstract：Objective To observe the effect of Pingchuanning on the levels of LTB4 and sICAM-1 of guinea pigs with asthma. Methods The model guinea pigs of asthma were sensitized with ovalbumin (OVA)， the changes of the delitescence of asthma was observed. The levels of LTB4 in serum and sICAM-1 in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) were also observed by means of enzyme-linked immunosorbent (ELISA). Result Comparing with the model group， the delitescence of asthma was obviously prolonged in guinea pigs treated by Pingchuanning. The levels of LTB4 and sICAM-1 of guinea pigs with asthma treated by Pingchuanning were significantly lowered (P
Key words：Pingchuanning；asthma；sICAM-1；LTB4
支气管哮喘是一种气道的慢性炎症性疾患，许多细胞(如嗜酸粒细胞、肥大细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞等)和细胞组分在哮喘发病过程中起作用。上述炎性细胞能合成和释放肿瘤坏死因子、细胞间粘附分子-1(sICAM-1)、血小板活化因子(PAF)、白三烯(LTs)等大量炎性介质和细胞因子，引发气道炎症。气道炎症导致气道高反应性的加重。本研究通过复制豚鼠哮喘病模型，主要观察平喘宁对实验动物血清中白三烯B4(LTB4)、支气管肺泡灌洗液(BALF)中sICAM-1含量的影响，评价其治疗哮喘的相关生物学机制。
1 实验材料
1.1 动物
雄性健康豚鼠80只，体重250～350 g，安徽医科大学实验动物中心提供，合格证号：皖医动实准第01号。
1.2 药物与试剂
平喘宁由麻黄、细辛、苏子、杏仁、半夏、陈皮、地龙、五味子等中药依处方比例组成。中药饮片由安徽中医学院国医堂提供。经水煎煮制成合剂，依剂量的大小分别制成浓度为含原药材4.2(大剂量)、2.1(中剂量)、1.05 g/mL(小剂量)。醋酸地塞米松片，每片0.75 mg，信谊药业有限公司，批号040722。氨茶碱片，每片0.1 mg，南京白敬宇制药厂，批号040606。桂龙咳喘宁，山西桂龙医药有限公司，批号031209。卵白蛋白， Sigma公司(A5253)。豚鼠LTB4 ELISA检测试剂盒TPI InC USA(041567)，豚鼠sICAM-1 ELISA检测试剂盒DR Lab Caliornia USA(2004090517)。
1.3 主要仪器
402AI型医用超声雾化器，江苏鱼跃医疗设备有限公司， Spectra Classic型酶标分析仪。
2 实验方法
2.1 分组
将80只健康雄性豚鼠随机分为8组，每组10只。即正常组、模型组、平喘宁大剂量组、平喘宁中剂量组、平喘宁小剂量组、地塞米松组、氨茶碱组、桂龙咳喘宁组。
2.2 造模[1]
豚鼠腹腔注射含10%卵蛋白的生理盐水1 mL致敏。自注射第14天起，每天上、下午各1次将豚鼠置于气雾缸内(正常组除外)，用1%卵蛋白溶液超声雾化，进行诱喘攻击，至哮喘发作。当豚鼠出现咳嗽、呼吸困难和喘息、点头、抽搐，提示造模成功，连续7 d。
2.3 给药
正常组：按造模组方法，用生理盐水代替卵蛋白作腹腔注射与雾化吸入。自注射第14天起，给予等体积生理盐水灌胃。模型组：自注射第14天起，按上述方法造模致敏豚鼠，给予等体积生理盐水灌胃。平喘宁组：按上述方法造模致敏豚鼠，每天给予平喘宁灌服(其大、中、小剂量组按4∶2∶1进行浓缩)。地塞米松组：按上述方法造模致敏豚鼠，每天给予灌服地塞米松，剂量为0.4 mg/kg。氨茶碱组：按上述方法造模致敏豚鼠，每天给予灌服氨茶碱，剂量为0.08 g/kg。桂龙咳喘宁组：按上述方法造模致敏豚鼠，每天给予灌服桂龙咳喘宁，剂量为10.00 g/kg。各组均于当天两次激发间隔时间内给药，每天1次，连续7 d。
2.4 豚鼠血清的收集
将豚鼠用25%乌拉坦按照1.2 g/kg腹腔注射麻醉后，固定于手术台，打开腹腔，快速抽取腹主动脉血液约5 mL，注入无菌试管，置于室温约1 h后，以1 500 r/min离心30 min，无菌吸取上层血清装于无菌瓶内，储存-20 ℃冰箱备用。
2.5 豚鼠BALF收集[2]
将豚鼠用25%乌拉坦按照1.2 g/kg腹腔注射麻醉后，固定于手术台上，在下颌下沿支气管方向做一切口，切开皮肤，分离暴露气管，在气管上方做一“T”形切口，插入注射针头，扎紧，用10 mL注射器抽取PBS液进行灌洗，每次抽取3 mL，经反复灌洗5～6次后，吸出灌洗液，计5次，加入标号的试管中，灌洗液回收率应达80%以上。
2.6 观察指标
2.6.1 引喘潜伏期[3]
实验第14天，将豚鼠放入4 L的玻璃罩内，喷入1%卵蛋白气雾。观察豚鼠喘息动作(咳嗽、呼吸困难和喘息、点头、抽搐)，记录其引喘潜伏期(由喷入1%卵蛋白开始至哮喘发作所需的时间)。末次给药后再次观察引喘潜伏期。
2.6.2 血清中LTB4的检测
采用酶联免疫吸附反应技术(ELISA)，按说明书进行操作。酶标仪在450 nm波长下读取吸光度A值，以标准品A值绘制标准曲线，未知含量从标准曲线查得。
2.6.3 BALF中sICAM-1的检测
BALF 1 000 r/min，离心10 min，上清液-20 ℃保存，采用ELISA法测定，按照试剂盒说明书操作。
2.7 统计学方法
数据采用x±s，所有统计应用SPSS10.0软件进行。
3 结果
(见表1、表2)表1 各组豚鼠引喘潜伏期的比较(略)注：与模型组比较，*P
4 讨论
细胞粘附分子是众多介导细胞间或细胞与细胞外基质间相互接触和结合分子的统称。目前，研究较多且与哮喘有关的粘附分子主要包括：细胞间粘附分子(ICAM-1)、血管细胞间粘附分子(VCAM-1)和整合素家族的极迟抗原4(VLA-4)。其中ICAM-1在过敏性炎症形成过程中起关键作用。ICAM-1在哮喘发病中主要作用是介导炎症细胞，特别是嗜酸性粒细胞的聚集和跨血管内皮转移至炎症部位，释放多种炎症介质，而导致气道高反应性，也可能直接参与变态反应性炎症或作为鼻病毒受体，介导鼻病毒感染后引起气道炎症和AHR[4]。白细胞、血管内皮细胞或其他细胞表面的粘附分子可以被内吞进入细胞，也可以脱落下来，进入血液成为可溶性粘附分子。此外某些粘附分子的mRNA存在着不同的剪接形式，其中有的mRNA翻译后可能不表达在细胞表面，而是直接进入血液，成为可溶性粘附分子的另一个重要来源。除血清外，某些可溶性粘附分子还可在脑脊液、BALF、腹水等中出现，反映了局部粘附分子的表达可代谢状态。sICAM-1是血清中与细胞表面ICAM-1同型的蛋白分子，同样具有与淋巴细胞功能相关抗原1结合的活性，可通过与ICAM-1竞争配体而起到调节气道炎症的作
用，sICAM-1的升高反映了气道局部细胞表面ICAM-1表达的上调[5]。
本实验研究证实：抗原激发后哮喘豚鼠BALF中sICAM-1含量显著升高，提示sICAM-1可能参与了哮喘的发病过程，其在哮喘中的作用机制可能是增强EOS的氧化代谢过程，增加其颗粒毒性蛋白的释放，而导致AHR。而经过平喘宁治疗后明显降低，提示平喘宁有明显的抑制气道炎症作用。
LTB4同花生四烯酸其他代谢产物，如PGs、LTA4等类似，主要由中性粒细胞产生。它是一种局部作用的炎性介质，可趋化中性粒细胞，对EOS具轻微趋化作用，体内研究表明LTB4能促使白细胞从血管进入组织间隙。接触LTB4后多核白细胞迅速聚集，稍后便出现EOS的聚集，LTB4还可刺激超氧阴离子分泌及白细胞释放其颗粒成分，并影响B淋巴细胞低亲和力IgE受体的表达。研究表明，虽然LTB4无直接收缩支气管平滑肌的作用，但它具有强大的中性粒细胞和EOS趋化作用，比5HETE强100倍。
本实验结果显示哮喘模型组豚鼠血清中LTB4表达水平较正常组显著升高，提示LTB4水平增高在哮喘的发病中起一定的作用。其原因可能是LTB4促进中性粒细胞在气道的聚集，从而介导一系列的炎症过程。平喘宁各剂量组均能显著降低豚鼠血清中LTB4水平以达到阻止炎性递质释放而治疗哮喘的目的。
实验研究结果表明平喘宁能明显延长哮喘豚鼠的引喘潜伏期，降低哮喘豚鼠BALF中sICAM-1及血清中LTB4水平，提示平喘宁具有平喘作用，而其通过对相关细胞因子的调节而减轻哮喘炎症，降低气道高反应性，可能是本药治疗哮喘的作用机制之一。
【参考文献】
[1] 郭 鹞.人类疾病的动物模型复制[M].北京：人民卫生出版社，1982.235－236.
[2] 陈 奇.中药药理研究方法学[M].北京：人民卫生出版社，2000.1103－1104.
[3] 刘 宏，赵鸣武，耿秋明，等.博本霉素致肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液磷脂组分变化[J].中华结核和呼吸杂志，1993，16(4)：197－201.
小豚鼠范文6
关键词 小儿哮咳喘胶囊 大鼠 小鼠 豚鼠 实验研究
婴幼儿哮喘发病往往以毒为主，毒痰互结，闭阻肺窍，而致哮喘发作。故治疗时应在解毒开肺的基础上止哮平喘[1]。作者曾以解毒开肺为法，应用王烈教授据此研制的小儿哮咳喘胶囊，治疗痰热壅肺型哮喘患儿30例，总有效率86.67%，30例以清肺化痰为法的贝羚胶囊设对照组，总有效率70.00%，经统计学处理，差异有显著性(P
实验材料
动物：昆明种小鼠，体重25±2g；SD大鼠，体重150～200g；豚鼠，200±10g。雌雄各半，均购自吉林大学实验动物部。
药品与试剂：小儿哮咳喘胶囊(本院制剂室)，实验时打开胶囊，用蒸馏水配成所需浓度；贝羚胶囊，实验时打开胶囊，用蒸馏水配成所需浓度；无水亚硫酸钠；苯酚红；氯化乙酰胆碱(Ach)；磷酸组胺(Hist)。
仪器：离心机(北京医用仪器厂)，7550紫外-可见分光光度计(上海分析仪器厂)。
方法和结果
抗炎作用：①大鼠足肿胀法：取SD大鼠40只，雌雄各半，随机分为4组，每组10只，分别灌胃给药。各组给药前均按毛细管放大法测右踝关节以下部位体积作为正常值，连续给药7天，对照组给予同剂量生理盐水，于末次给药30分钟后，于每鼠右后足跖皮下注射3%的甲醛溶液0.1ml致炎，然后分别测量不同时间的足跖容积，以致炎后容积与致炎前容积之差作为肿胀度，并比较各时间点给药组与对照组间的差异，进行统计学处理。结果可知，高剂量组在致炎后1、2、4、6小时的足肿胀度明显低于对照组，又以2、4、6小时差异最显著(P
止咳作用：制备SO2气体，收集于球胆中，用止血钳夹紧，应用时用注射器吸取5ml。取小鼠40只，随机分为4组，每组10只，连续灌胃给药7天，于末次给药1小时后，将小鼠放入250ml的广口瓶内，注入SO2气体，10秒后立即将小鼠取出，观察小鼠咳嗽潜伏期和1分钟内的咳嗽次数。结果，高剂量给药可显著减少小鼠的咳嗽次数，并可显著延长SO2引咳潜伏期，与对照组相比较有显著性差异(P
化痰作用：将小鼠随机分为4组，每组10只。连续灌胃给药7天，于末次给药0.5小时后，分别于腹腔内注射酚红0.1ml(5mg)/10g(体重)。0.5小时后处死动物，剥去气管周围组织，剪下自甲状软骨下至气管分支处的一段气管，放进盛有2ml生理盐水的试管中，再加0.1ml NaOH。用7550紫外-可见分光光度计，测OD值，计算酚红含量，并与对照组比较。结果，观察药高低剂量组与氯化铵组均有增强气管酚红排泄的作用(P0.05)，说明观察药有良好的祛痰作用。
平喘作用：将豚鼠放入喷雾箱中，恒压向箱内喷入2mg/ml Hist 2ml(喷雾时间20秒)，以喷雾结束至豚鼠出现呼吸急促抽搐跌倒的时间作为引喘潜伏期(>150秒者视为不敏感，不予选用)。次日取合格豚鼠20只，分组灌胃给药，连续给药3天，于末次给药30分钟后喷雾引喘，记录喷雾结束至症状出现的时间。结果如表1。
讨 论
上述实验结果表明，小儿哮咳喘胶囊对甲醛致大鼠足踝肿胀及二甲苯致小鼠耳壳炎症均有显著抑制作用，并能显著性抑制二氧化硫所致小鼠的咳嗽反应；对小鼠气管排泄酚红及排痰量有显著促进；明显延长豚鼠引喘潜伏期。提示本品有明显抗炎、镇咳、祛痰、平喘作用。
值得注意的是，因其兼有抗炎活性，可抑制呼吸道炎症，减少渗出，从而能够进一步提高其止咳、平喘效果。上述作用可能是其临床疗效的主要药理学基础。
参考文献