白藜芦醇范文1
【摘要】 目的天然产物白藜芦醇的全合成。方法锂卤交换反应。结果以3，5-二甲氧基苯甲酸为原料，合成了天然产物E-白藜芦醇，总收率为38.6%，产品的结构经1H HMR、高分辨质谱确证。结论该方法具有原料易得，合成路线短，操作简便等优点。
【关键词】 白藜芦醇； 全合成
ChinaAbstract：ObjectiveTo synthesize the E-resveratrol. Methods The lithium-halogen exchange reaction.Results The E-resveratrol was synthesized from 3， 5-dimethoxybenzoic acid. The structure of the target product was confirmed by 1H NMR and HRMS.ConclusionThis method has the advantage of accessible materials， short synthetic method and easy preparation.
Key words：E-resveratrol; Total synthesis
白藜芦醇是一种含有芪类结构的多酚化合物，主要分布在葡萄、虎杖和花生中。近年来发现白藜芦醇具有很强的自由基清除能力和抗氧化能力，并且随着浓度的增加，抗氧化能力增强［1］，能抑制血小板凝结和血管舒张［2］，还具有保持血液畅通，保护肝脏、预防癌症的发生及发展［3］，因此吸引了药物学家和营养师的极大兴趣。由于白藜芦醇在植物中含量低，单纯通过提取分离的方法难以得到足够的量，因此化学合成白藜芦醇具有重要的意义，目前化学合成白藜芦醇的方法不多，主要采用WittigHormer［4］、Perkin［5］和Heck［6］反应，但存在路线复杂，产率不高等缺点。本文作者在参考文献［7，8］的基础上，设计了一条以锂卤交换为关键反应的新合成路线，用简便、易行的方法合成了E－白藜芦醇。产物经高分辨质谱和核磁共振谱得到确认。合成路线如图1所示。
1 仪器与试剂
WRS1B数字熔点测定仪，温度计未作校正，Varian Unit INOVA400/54型核磁共振仪（TMS为内标，CDCl3为溶剂），高分辨质谱HRMS(ESI)由Bruker FTMS测定。实验所用试剂均为分析纯；柱层析硅胶G（200300目）。
2 方法
2.1 3，5二甲氧基苯甲酸甲酯（2）的合成
在室温下，向250 ml四口反应瓶中加入3，5二甲氧基苯甲酸10.0 g (65 mmol) 和丙酮100 ml、在搅拌下加入碳酸钾36.0 g（0.26 mol）、然后加硫酸二甲酯22 ml(0.23 mol) 。反应混合物激烈搅拌回流反应4 h，然后冷却到室温过滤；减压浓缩丙酮，浓缩物中加5 % 氨水50 ml搅拌10 min，再用乙醚 ( 50 ＋ 2×10 ml) 萃取，乙醚层用5 % 的盐酸和饱和碳酸氢钠洗涤，无水硫酸钠干燥。减压浓缩乙醚、粗产品中加甲醇20 mLl溶解，再慢慢滴加10 ml蒸馏水，有大量晶体析出，静置2 h过滤得产品。干燥后得产品3，5二甲氧基苯甲酸甲酯（2）(12.2 g ， 96 %)。Mp：40～42 ℃（文献［4］Mp：38～42 ℃）。
2.2 3，5二甲氧基苯甲醇（3）的合成
在250 ml四口反应瓶中加入3，5二甲氧基苯甲酸甲酯（2）10.0 g ( 51 mmol) 和二甲氧基乙烷（DME）100 ml，在搅拌下加硼氢化钠10.0g ( 0.26 mol)。混合物升温回流，在回流状态下，慢慢加甲醇50 ml，甲醇加毕再回流反应2 h，然后浓缩反应液。浓缩液中加乙醚50 ml和水，然后分液，水、盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓干放置一段时间得类白色固体3，5二甲氧基苯甲醇（3）(7.71 g ， 90 %)。Mp：45～47 ℃（文献［9］Mp：46～47 ℃）。
2.3 3，5二甲氧基苄基溴（4）的合成
在250 ml四口反应瓶中加入3，5二甲氧基苯甲醇（3）5.0 g ( 29 mmol)和二氯甲烷100 ml ，在冰水浴下，缓慢滴加三溴化磷3 ml的二氯甲烷溶液10 ml，30 min加完， 保持0℃反应2 h，再升温到室温反应2 h。然后将反应液倒入冰水中，搅拌、分液、水层二氯甲烷萃取，合并有机层，用水、饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓干，甲醇重结晶得3，5二甲氧基苄基溴（4）(5.14 g ， 75 %)。Mp：69～71℃（文献［10］Mp：68～70℃）。
2.4 2(3，5二甲氧基苯基)1(4甲氧基苯基)乙醇（6）的合成
干燥及惰性气体保护下，在室温条件下，向100 ml三口反应瓶中加THF 20 ml和金属锂0.3 g (43.5 mmol)，然后加萘0.22 g (1.7 mmol)，室温搅拌30 min，悬浮液变成墨绿色。冰浴冷却到20℃，向其中加3，5二甲氧基苄基溴（4）5 g (21.7 mmol)和对甲氧基苯甲醛（5）4.43 g (32.6 mmol)的四氢呋喃溶液10 ml，历时10 min。滴加完毕后，继续搅拌2 h，然后升温到0℃用水10 ml水解，用乙醚( 2×10 ml)萃取，乙醚层用无水硫酸钠干燥。减压浓缩乙醚，柱层析得黄色油状液体化合物2(3，5二甲氧基苯基)1(4甲氧基苯基)乙醇（6）（4.32 g， 69 %）。1H NMR (400 MHz， CDCl3) δ：2.11 (br s， 1H)， 2.872.31(m， 2H)，3.76(s， 6H)， 3.81(s， 3H)， 4.83(t， J = 6.7 Hz， 1H )，6.33(m， 3H)， 6.887.29(m， J = 8.7 Hz ，4H)ppm。
2.5 3，4'，5三甲氧基
1，2二苯乙烯（7）的合成在100 ml 三口反应瓶中加二甲亚砜20 ml和化合物2(3，5二甲氧基苯基)1(4甲氧基苯基)乙醇（6）4.0 g (13.9 mmol)，130℃反应，反应完毕，加醋酸乙酯100 ml，有机层用饱和食盐（3×20 ml）水洗涤，水层用醋酸乙酯( 2×20 ml)萃取，合并有机层，无水硫酸钠干燥，减压浓干得固体，用甲醇水重结晶得白色晶体（7）（3.6 g， 96 %）。Mp：55～56.5 ℃（文献［9］Mp：56.5 ℃）。1H NMR (400 MHz， CDCl3) δ：3.82 ( s， 9H)， 6.37(t， J = 2.1 Hz 1H)， 6.65(d， J = 2.1 Hz 2H)， 6.90(d， J = 8.8 Hz， 2H)， 6.92(d， J = 16.2 Hz， 1H )， 7.05(d， J=16.2 Hz ，1H)， 7.45(d， J = 8.8 Hz ，2H)ppm。
2.6 白藜芦醇（8）的合成
在250 ml四口反应瓶中加化合物3，4'，5三甲氧基1，2二苯乙烯（7）2.0 g (7.4 mmol)和干燥的二氯甲烷100
ml搅拌溶解，冰盐浴降温至15℃，滴加三溴化硼25 ml（1M），滴加毕，继续反应1 h，反应完毕，将反应液倒入300 ml的冰水中，分液，水层用二氯甲烷萃取，合并有机层，有机层用水洗涤，无水硫酸钠干燥。减压浓干，加醋酸乙酯和石油醚重结晶得类白色产品白藜芦醇（8）（1.52g， 90 %）。Mp：255.5～257 ℃（文献［11］Mp：255～258 ℃）。1H NMR (400 MHz， CDCl3) δ：6.12(t， J = 2.1 Hz 1H)， 6.42(d，J=2.1 Hz 2H)， 6.75(d，J=16.2 Hz， 1H)， 6.76(d，J=7.8 Hz， 2H )， 6.98(d，J=16.2 Hz ，1H)， 7.28(d，J=7.8 Hz ，2H)ppm. HRMS(M+H+) calcd for C14H13O3 229.0859; found 229.0866。
3 结果与讨论
3，5二甲氧基苯甲酸甲酯的还原成醇有多种方法，本文选择易于操作、价格低廉的硼氢化钠还原，在二甲氧基乙烷和甲醇作溶剂回流状态下硼氢化钠还原酯基，以90 %的产率得到了3，5二甲氧基苯甲醇，避免了使用价格昂贵的、需严格无水操作的四氢铝锂等方法。
锂卤交换制备2(3，5二甲氧基苯基)1(4甲氧基苯基)乙醇（6）是本全合成的关键反应，它可能的机理是萘和金属锂形成萘锂，然后和卤交换得到金属锂化合物，再与醛亲核加成得到产物（如图2）。
3，4'，5三甲氧基1，2二苯乙烯（7）的合成时，将2(3，5二甲氧基苯基)1(4甲氧基苯基)乙醇在二甲亚砜的溶液中回流脱水，能够定量的得到反式（E）产物，克服了其它方法形成烯的时候有顺反异构两种产物。
4 结论
在催化量萘作用下锂卤发生交换反应，然后和4甲氧基苯甲醛发生亲核加成反应得到关键中间体2(3，5二甲氧基苯基)1(4甲氧基苯基)乙醇（6），然后脱水、脱甲基简便、高效的合成了( E )白藜芦醇，总产率为38.6%。该合成路线起始原料易得，合成路线短、条件温和、操作简便、对环境污染小，具有较高的工业实用价值。
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白藜芦醇范文2
白藜芦醇(3，4，5-三羟基二苯乙烯)是一种多酚类物质，存在于许多植物如花生、葡萄内，其药理价值的发现源于流行病学调查观察到的所谓“法国悖论（French paradox) ”——即法国人有高脂饮食习惯，却伴有较低冠心病发病率。这与日常大量饮用红酒以及红酒中富含的白藜芦醇可能起保护作用有关［1］。由此，白藜芦醇成为近年的研究热点之一。大量研究表明，白藜芦醇具有多种药理作用，如抗菌抗炎以及抗癌保肝的作用，而在心血管系统方面有如抗氧化、清除自由基作用，抑制血小板聚集，调节血脂，防止动脉粥样硬化等多种药理功效。 本文主要从抗氧化、抗细胞凋亡、抗增殖、抗动脉粥样硬化等方面对白藜芦醇的心血管的保护作用及其机制作一综述。
1 抗氧化和自由基清除
氧化应激反应即自由基生成与抗氧化保护作用之间的失衡，可能是心血管疾病的一个重要发病机制。白藜芦醇与多酚类其他化合物一样，具有显著的抗氧化和自由基清除能力。白藜芦醇的体外抗氧化活性和自由基清除能力较低，但是在体内却表现出强抗氧化性，并主要通过诱导NO合成发挥作用，NO 比超氧化物歧化酶(SOD) 对O2- 的亲和性更高，并能与SOD 竞争以清除O2-［2］。在自由基作用下容易发生脂质过氧化，并造成生物膜结构破坏，影响细胞功能，研究表明，白藜芦醇能有效抑制脂质过氧化。Frankel 等［3］最早发现反式白藜芦醇能抑制Cu2+诱导的极低密脂蛋白胆固醇过氧化，进一步研究表明，白藜芦醇较之其他多酚类化合物，如儿茶素、表儿茶精和槲皮素抑制Cu2+诱导的LDL 氧化作用更为明显，主要在于白藜芦醇具有很强的Cu2+螯合能力。另外，白藜芦醇还能增加细胞内抗氧化酶如谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽还原酶和谷胱甘肽-S-转移酶的水平，增强细胞抗氧化能力［4］。白藜芦醇可增加抗氧化酶活性，降低ROS水平，并通过影响胞内Ca［2+］ 浓度和线粒体膜的稳定性，从而抑制线粒体内细胞色素c 的释放.由此推测，白藜芦醇抑制oxLDL引起的血管内皮损伤是通过线粒体通路实现的。Paula 等研究了白藜芦醇 对peroxynitrite(ONOO-)介导的血管内皮细胞毒性及相关作用机制。采用ONOO-处理体外培养的牛大动脉内皮细胞，检测细胞活力和胞内还原型谷胱甘肽（Glutathione，GSH) 的含量。结果显示:用白藜芦醇(1～50 μM) 处理的牛动脉内皮细胞未发生损伤，这可能与白藜芦醇影响了胞内GSH的上调机制有关，GSH水平升高使细胞避免了ONOO- 引起的损伤，表明GSH在细胞存活中起有重要作用。白藜芦醇对GSH的影响提供了一种新的心血管保护作用机制，并可能成为治疗新策略。
2 抗凋亡
据报道，氧化低密度脂蛋白(oxidized lowdensity lipoprotein，oxLDL ) 能够促进血管内皮细胞凋亡通道的激活，包括伴随着细胞色素c 释放的线粒体膜电势的下降和介导细胞凋亡的caspase-3 的释放。一般认为，主要由oxLDL引起的血管内皮凋亡，在动脉粥样硬化的发病初期和发展阶段起到重要作用。因此，抑制血管内皮细胞的凋亡可能阻止或降低血栓的发生。 目前研究表明白藜芦醇可通过抗凋亡作用而保护血管内皮细胞。oxLDL对体外培养脐静脉内皮细胞的毒性作用可诱导细胞凋亡或细胞坏死。oxLDL 破坏了细胞膜对胞内蛋白的渗透性，乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH ) 等从胞质内渗漏出细胞外，引起脐静脉内皮细胞坏死。Ou［5］等的研究结果显示，在氧化应激过程中，活性氧自由基（reactive oxygen species，ROS ) 的生成、Ca2+浓度变化引起的线粒体细胞色素c 释放以及caspase-3 的激活，均可引起脐静脉内皮细胞凋亡，线粒体释放细胞色素c 激活caspase-3， 最终介导细胞凋亡［6］而经白藜芦醇预处理后，这些因素所引起的脐静脉内皮细胞凋亡明显减少。赵文晓［7］等发现白藜芦醇能够剂量依赖性地降低大鼠心肌冠脉结扎后ST 段抬高，降低肌酸激酶(creatinekinase，CK ) 、LDH 活力，缩小心肌梗死面积，降低心肌细胞凋亡指数，抑制凋亡蛋白Fas、Bax 的表达，增强抑凋亡蛋白Bcl-2 的表达，认为白藜芦醇对冠脉结扎诱发的Wistar 大鼠急性心肌缺血具有保护作用，其机制可能与上调Bcl-2 蛋白表达，下调Fas、Bax 蛋白表达，抑制心肌细胞凋亡有关。
3 抗炎症作用
研究表明，白藜芦醇能够显著减少心肌缺血再灌注后炎症介质如可溶性胞内黏附分子（sICAM-1) 、内皮性白细胞黏附分子（sE-selectin) 、血管细胞黏附分子-1 （sVCAM-1) 等的表达。白藜芦醇也能抑制多种激动剂如白介素（IL)-1β、肿瘤坏死因子（TNF)-α、脂多糖等诱导的内皮细胞组织因子和多种细胞因子的表达，并呈剂量效应关系［8］。炎症反应是动脉粥样硬化的病因学说之一，白藜芦醇通过其抗炎作用起到心血管保护作用。已知活性氧（reactive oxygen species， ROS)与体内炎症反应活动密切相关，其通过不同的信号途径引起炎症反应。白藜芦醇通过多种途径抑制ROS的作用。首先，白藜芦醇抑制ROS的产生。通过有效抑制炎症因子刺激时巨噬细胞内诱导型一氧化氮合成酶（induciblenitric oxide synthase， iNOS)的表达，白藜芦醇减少反应性氧化产物的产生［9］。其次，白藜芦醇可以增加抗氧化剂及第二阶段酶的释放，其使髓过氧化物酶和氧化型谷胱甘肽还原酶活性正常化，并增加超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽、谷胱甘肽还原酶类、谷胱甘肽过氧化物酶以及谷胱甘肽S - 转移酶等细胞保护因子，从而增强机体抗氧自由基防御系统［10］。同时，白藜芦醇本身即为活性氧清除剂，能有效清除羟基、超氧化物和金属诱导基团，并对细胞膜脂质过氧化和活性氧导致的DNA 损伤起保护作用。除直接作用于ROS外，白藜芦醇还通过其他途径起抗炎作用。白藜芦醇能抑制前列腺素H 合成酶1的过氧化酶活性， 减少前列腺素的生成。在单核细胞， 10 ～100 μmol/L白藜芦醇减少γ - 干扰素的产生，同时减少了γ - 干扰素引起的由吲哚胺2， 3 - 加双氧酶催化的酪氨酸降解和GTP环水解酶激活的新蝶呤的产生(新蝶呤是激活的单核细胞来源的巨噬细胞的特异性产物，新蝶呤产生和酪氨酸降解可能与细胞凋亡有关)。血红素加氧酶- 1 （heme oxygenase-1， HO-1 )是体内重要的细胞间抗炎机制。Juan等［11］指出，白藜芦醇在较低浓度（≤10 μmol/L )可以经核转录因子κB（nuclear factorκB， NFκB)途径，诱导HO-1 的产生;在≥20 μmol/L时，则降低HO-1 的表达和启动子的活性。而Chen等［10］933-1000证实，白藜芦醇通过Akt/蛋白激酶B以及ERK1 /2信号通路增加Nrf-ARE蛋白水平，从而促进HO-1的产生。高同型半胱氨酸血症是心血管事件的独立危险因子，其与免疫激活有关。最新实验证实， 10～100 μmol/L白藜芦醇可抑制同型半胱氨酸的形成。
4 血管作用
4.1 抑制平滑肌细胞增殖
血管平滑肌细胞增生对动脉粥样硬化的发生具有重要意义，白藜芦醇通过多种途径抑制血管平滑肌的增生。首先，白藜芦醇可抑制DNA 聚合酶。在体外SV40DNA 合成中，白藜芦醇的衍生物——反式3， 5 双甲基- 4 - 羟基芪抑制DNA 聚合酶α和λ。其次， 白藜芦醇(25 μmol/L)可通过影响细胞内p53 和p21 水平而显著影响静止期和增殖期的血管平滑肌细胞，抑制其增殖和分化。白藜芦醇还能增加冠状动脉cGMP /激酶- G，进而抑制磷脂酰肌醇3激酶和促分裂原活化蛋白激酶，从而影响细胞周期起抗平滑肌细胞增生作用。小剂量白藜芦醇（6.25～12.5 μmol/L )抑制血管平滑肌增长，但不通过凋亡;更高浓度白藜芦醇(25 μmol/L)导致激活状态的血管平滑肌凋亡，但对于静止状态的血管平滑肌无此作用。在诱发心血管疾病的内皮源性介质中，21 氨基酸内皮素- 1（endothelin-1， ET-1) 是一个重要的先行分子。内皮素有强烈的收缩血管作用，并能引起血管平滑肌细胞增生，白藜芦醇抑制ET-1 的产生及活性。Chao等［12］证实，血管紧张素Ⅱ引起平滑肌细胞增生、ET-1的表达和细胞外信号调节激酶磷酸化，细胞外信号调节激酶磷酸化进一步促进ET-1的产生，白藜芦醇对这一过程起抑制作用。
4.2 促使血管舒张和上调内皮型一氧化氮合酶(eNOS)
在诱发心血管疾患的内皮源性介质中，21 个氨基酸的内皮素-1 （ET-1) 是一个重要的先行分子。在对人的临床前研究和动物实验中，显示在冠脉痉挛性疾病中血清ET-1 会持续升高，内皮素受体阻滞剂则可以显著减轻这些疾病的症状。白藜芦醇已被发现可作为ET-1 的拮抗剂，可以拮抗ET-1对大鼠的杀伤效应，并能够抑制由ET-1 所致的血压升高。白藜芦醇还可通过逆转ET-1 的激动效应来抑制冠状动脉内皮细胞丝裂素活化蛋白激酶(MAPK) 的活性和核易位。已经证实，氧化应激可增加内皮素的生成和释放以及在血管平滑肌细胞(VSMC) 中的活性，这可解释动脉粥样硬化中的内皮功能不全。这种效应可被白藜芦醇所抑制，白藜芦醇(100 μmol/ L) 可抑制过氧化氢引起的人颈动脉VSMC 中前内皮素原mRNA 的表达， 减少ET-1 蛋白的生成。在高胆固醇血症的兔子模型中，白藜芦醇可减少血浆ET-1 水平，并显著升高NO水平。这些研究结果显示白藜芦醇可改善内皮细胞功能，也是白藜芦醇发挥非酒精依赖性的心血管保护效应的机制之一。
另外一个心血管保护效应机制是白藜芦醇能够影响血管内皮细胞生成NO。短期效应中，NO 具有舒张血管和抗血小板聚集的特性。从长期效应看，NO 可诱导保护心血管系统基因的表达，并能限制致动脉粥样硬化的血浆蛋白进入血管壁。在50～100 μmol/ L 浓度下，白藜芦醇可使得培养的肺动脉内皮细胞eNOS 表达增加3倍，而在10 μmol/ L时没有任何效果。随后的实验［13］发现白藜芦醇在孵化24～72 h 的HUVECs 中以一种浓度和时间依赖的方式上调eNOS mRNA的表达(最高可达2.8 倍)，使得eNOS 蛋白和来自于eNOS 的NO 的产量也同时增加。Wallerath T 等［14］在随后的实验中发现在红酒提取物中，白藜芦醇是最强的刺激eNOS 转录和表达的多酚类物质。红酒能促进eNOS 表达的作用大部分是来源于白藜芦醇，只有少部分是来源于其他多酚类物质的作用。白藜芦醇的这种作用提示，活化的eNOS 水平的升高及随后的内皮NO 的释放可对抗内皮功能紊乱的发生，从而支持了白藜芦醇和多酚类物质对心血管系统的长期保护作用。
白藜芦醇对心血管系统的有益效应可归结为它的抗氧化，抗凋亡，抗炎，血管舒张活性和能够抑制VSMC 或EC 的增生。其具体作用机制有抑制NF-κB信号转导途径的激活，从而抑制其下游一系列有害的的生物活性物质的合成与释放。另外还可抑制MAPK的活性从而抑制细胞增殖。不同的作用机制之间也可能存在着相互协同的作用。在人体内是否存在着白藜芦醇的受体或是确切的作用靶点仍有待于进一步的研究来证实。
虽然许多体外实验和有限的动物模型证实了白藜芦醇是一个强有力的抗氧化剂和能够干扰许多传导通路，但它对人体治疗的有效性尚未确立。直到现在，只有抗氧化和血管舒张效应不仅在体外，而且在动物模型中也得到了证实。今后的实验应更多地利用生理浓度的白藜芦醇和建立更多种的动物模型，随着对白藜芦醇研究的深入，有望为开发利用白藜芦醇提供实验依据，并促进其早日从基础实验走向临床应用，成为治疗动脉粥样硬化、心肌缺血、高血压等严重危害人类健康的心血管疾病的有效药物。
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白藜芦醇范文3
【关键词】 白藜芦醇；全细胞膜片钳；钙电流
Effects of resveratrol on Ltype calcium current in isolated ventricular myocytes of guinea pig
【Abstract】 AIM: To investigate the effects of resveratrol on the Ltype calcium current (ICaL) in isolated ventricular myocytes of guinea pig. METHODS: Single ventricular cell was obtained from healthy guinea pig heart using enzymatic dissociation methods. The wholecell patch clamp was used to record the ICaL following the administration of resveratrol at 1, 50, 100 μmol/L. RESULTS: ① Resveratrol reduced the ICaL in a concentrationdependent manner, but it had no effect on IV shape of ICaL. ② Resveratrol markedly shifted the steadystate activation curve of ICaL to the right, and V1/2 value increased from (-18.97±4.08) mV in control to (-15.97±4.13) mV in the presence of resveratrol （n=7, P=0.02）, the κ value from (3.64±0.56) to (3.82±0.60) (n=7，P=0.67). ③ Inactivation curve of ICaL was not affected significantly. ④ The time constant of reactivation of ICaL was reduced from (98.50±9.00) ms to (54.53±4.27) ms (n=6，P=0.000) by resveratrol. CONCLUSION: Resveratrol inhibited the Ltype calcium channel, mainly acting on the activity and recovery processes.
【Keywords】 resveratrol；wholecell patch clamp；calcium current
【摘要】 目的：研究白藜芦醇对正常豚鼠心室肌细胞L型钙电流（ICaL）的影响. 方法：采用全细胞膜片钳技术,记录不同浓度白藜芦醇作用前后对ICaL的影响. 结果：①白藜芦醇呈浓度依赖性阻断ICaL,但对激活电位、峰电位、反转电位均没有影响；②白藜芦醇使ICaL稳态激活曲线右移，V1/2由对照的（-18.97±4.08） mV变为（-15.97±4.13） mV （n=7，P=0.02），κ由（3.64±0.56）变为（3.82±0.60）（n=7，P=0.67）；③对失活曲线无影响，不改变ICaL失活特性；④白藜芦醇使ICaL失活后再恢复时间常数τ缩短，从（98.50±9.00） ms变为（54.53±4.27） ms（n=6，P=0.000）. 结论：白藜芦醇对ICaL有阻断作用,主要作用于钙通道激活和恢复过程.
【关键词】 白藜芦醇；全细胞膜片钳；钙电流
0引言
白藜芦醇化学名为3,5,4′三羟基反二苯代乙烯(3,5,4′ trihydroxyrans stilbene)，是一种主要存在于葡萄皮、花生中的多酚类植物抗毒素. 现认为它是适量饮用葡萄酒有利于心血管健康的主要作用因子［1］. 大量研究［2-3］发现白藜芦醇对心肌缺血－再灌注损伤有保护作用；对血管有广泛的舒张效应［4］;能抗动脉粥样硬化，防治冠心病［5］. 但其对心肌细胞离子通道的作用少见报道，我们采用膜片钳技术研究白藜芦醇对心室肌细胞ICaL的影响.
白藜芦醇范文4
关键词：白藜芦醇；小鼠；免疫；抗氧化
中图分类号：G804.7文献标识码：A文章编号：1007-3612(2008)09-1230-03
The Effect ofResveratrol on Immune and antioxidative functions of Mice
ZHUO Jie-xian1，ZHANG Lin2，YU Xie-hao3
(1.Department of PE and Health Education; Liuzhou Teachers College; Liuzhou Guangxi ,China 545004;
2.Institute of Physical Education,South China Normal University, Guangzhou, Guangdong，510631；
3.Huaihua Coollege;Huai huaHu nang,China 418008)
Abstract:Objective : The effects of resveratrol on immune and antioxidative functions of micewere observed. Methods: Thirty healthy male Kunming mice were selected and randomly divided into 3 groups with 10 micein each group: control group,exercise group;exercise + resveratrol group. The swimming training is 6 weeds,carry on strength to exhaust and swim 6 weeks later. Measure PhysicalPerformance ,the ability to engulf chicken's erythrocyte of little mouse's abdominal cavity's macrophages, calculate the thymus and spleen index,the activity of SOD and the content of MDA. Results:The group of exercise + resveratrol obviously lengthen theduration of exhaustive swimming, increase the ability of engulfing of abdominal cavity's macrophages compared with exercise group,The impact on spleen index, thymic index is obvious improve. The activity of SOD was increased ,but the content of MDA was decreased. Conclusion: Resveratrol could improve the immune and antioxidative functions of mice.
Key words: Resveratrol； mice；mmune；antioxidative function
白藜芦醇（Resvertrol,Res）化学名称芪三酚，结构为3，5，4’三羟基二苯乙烯(3，5，4’-trihydroxystibene)，分子式C14H12O3，为多酚类物质，是葡萄属植物产生的一种植物抗毒素,是天然的抗氧化物和自由基廓清剂。目前至少发现已经在70多种的植物中发现了白藜芦醇。随着对白藜芦醇研究的深入，人们发现它具有多种药理活性，包括抗氧化活性，保肝、抗炎、抗肿瘤、调节血脂、抗病原微生物等多种有益于人体的生物学作用［2-4］。在运动医学领域有着广阔的应用前景［5,6］，为了观察白藜芦醇对运动免疫的调节作用，本实验采用小鼠游泳训练的方法复制疲劳模型，探讨白藜芦醇对运动小鼠免疫功能和抗氧化功能的影响，为科学的体育训练提供实验依据。
1材料与方法
1.1实验动物与药品
1.1.1实验动物采用健康雄性30只5周龄小鼠，体重（24±5 g），由中山大学动物实验中心提供。饲养条件：所有动物均以国家标准动物饲养常规饲养，分组饲养每只每天进食约5 g，自然昼夜律变化光照，室温（28±1）℃。相对湿度40%～60%，定时通风换气，每天对动物饲养室进行半小时紫外线照射。
1.1.2药品白藜芦醇购自Sigma公司，纯度达98%。
1.2实验仪器721分光光度计（上海第三仪器厂）、SK-1快速混匀器（上海医科大学仪器厂），7DC-500B低速冷冻多管离心机（上海安亭科学科学仪器厂）、MP120-1电子天平（上海医科大学仪器厂），SASP实验动物游泳池，生物显微镜。
1.3方法
1.3.1动物分组与游泳训练方案动物分组：把30只小白鼠称重编号，再按体重随机分成3组，每组10只。对照组、运动组、运动+白藜芦醇组。运动组灌胃生理盐水，白藜芦醇组灌胃白藜芦醇提取物10 mg/kg体重。白藜芦醇均用0.2%羟甲基纤维钠配制。在每次游泳前2 h灌胃，灌胃量按小鼠体重决定。
游泳训练方案：运动组和白藜芦醇组小鼠在实验动物游泳池中进行游泳训练，水流动速度3.5转/min，水深40～50 cm，每天游泳训练2次，水温32±2℃，游泳时间从20 min开始，每隔一天递增5 min，直至第6周每次游泳时间增为90 min。游泳训练共6周，每周训练5 d，每天游泳2次，时间为早上9：00和下午16：00开始。 第6周的最后1 d,3组大鼠均进行体重及最大游泳时间的测定，以大鼠沉到水底6 s内不再游出水而为止。
1.4指标测定
1.4.1腹腔巨噬细胞吞噬功能的测定鸡红细胞制备：从鸡翅膀下抽取静脉血4 mL，肝素抗凝，2 000 r/min离心8 min去血浆。再用0.90%Nacl溶液洗涤，再次离心，弃去上清液，留下红细胞，重复洗涤3次。
Hanks液的制备：甲液：1） Nacl：40 g，MgSO4.7H2O：0.5 g，Mgcl2.6H2O: 0.5 g双蒸水定容至225 mL。
2） Cacl2 0.7 g 双蒸水定容到25 mL。
3） 将（1）（2）混合加氯仿0.5 mL。
乙液：NaHPO4．12H2O 0.76 g，KH2PO40.3 g，酚红0.1 g，葡萄糖0.5 g双蒸水定容至250 mL加录仿0.5 mL。
应用液：贮存液甲液：乙液：双蒸水=1：1：18，85℃～90℃无菌20 min 4℃保存1个月，使用前用3.5%的NaHCO3缓冲，PH至7. 2 。
小鼠腹腔注射5%可溶性淀粉1.5 mL/只，3 d后，于取材前3 h腹腔注射5%鸡红细胞悬液1.5 mL/只，取材时腹腔再注射Hanks液1.5 mL/只，然后轻柔腹部数次，5 min后取腹腔内液于试管内，置于37℃水浴箱内孵育30 min。然后从每个试管里取1滴于载玻片上，推平成膜状，晾干，wrights染色6 min，再用自来水漂洗，晾干后生物显微镜（×1000）观察。每一张玻片观察100个巨噬细胞，计算吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数和被吞噬的鸡红细胞个数，以吞噬百分率表示。吞噬百分率：吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/100个巨噬细胞×100%。
1.4.2胸腺指数和脾脏指数小鼠处死前称体重，处死后取其脾脏和胸腺并分别称重，计算脾脏指数和胸腺指数［7］。
脾脏指数=脾脏重量/体重（mg/g） 胸腺指数=胸腺重量/体重（mg/g）
1.4.3超氧化物歧化酶(SOD）丙二醛(MDA}的测定严格按照南京建成生物工程研究所提供的试剂盒说明操作。
1.5统计学处理实验结果用SPSS 11.5进行统计分析，计量以S表示，采用秩和t检验进行显著性分析。
2结果
2.1各组小鼠脾脏指数、胸腺指数、腹腔巨噬细胞吞噬率检测结果（表1）脾脏指数白藜芦醇组与运动组比较显著增加（P
2.2超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛( MDA)、力竭游泳时间检测结果（表2）白藜芦醇组血清超氧化物歧化酶(SOD)活性与运动组比较显著增加（P
3讨论
Nieman曾提出，日常进行30 min左右的中等强度运动有利于健康，而超过90 min的大负荷训练将使免疫功能出现不利的变化，关于运动对免疫系统及其功能的影响大致可归纳两个方面，中等强度适量的运动能激活免疫系统，并提高免疫功能，而剧烈过量的运动则抑制免疫功能。Pedersen把这一免疫功能的抑制期称“open window”期，在这一特殊时期各种致病因子很容易进入机体内，引起机体感染［8,9］。预防免疫机能下降是运动性疲劳研究中需着重解决的问题之一。本实验使小鼠进行疲劳性训练，观察疲劳小鼠免疫功能的变化及白藜芦醇的作用。
3.1白藜芦醇对运动小鼠免疫器官的影响胸腺和脾脏属于机体兔疫器官，在T细胞发育、成熟和T. B细胞发挥免疫监控过程中发挥重要作用。研究表明过量运动会损伤机体免疫器官，导致脾脏和胸腺重量降低，并发生结构的变化，使器官的免疫反应降低。研究表明，白藜芦醇具有很明显的增强小鼠体液和细胞免疫功能的作用，抑制炎症发生［10］，可通过IL-6，NK细胞，CD4/CD8，CD4(+)，CD25(+)从而发挥免疫调节和抗肿瘤作用［11,12］。本研究亦显示，白藜芦醇组与对照组比较，其胸腺指数和脾脏指数无显著性差异（P＞0.05），白藜芦醇组与运动组对比，运动组胸腺指数、脾脏指数均小于白藜芦醇组，具有显著性差异（P
3．2白藜芦醇对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率的影响巨噬细胞是由外周血单核细胞占血细胞总数的1%～3%，在血液中仅存留几个小时至10个小时，然后穿过血管细胞移动至全身组织器官发育而成。巨噬细胞可吞噬、杀伤和消化微生物等抗原生物质，是机体非特异性免疫的重要组成部分，同时在特异免疫应答的各个阶段也起重要作用。
本实验通过测定白藜芦醇对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率的影响，结果表明，白藜芦醇对巨噬细胞功能具有免疫调节作用。白藜芦醇能够提高免疫受抑小鼠的细胞、体液免疫应答水平，调节细胞因子分泌，从多方面有效地增强免疫功能［13,14］。由表1可知，白藜芦醇组与运动组比较，腹腔巨噬细胞的吞噬能力明显增高，差异显著（P
3.3白藜芦醇对抗氧化能力和运动耐力的影响研究证明，长时间运动后体内氧自由基产生增多，抗氧化能力减弱是导致运动性疲劳和影响恢复的原因之一。SOD是体内清除自由基的关键酶，检测SOD活性高低，可间接反映机体清除自由基能力，MDA是自由基攻击生物体的降解产物，MDA生成的多少可间接反映组织的损伤程度。Cenesiz S,et al［16］研究发现，白藜芦醇可明显升高胆道阻塞大鼠抗氧化酶SOD, CAT和 GSH-PX活性。Wang GY,et al［17］发现，白藜芦醇可缓解阿霉素引起的心肌损伤，剂量依赖性地明显升高SOD活性，下调MDA和NO 含量。本实验结果表明：白黎芦醇可提高运动小鼠血清SOD含量，降低MDA水平，因此能加快自由基的清除，具有较强的抗氧化能力，说明白黎芦醇能够抵抗由自由基及其代谢产物引起的脂质过氧化而导致的过氧化损伤。在观察小鼠力竭性游泳运动能力的实验中发现，白藜芦醇组的力竭性游泳时间明显长于运动组和对照组，说明白藜芦醇能有效提高小鼠力竭性运动能力，并随着时间的延长，抗疲劳作用会更明显。
4总结
1) 白藜芦醇有助于提高运动小鼠的脾脏指数、胸腺指数，提高腹腔巨噬细胞的吞噬能力。因此，白藜芦醇对运动小鼠的免疫调节功能具有良好的影响。2) 白黎芦醇可提高运动小鼠血清SOD含量，降低MDA水平，因此能加快自由基的清除，具有较强的抗氧化能力。3) 白藜芦醇能明显延长小鼠力竭性游泳时间，因而具有明显的抗疲劳作用。
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白藜芦醇范文5
【摘要】目的评价白藜芦醇在紫外线辐射（ultraviolet radiation， UVR）所致皮肤损伤中的作用。方法正常皮肤在白藜芦醇和其药物载体基质的干预下经设计剂量紫外线照射后，将各组样本比较。结果白藜芦醇组与自身空白对照组比较，豚鼠皮肤外观及各层组织未见明显差异；经过同样剂量紫外线照射，基质对照组皮肤外观及各层皮组织结构均可见显著改变。结论研究初步表明白藜芦醇具有抗紫外线所致皮肤损伤特性。
【关键词】紫外线；白藜芦醇；皮肤；损伤
【中图分类号】R148 【文献标识码】A【文章编号】1004-4949（2013）07-10-02
白藜芦醇即均-3，5，4’-三羟基二苯乙烯（resveratrol，trans-3，5， 4'-trihydroxystilbene，stilbene）又称作三羟基芪，其存在于葡萄、落花生、虎杖等等许多天然植物果实中。我们采用随机配对，对白藜芦醇抗紫外线损伤的药学作用进行了实验动物学研究。实验动物为豚鼠，经皮肤进行紫外线照射，观察皮肤随时间组织变化情况。予以分析讨论。
1 材料与方法
1.1 实验动物： 纯白豚鼠500 ～ 600 g，雌雄各半，购自吉林大学动物部（动物号：2003-0007）。
1.2 光源： 采用保健紫外灯，功率30 W，含长波紫外线（UVA）和中波紫外线（UVB），购自上海富视灯泡厂。DRC-100X紫外线强度计由北京博朗特科技有限公司提供。JY92-Ⅱ超声波均质机购自宁波科生仪器厂。
1.3 白藜芦醇： 由长春安泰生命科学研究所提供，基质为市售冷霜，实验时，将其配成含白藜芦醇10%膏剂，经过超声和真空搅拌均质处理。药物基质对照组涂有制备白藜芦醇软膏所用配方其余组份。自身对照组避光防晒处理。
1.4 动物处理： 参照朱愉[1]有关研究，豚鼠随机分成白藜芦醇干预组、药物基质对照组和自身对照组。实验动物右側背部照射，另一侧为遮盖侧（即自身对照组）。照射前先将豚鼠背部照射侧皮肤剃毛，暴露3 cm × 5 cm范围。均匀涂布。静置5 min后，在距离动物皮肤10 cm处进行紫外线光源照射。第一次正式照射前，先测定最小红斑及光照射强度。开始每日1次，每次照射量：UVB为0.168 J/cm2，UVA为0.276 J/cm2，以后视皮肤对最小红斑剂量适应情况逐渐增加。照射60 d后，乙醚经呼吸道麻醉，即刻取两组背部对应双侧皮肤，进行组织学检查[1～3]。观察皮肤色泽、粗糙变硬程度、弹性及脱屑情况。
1.5 组织学检查[3]：
将取下的皮肤用10%中性福尔马林固定、石蜡包埋和切片，HE染色（观察表皮厚度改变）、Van Gieson（VG）胶原纤维染色（观察、比较各组间真皮层胶原纤维量变化）和过碘酸-雪夫反应（PAS）染色（观察、比较各组间基底膜厚度、均匀程度及结构完整性）。
2 结果
皮肤组织观察
2.1 外观表现：
肉眼观察可见经紫外线照射豚鼠皮肤后，药物对照组1周后可见照射皮肤轻度红斑形成，尔后随累积剂量增加肤色渐渐加深，出现表皮增厚、脱屑、粗糙变硬、失去光泽及弹性等一系列皮肤老化症状。白藜芦醇组和自身对照组则无明显异常改变。
2.2 表皮厚度：
HE染色切片显示，白藜芦醇组、自身对照组豚鼠皮肤较薄，由基底层、棘层、粒层和角质层组成，其中棘细胞常散在分布。真皮内主要细胞有成纤维细胞和巨噬细胞。药物基质对照组表皮呈中度增厚，且见少量炎细胞浸润。
2.3 真皮浅层成熟胶原纤维量：
VG染色切片显示，白藜芦醇组和自身对照组皮肤的真皮血管壁较薄，血管充盈，由结缔组织及毛发、皮脂腺等皮肤附属器官组成，胶原纤维是真皮结缔组织的主要成分，呈束状排列，在腺管周围，纤维纤细且排列疏松。药物对照组显示真皮浅层胶原纤维染色减弱，纤维变细且排列稀疏，提示成熟胶原纤维减少。
2.4 基底膜厚度：
PAS染色显示，白藜芦醇组和自身对照组镜下无明显变化。药物基质对照组表皮与真皮交界处为基底膜带， PAS阳性物质增多，基底膜带呈不规则增厚，断裂。
3 讨论
白藜芦醇的药用价值近年来受到国内外广泛关注[4]，作为一个手性天然药物，深入研究开发其药学性质符合中药现代化的发展要求。本文实验结果初步表明，白藜芦醇软膏具有很好的抗紫外线辐射所致皮肤损伤的作用。由于地球环境质量的恶化，地球暴露在越来越高的紫外线辐射剂量下，皮肤日光性损伤甚至皮肤癌变的危险因素增高[5]。为及时改善职业性室外作业人员的健康保护措施，研制更有效的抗紫外线所致皮肤损伤药物显得尤其迫切。白藜芦醇广泛存在于葡萄籽皮、岳桦树叶等天然植物中，本文提示，其抗紫外线所致皮肤损伤的药用性质，具有一定科学价值。
参考文献
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白藜芦醇范文6
[关键词] 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体；白藜芦醇；PC-3；凋亡
[中图分类号] R285 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）12（c）-0008-04
前列腺癌是严重威胁男性健康的肿瘤之一，发病率居世界肿瘤第六位。虽然内分泌治疗可以使大多数患者的病情得到控制和改善，但绝大多数患者会发展为激素抵抗性前列腺癌，患者生存率较低。因此，寻找有效的治疗手段延长此类患者的生存期，成为目前前列腺癌治疗的有效途径。
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand，TRAIL）属于肿瘤坏死因子超家族成员，能够高特异性地诱导肿瘤细胞的凋亡，且对正常组织细胞没有作用[1-4]，因而成为肿瘤生物学治疗新的热点。白藜芦醇（Resveratroi，Res）属多酚类化合物，研究发现，其不仅具有抗炎、抗动脉粥样硬化、抗氧化等作用，还可抑制乳腺癌、肝癌、肺癌等多种肿瘤细胞的生长[5-9]。本实验利用人前列腺癌细胞PC-3，观察联合应用Res和TRAIL蛋白对PC-3细胞的凋亡情况，证实Res能够促进TRAIL对PC-3细胞的凋亡作用。
1 材料与方法
1.1 材料
人前列腺癌细胞PC-3购自上海中科院细胞库；Res购自天津迈迪瑞康公司；重组人TRAIL蛋白购自TEPROTEH公司；AnnexinV/PI凋亡检测试剂盒购自天根生物公司；CCK8检测试剂盒购自碧云天公司；caspase-8、caspase-3活性检测试剂盒购自碧云天公司；其他试剂为国产分析纯。
1.2 方法
1.2.1 CCK8检测细胞增殖情况 将处于对数生长期的PC-3细胞以5×104/ml接种于96孔板，首先确定Res的用药浓度，分别加入Res，浓度为12.5、25、50、100 μmol/L；TRAIL蛋白组每孔加入TRAIL蛋白，浓度分别为25、50、100、200 ng/ml；联合用药组加入Res 50 μmol/L后，每孔再分别加入上述浓度TRAIL蛋白。于细胞培养箱培养24 h后，每孔分别加入CCK8试剂各10 μl，酶标仪检测OD值。以未处理的细胞作为正常组，以培养基作为空白组。细胞增殖率%=（实验组OD值-空白组OD值）/（正常组OD值-空白组OD值）×100%。
1.2.2 流式细胞术检测细胞凋亡情况 将PC-3细胞以2×105/ml接种于6孔板，培养12 h后，TRAIL蛋白组加入TRAIL蛋白100 ng/ml；联合用药组加入Res 50 μmol/L后加入TRAIL蛋白100 ng/ml，24 h后收集细胞，具体操作步骤按照AnnexinV/PI凋亡检测试剂盒说明书进行，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。
1.2.3 caspase-8、caspase-3活性检测 将PC-3细胞以2×105/ml接种于6孔板，培养12 h后，单独应用TRAIL蛋白组加入TRAIL蛋白100 ng/ml；联合用药组加入Res 50 μmol/L后加入TRAIL蛋白100 ng/ml，12 h后收集细胞，分光光度法检测caspase-8和caspase-3活性，具体操作步骤按试剂盒说明书进行。
1.3 统计学处理
采用SPSS 16.0统计学软件进行数据分析，组间两两比较采用q检验，以P
2 结果
2.1 Res增强TRAIL蛋白对细胞增殖的抑制作用
Res组细胞CCK8实验结果显示，当Res浓度为50 μmol/L时，增殖率为（72.61±4.41）%，Res浓度为100 μmol/L时，增殖率为（70.16±3.73）%，较前差异无统计学意义（P>0.05）（表1）。TRAIL蛋白组的实验结果显示，当TRAIL蛋白的浓度为100 ng/ml时，增殖率为（69.05±6.97）%，而TRAIL蛋白浓度200 ng/ml时，PC-3细胞的增殖率为（67.72±5.68）%，较前差异无统计学意义（P>0.05）。当TRAIL蛋白浓度为100 ng/ml时，联合用药组PC-3细胞增殖率为（38.70±2.43）%，与TRAIL蛋白组相比，差异有统计学意义（P
2.2 Res促进TRAIL蛋白诱导的凋亡作用
2.2.1 流式细胞术检测结果 TRAIL蛋白组PC-3细胞的凋亡率为（34.86±1.25）%，联合用药组PC-3细胞的凋亡率升高至（70.55±2.90）%，差异有统计学意义（P
2.2.2 caspase-8、caspase-3活性检测试剂盒结果 TRAIL蛋白组caspase-8、caspase-3活性升高，联合用药组升高更明显，与TRAIL蛋白组相比，差异有统计学意义（P
3 讨论
前列腺癌为常见的恶性肿瘤，且发病率逐年上升，特别对晚期的前列腺癌目前缺少有效的治疗方法，因而，寻求新的治疗手段是目前急需解决的问题。应用有效药物促进肿瘤细胞凋亡是目前治疗肿瘤的重要途径之一，也是前列腺癌治疗的关键靶点。
TRAIL通过与细胞表面的TRAIL受体特异性结合发挥促凋亡作用[10-11]，但有些肿瘤细胞TRAIL受体表达量较低而限制了TRAIL蛋白的促凋亡作用的发挥，因而寻找和应用能够提高TRAIL蛋白促凋亡作用的药物使之能够更好地发挥抗肿瘤作用[12]，成为抗肿瘤治疗新的突破点。
Res的生物学作用非常广泛，除具有强大的抗炎、抗氧化作用外，还对肿瘤的发生发展有明显的抑制作用[13-17]，但具体机制尚不清楚，且由于Res具有雌激素样活性，因而在前列腺癌的治疗中备受关注。已有研究结果表明，Res能够促进TRAIL蛋白对人肝癌细胞的凋亡作用[18]，因此，本研究通过实验证实Res是否对TRAIL蛋白诱导的人前列腺癌细胞凋亡具有促进作用。
实验结果显示，Res能够抑制PC-3细胞的增殖，且存在剂量依赖，当Res浓度为50 μmol/L时，作用较为明显，浓度继续增高，对细胞的增殖抑制作用不再增加，因而选用50 μmol/L为联合用药组Res的用药浓度。TRAIL蛋白组的实验结果表明，随着TRAIL蛋白浓度增高，PC-3细胞的增殖率降低，在TRAIL蛋白浓度达到100 ng/ml后，对细胞增殖的抑制作用不再提高，因而联合用药组的TRAIL蛋白浓度选用100 ng/ml。在TRAIL蛋白浓度相同的情况下，联合用药组的细胞增殖率明显低于TRAIL蛋白组，说明Res能够加强TRAIL蛋白对细胞的增殖抑制作用。流式细胞术的检测结果同样显示，Res能够显著提高TRAIL对PC-3细胞的凋亡作用。由于TRAIL蛋白是通过与死亡受体结合，活化caspase-8，继而引发caspase级联反应，最后激活下游凋亡执行分子caspase-3而引发凋亡[19-20]。因此，本实验进一步检测了caspase-8和caspase-3的活性，结果显示，与单独应用TRAIL蛋白相比，联合用药组caspase-8和caspase-3的活性明显升高，进一步证实Res可以提高TRAIL对PC-3细胞的凋亡作用，为前列腺癌的治疗提供了新的思路和实验基础。
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