梅毒血清学范文1
doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2009.20.228
材料与方法
试验材料:2008年以来在我院性病门诊就诊的梅毒患者治疗前的血标本83 份。诊断依据GB 15974-1995梅毒诊断标准及处理原则。
试剂与仪器:TRUST试剂盒,TPPA试剂盒,ELISA试剂盒。酶标仪,洗板机。
试验方法:TRUST、TPHA、ELISA的检测均严格按使用说明书操作。每份标本同时用 TRUST、TPHA、ELISA三种方法进行测定。同时进行室内质控。还用卫生部2008年室间质评作为标准,来保证结果可靠性。
统计学处理:使用SPSS10.0软件进行统计。TPPA滴度与TP-ELISA S/CO值采用相关系数检验。
结 果
TRUST试剂检测83例梅毒血清,阳性16例,阴性67例,阳性率19.2%。两种特异性抗体检测结果,TPPA法测定83例梅毒血清,77例阳性。6例阴性,阳性率92.7%。ELISA法测定83例梅毒血清,79例阳性,4例阴性,阳性率95.1%。TPPA与TP-ELISA方法比较,P>0.05,两种方法无统计学差异。TRUST与TP-ELISA,TPPA两种方法比较,P
讨 论
ELISA是检测梅毒最常用的方法,属于特异性梅毒血清学试验。ELISA阳性的标本,表明标本中含有梅毒特异性抗体,是感染的标志。双抗原夹心ELISA螺旋体特异性抗体其结果为客观读取,易于保存,可以自动化、标准化、大批量同时检测,工作中对ELISA的室内质量控制也有更多的经验,故更宜采用。
TRUST是非特异性梅毒血清学试验的常用方法,但如果RPR滴度很低,低于1:4以下,不排除假阳性的可能,因为一些年老人、感冒、风湿病等都可能导致假阳性的现象. TRUST法为非特异性试验,存在一定的假阳性或假阴性结果,不易作为梅毒筛选试验,以免引起漏诊。TRUST阳性的患者往往是梅毒现症感染者,临床上即可开展治疗,并且随成功的治疗滴度逐渐下降,可以作为疗效观察的指标。
TPPA是梅毒的确认试验,检测特异性抗体,常用于筛检阳性标本的确认,具有特异性强、敏感性高,血清、血浆皆可用于检测的特点。但其结果为主观判断,不易保存,出具滴度结果时成本较高,反应时间较长,最少需要2小时以上,对操作人员的水平要求较高,不适于大批量的筛选试验。
ELISA阳性、TRUST阴性的患者,一般为梅毒既往感染者。一般说,如果RPR和TPPA/TPHA两个阳性,诊断成立,而ELISA法具有较好的特异性和敏感性,也有一定假阳性。本文有2例老年手术患者,ELISA阳性、S/CO值在灰色区,TRUST,TPPA都为阴性,结合临床提示ELISA为假阳性。本文的数据反映:ELISA与TPPA的检测结果具有较高的一致性(P>0.05),且无假阴性结果。TRUST法与TPPA法检测结果差异有统计学意义(P0.05)。故作者常规检测梅毒血清学试验的常方法ELISA和TRUST法。阳性标本再用TPPA法进行确定。
参考文献
梅毒血清学范文2
【关键词】 孕妇; 新生儿; 梅毒
18 cases of maternal serologic analysis
SONG Yuping, ZHANG Junqiang, CHAI Yinzhu
Department of Urology, the Central Hospital of Baotou City of Inner Mongolia, Baotou 014040, China
【Abstract】 Objectives: Understanding the treatment of syphilis in pregnant women and newborns. Methods: Collecting 2009 in our delivery of maternal serologic examination results, and serology exception of pregnant women and newborns to check the medical treatment cases for analysis. Results: Syphilis serology total 18 cases of abnormal pregnancy, maternal 2.8% over the same period, in which the acceptance of benzathine penicillin therapy in 10 cases, 66.6%. 16 neonates receiving TRUST checks, you should check the 88.9, 4 cases of TRUST-positive, but neither high titer had mother titer. Conclusion: Syphilis infection in pregnant women has an increasing trend, but formal treatment rate is low. We should strengthen antenatal clinic screening and treatment for syphilis. Syphilis in pregnant women should be tested by the newborn screening and be treated.
【Key words】 Pregnant women; Newborn; Syphilis
梅毒自上世纪80年代在中国重新流行后,发病率呈持续升高趋势,已构成严重的公共卫生问题。胎传梅毒的出现更加引起人们对梅毒问题的广泛关注。孕妇感染梅毒,可通过胎盘垂直传播给胎儿,也可感染胎盘导致胎盘功能重障碍,导致流产、死胎、死产、非免疫性水肿、胎儿宫内窘迫、新生儿围产期死亡或娩出先天梅毒胎儿,这些对孕妇本身及新生儿的健康都构成严重的危害。本文分析了2009年在我院住院的孕妇梅毒血清学检查情况,以便更好了解孕妇感染梅毒情况及感染梅毒后对妊娠结局的影响,现将结果报告如下。
1资料和方法
收集2009年在我院住院分娩的孕产妇资料,包括一般人口统计学资料、梅毒血清学检查结果等。非梅毒螺旋体试验阳性或梅毒螺旋体试验阳性的孕妇除收集血清学检查结果外,同时收集其治疗情况及新生儿梅毒血清学检查结果等。
梅毒血清学检查使用的非梅毒螺旋体试验为甲胺红不加热血清试验(TRUST),梅毒螺旋体试验为梅毒螺旋体抗体明胶凝集试验(TPPA)。
孕妇梅毒定义为初次进行梅毒检测,且TP-PA为阳性的孕妇。
2 结果
2009年在我院产科分娩孕妇共640人,分娩前全部行梅毒血清学筛查,其中诊断为孕妇梅毒18例,占住院分娩人数的2.8%。
2.1梅毒血清学检查异常孕妇情况
18例TPPA阳性的孕妇,年龄17~39岁,平均26.7岁。18名孕妇均进行了TRUST检查,其中17例阳性,1例阴性。TRUST滴度在1∶4及以上者占孕妇梅毒的38%,其中4例TRUST滴度1∶4,滴度为1∶8、1∶6及1∶32各1例。
2.2治疗情况
10例孕妇接受苄星青霉素治疗,占应接受梅毒治疗的66.6%。4例接受非苄星青霉素治疗,其中2例罗红霉素治疗, 2例头孢曲松钠治疗。4例未接受治疗,占22.2%。
2.3新生儿情况
16例新生儿接受TRUST检查,占应检查数88.9%。TRUST阳性4例。其中2例新生儿TRUST滴度为1∶4,这2例新生儿母亲滴度分别为1∶32和1∶64。16例接受TPPA检查,阳性14例(87% ),阴性2例。在接受苄星霉素治疗的10名孕妇中, 9例新生儿进行了TRUST检查, 4例TRUST阳性, 6例TRUST检查阴性,占检查总数的66.7%。
3 讨论
梅毒是由苍白密螺旋体引起的慢性全身性疾病,早期主要表现为皮肤黏膜损害,晚期能侵犯血管神经系统等重要脏器。梅毒孕妇还能通过胎盘将病原体传给胎儿引起流产、早产、死胎或娩出先天性梅毒儿[1,2]。梅毒螺旋体感染胎儿后可广泛侵犯胎儿内脏、骨骼及皮肤黏膜,故妊娠合并梅毒可引起流产、死胎、早产、先天性梅毒等[3]。目前我国取消强制性婚检且早期梅毒的病征不易觉察,因此近10年来,年轻妊娠合并梅毒患者不断增加,多未获得早期治疗,通过胎传的危险性增大[4]。妊娠合并梅毒常导致流产、死胎、畸胎、死产、早产及先天性梅毒儿出生,严重威胁孕妇及围产儿健康。
2009年在我院分娩的640例孕产妇中,18例梅毒血清学检查异常,与广东等地相比,梅毒血清学阳性率偏高,但阳性率低于非洲国家产前门诊的梅毒血清学阳性率[5]。绝大多数妊娠合并梅毒患者无明显临床表现,以潜伏梅毒多见,只能靠血清学检查发现,本资料中18例均为隐性梅毒,这可能与孕期处于暂时性免疫抑制状态有关,也可能与目前抗生素的广泛使用或接受过青霉素治疗等有关,故受孕后筛查和规则治疗是预防先天性梅毒的重要举措。妊娠一旦确认,梅毒的筛查应随即进行。在高危人群中,妊娠20~32周再次复查以免漏诊。发现血清学检查为阳性时,劝导其尽早接受规范治疗,配偶也应同时给予正规、足量、彻底治疗。对不明原因的死胎、死产亦应行RPR检测。
在18例血清学阳性的孕妇中,接受规范产检和苄星青霉素治疗的只有10人,正规治疗率为55.5%,处于低水平。孕妇感染梅毒如果能采用青霉素规范治疗,既可治疗孕妇,又可预防和减少先天梅毒的发生,对改善妊娠结局、降低先天梅毒儿发生率有重要意义。我们认为孕期进行驱梅治疗具有双重目的,一方面治疗孕妇,杀灭孕妇体内梅毒螺旋体,阻止母体病变发展;另一方面预防和减少先天梅毒的发生。
在国内城市地区,孕妇产前检查的比例较高,但城市中流动人口产前检查的比例较低,应针对这些人群开展宣传教育活动,并制定包括免费筛查在内的政策,提高孕妇梅毒筛查率,有效控制先天梅毒的发生。常用的梅毒血清学检查是检查病人的IgG抗体,此抗体可通过胎盘进入胎儿体内,因此梅毒血清学异常的孕妇,即使没有发生胎儿宫内感染,新生儿梅毒血清学检查也可能出现异常,但这种异常通常在出生3个月后消失。在我们检查的16例新生儿中,TRUST阳性4例,但其滴度均未高过母亲滴度,这些新生儿只能作为先天梅毒疑似病例。但考虑到先天梅毒的严重后果,这些新生儿都应接受梅毒治疗。IgM抗体不能通过胎盘,如果检查到新生儿IgM抗体阳性,强烈提示胎儿宫内感染梅毒的发生,有条件的医院应该开展此项检查,以加强对梅毒宫内感染的诊断。国内外的经验都表明,先天梅毒是完全可以预防的。合理的梅毒筛查和对妊娠期梅毒进行规范的治疗及随访,可以有效预防先天梅毒的出现。我国梅毒发病率近年不断上升,在孕妇中广泛开展梅毒筛查工作十分必要。
我们认为妊娠合并梅毒的孕妇,在产前门诊必须进行高危妊娠管理,并认真填写传染病报告卡,产科、皮肤科、儿科医生应该共同监测追踪随访母婴。梅毒母婴经规范的抗梅毒治疗后,应该随访2~3年,,第1年每3个月随访1次,以后每半年随访1次,包括临床症状及血清学检测,并汇总资料以探讨梅毒对母婴健康的远期影响。产前检查一旦发现妊娠合并梅毒的孕妇,医生必须将病程详细告知孕妇,其丈夫也应该进行梅毒血清学检查,一旦确诊为梅毒,也应该同时治疗,治疗期间应避免性生活。孕妇及其丈夫应该对该疾病知情,只要能早发现及规范治疗,妊娠合并梅毒是能够治愈的,而且能够孕育一个健康的新生命。
参考文献
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梅毒血清学范文3
[关键词] 梅毒螺旋体; 明胶颗粒凝集试验; 酶联免疫吸附试验
[中图分类号] R759.1;R446.61 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2010)11-121-02
梅毒是由于梅毒螺旋体感染引起的传染性疾病,近年来,伴随社会结构变化及经济发展,我国的梅毒感染率有上升趋势,梅毒的检测准确率及特异性对梅毒的治疗及防疫控制具有重要的意义,我们就两种梅毒的检测方法进行探讨,为提高梅毒诊断及检测的准确率提供参考。
1 一般资料
1.1 标本来源
60份梅毒血清标本来自昆明市疾控中心确诊的梅毒患者,其中男37例,女23例,年龄14~72 岁。平均(37±12.4)岁,其中Ⅰ期梅毒20例,Ⅱ期梅毒33例,Ⅲ期梅毒7例,空白对照组来自昆明市中心血站健康献血者。
1.2 仪器及试剂
BL1575型酶标仪、KJDZ-C型振荡器,HHW-420型恒温水浴箱、BL680型洗板机,TPHA 试剂盒及TP-ELISA试剂盒由南京建成生物研究所提供。
1.3 标本检测及评价
每份标本采用螺旋体明胶颗粒凝集试验法及酶联免疫吸附试验法同时检测,标本检测按试剂说明书倍比稀释加样检测,ELISA 作平行双孔,TPHA≥1∶80 为阳性。评价两种检测方法采用敏感度及特异度,敏感性=梅毒患者阳性例数/梅毒患者总例数;特异性=非梅毒患者阴性例数/非梅毒患者总例数。
1.4 统计学方法
数据处理采用SPSS16.0软件,统计学方法采用卡方检验,检验水准取α=0.05。
2 结果
螺旋体明胶颗粒凝集试验法检测敏感性95.0%,酶联免疫吸附试验法检测敏感性96.6%,两种方法比较无显著差异,螺旋体明胶颗粒凝集试验法检测特异度96.7%,酶联免疫吸附试验法检测特异度100%。酶联免疫吸附试验法特异性高于螺旋体明胶颗粒凝集试验法。见表1,2。
3 讨论
梅毒是性传播传染性疾病,在建国后伴随卫生防疫工作的进展得到很好的控制,近年来流动人口增多,血制品使用增多加之社会观念变化,梅毒的发病率明显上升,为疾病预防控制工作带来一定的压力。梅毒螺旋体检测是诊断梅毒感染的重要指标,梅毒螺旋体感染后3~6周后患者血清内即可有足够浓度滴度的抗体表达,梅毒螺旋体抗体检测的特异性和敏感度对于梅毒的诊断及疾病预防控制具有重要的意义,螺旋体明胶颗粒凝集试验法是梅毒螺旋体抗体检测的标准方法,是在人工载体明胶粒子上包被纯化后梅毒菌株成分,滴加样本后样本中的抗体与菌株结合,凝聚于明胶颗粒,用于梅毒抗体的检测。明胶颗粒凝集试验法能够敏感地反映梅毒螺旋体抗体的滴度,但其在相邻滴度的判断常与检测者的主观感觉有关[2]。在本组标本的检验中,其敏感性达到了95%以上。酶联免疫吸附法利用双抗体夹心法能够对抗体的滴度起到放大作用,具有较高的灵敏度[3],但在本组资料中其敏感度并没有表现出明显的优势,能够扑捉到早期出现的低滴度的IgM抗体,可能对于梅毒的早期诊断更具有优势[4]。在特异度上,酶联免疫吸附法高于明胶颗粒凝集试验法,可能与酶联免疫吸附法对抗体的放大作用有关。本组的研究结果表明酶联免疫吸附法在特异性上优于明胶颗粒凝集试验法,更适宜于梅毒患者的确诊,但两种方法在敏感度上类似,用于梅毒的筛选还要根据各级机构的具体设备及技术条件选择。
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梅毒血清学范文4
关键词：梅毒血清学检验；ELISA；RUST；效果
所谓梅毒，是一种因为苍白密螺旋体苍白亚种感染所导致的慢性疾病，侵入人体后，造成复杂免疫反应，同时引发多种体征与症状，通常会带给临床诊断很大困难。所以，选择特异性高、敏感性强的梅毒检测方法对诊断和治疗梅毒非常有利。为了对梅毒血清学检验的不同检测方法的价值进行分析与探讨，TRUST主要用于观察检测梅毒疗效，ELISA主要用于检测大批量梅毒标本，螺旋体明胶颗粒主要用于确证检测TRUST与ELISA检出阳性标本。选取了100例2012年4月～2013年7月在我站收集的梅毒血清标本，和100例非梅毒血清标本来进行本文研究，采用两种梅毒血清检测方法来检测梅毒血清标本，并对各项检测结果及不同检测方法的应用价值进行分析与探讨。
1资料与方法
1.1一般资料 选取100例2012年4月～2013年7月在我院收集的梅毒血清标本作为观察组，和100例非梅毒血清标本作为对照组进行对比研究，其中，观察组血清标本中，有54例男性，46例女性，平均年龄为32.1岁，对照组血清标本中，有60例男性标本，40例女性标本，标本平均年龄为32.6岁。两组血清标本年龄、性别等一般资料对比，差异性不明显，P>0.05，不存在统计学意义，具有可比性。
1.2方法 通过ELISA（酶联免疫吸附试验）、TRUST（甲苯胺红不加热血清试验）以及螺旋体明胶颗粒（螺旋体明胶颗粒凝集试验）对观察组血清标本进行梅毒检测。其中ELISA试剂由日本富士瑞比欧珠式会社提供，螺旋体明胶颗粒由上海科华生物工程股份公司提供，TRUST试剂则由上海荣盛生物技术有限公司提供。所选试剂都处于有效使用期内，都通过了相关卫生部门的检验。根据试剂盒说明书要求对三种试剂进行具体操作，检测结果以确证试验螺旋体明胶颗粒检验方法为参考，分别进行分析ELISA检测方法和TRUST检测方法对梅毒血清学检测的敏感性、特异性以及阳性率。
1.3统计学处理
2结果
对100例梅毒血清标本与100例非梅毒血清标本进行不同梅毒血清检测方法的特异度与灵敏度对比。螺旋体明胶颗粒与ELISA的阳性检出率均比TRUST明显要高，螺旋体明胶颗粒与ELISA的灵敏度比TRUST明显要高，其差异性对比，差异性比较明显，P
3讨论
近些年，我国梅毒患病率逐渐上升，严重危害到人类身体健康。所谓梅毒，就是由螺旋体感染所引起的一种全身感染性疾病，其特点是具有高度致病性与传染性，梅毒的传播途径主要是血液与性接触，严重危害人类健康[1]。因为近些年我国流动人口逐渐增多，社会观念的改变和不断上升的血制品使用量，导致我国梅毒发病率逐渐攀升，对疾病防控工作造成很大的困难与压力，而且也对人类身体健康造成严重威胁，所以，必须对梅毒血清学的检测予以高度重视[2]。
现阶段对梅毒进行检测的方法有很多，而且方法也不尽相同，就目前诊疗技术而言，检测梅毒的主要方法是：ELISA（酶联免疫吸附试验）、TRUST（甲苯胺红不加热血清试验）以及螺旋体明胶颗粒（螺旋体明胶颗粒凝集试验）等。其中螺旋体明胶颗粒对血清标本血清中梅毒螺旋体的测定具有非常高的特异性[3]。血清学检测可以说是对梅毒进行诊断与发现的一种比较常用的临床梅毒血清检测方法，具有多样化的临床表现，而且梅毒病情也呈现出时隐时现的特点，所以对梅毒进行筛查与治疗比较困难。研究表明，感染梅毒螺旋体后，通常会经历感应、反应和效应阶段，试验检测梅毒血清结果也呈现阳性，而且价格较为昂贵的梅毒血清学检测并不适用于梅毒大批量检测试验。在梅毒特异性抗原中使用酶标记，初筛抗体后，能够对其作深入性筛选，具有比较好的特异性，此检测方法的特点是自动化、标准化以及大批量同时检测，另外由于梅毒的血清学试验阳性，所以只能提示所检测标本中有抗梅毒螺旋体存在或者抗类脂抗体存在，但是这种检测结果并不能作为患者感染梅毒螺旋体的关键依据，所以梅毒血清检测结果应和临床综合诊断分析相结合，才能进一步判断患者是否感染梅毒。
ELISA检测法目前以及广泛应用于各个检测领域中，ELISA检测法是随着螺旋体基因工程抗原的研制而构建的一种血清学检测法，其主要使用的微孔反应板，所以在进行检测的过程中，可以采用全自动酶标检测仪，进而能够提高检测的准确性和快速性，同时ELISA检测所用的试剂成本相对比较低，所以此检测方法比较适用于批量血液标本筛查中。有关人员研究表明，其不仅具有非常高的特异性和灵敏性，ELISA检测法在HIV病毒检测中和核酸检测技术相比差异无统计学意义（P>0.05）。
TURST检验方法检测的主要是反应素，此方法在梅毒感染的不同时期，其检出率也具有很大的差异。有关人员研究表明，梅毒感染的最初的几周内，由于患者身体内产生的反应素不足，所以采用TRUST检测的一般都是阳性，而在梅毒感染后的第4w之后，临床检测的阳性率逐渐升高到10%～30%左右，而晚期患者和经过治疗患者的反应素下降，部分患者也随着反应素的下降出现自然转阴的现象，而在治愈后4个多月逐渐消失。螺旋体明胶颗粒凝集试验主要是将梅毒的精制菌体成分包放置在人工载体明胶粒子上，然后将样品中的梅毒螺旋体抗体和这种致敏粒子进行反应并发生凝集，从而产生粒子凝集反应，进而就能够有效检测出血清中梅毒螺旋体抗体，同时其还可以用于测定梅毒螺旋抗体的效价。有关人员研究表明，螺旋体明胶颗粒凝集检测的敏感性能够达到90%以上，其特异性也能够达到96.9%～99.8%以上。在本研究中，主要将螺旋体明胶颗粒凝集试验作为确证检测TRUST与ELISA检出阳性标本。另外还有人员研究表明[4]，临床通过对700例梅毒血清样本检测，并采用TPPA确证试验为参照，700例样本中阳性检出率为12.3%，阳性预测值为95.4%，检测的敏感性为100%，而特异性为99.5%，而采用TRUST检测的700例患者阳性检出率为6.1%，ELISA和TRUST法阳性检出率比较P
参考文献：
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梅毒血清学范文5
【关键词】梅毒；梅毒特异性抗体检测；梅毒螺旋体明胶凝集试验；流行病学
doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.01.584文章编号：1004-7484（2014）-01-0482-01
梅毒隶属于《中华人民共和国传染病防治法》规定的乙类传染病。其为一种性传播疾病，病原体为苍白梅毒螺旋体，可引起全身多组织、器官损害，临床上可分为一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒、潜伏梅毒。传播途径包括：性传播、血液传播等[1]。因此，梅毒血清学检查被列入献血者、输血前、手术、有创操作前等的必备检测项目。临床上梅毒血清学检查主要包括两种：非梅毒螺旋体血清学试验和梅毒螺旋体血清学试验。前者主要是梅毒非特异性抗体检测快速血浆反应素环状卡片试验（RPR），临床上常用于筛选和治疗效果的判断，成本低廉，检测时间短，仅需1小时。后者为梅毒特异性抗体检测梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA），只要感染过梅毒，便终身阳性[2]，因此只能作为临床筛选，不能判断治疗效果。本文采用RPR和TPPA两种方法对德州市人民医院门诊4643例行腔镜检查患者梅毒血清学进行检测分析，了解德州地区甚至鲁西北冀东南地区梅毒流行病学概况，现将结果报道如下。
1资料与方法
1.1资料来源选择2009年10月至2010年5月在我院门诊行腔镜检查患者4673例，年龄18岁-85岁，其中男性2816例，女性1857例。
1.2试剂RPR试剂由（上海科华生物工程股份有限公司）提供，TPPA试剂由（日本富士瑞必欧株式会社）提供。
1.3方法取受检者静脉血2ml，分离血清。采用梅毒非特异性抗体检测快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）和梅毒特异性抗体检测梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）分别检测。所有检测方法步骤和结果判定均按试剂盒说明书严格操作，并在试剂盒有效期内使用。
2结果
2.1各年龄段梅毒血清阳性率比较见表1。
2.2不同科室阳性结果分析见表2。
由表2结果显示，在全院所有科室中，梅毒阳性覆盖率为100%，其中TPPA检测阳性率较高的科室依次为感染内科（7.14%）、神经内科（4.76%）、肿瘤科（4.48%）、血液科及消化内科（3.50%）、神经外科（3.45%），RPR检测阳性率较高的科室依次为感染内科（7.14%）、神经内科（4.76%）、神经外科（3.45%）、肿瘤科（2.99%）、血液科及消化内科（2.92%）。
3讨论
梅毒螺旋体感染机体后，可刺激机体产生2类抗体，一为特异性抗体，另一为反应素。我们的检测方法之一TPPA即是检测梅毒螺旋体的特异性抗体，潜伏梅毒期机体便可产生，感染后约2-4周即可检出，治愈后甚至终生都可被检出。TPPA法通过抗原抗体凝集的原理检测梅毒特异性抗体，特异性极高，敏感性也很高，但其检验操作步骤繁琐，检测时间长，且只能用于临床筛选，不能判定治疗效果。另一类反应素，是梅毒螺旋体释放出的一种抗原物质刺激机体产生，其具有抗体性，我们使用的RPR试验检测的即为反应素。可检测时间比特异性抗体稍晚2周，此种检验方法检测时间短，费用低廉，而且，反应素的多少与梅毒治疗效果相关，抗体滴度越高，梅毒治疗效果差，因此，这种方法可以用来判定治疗效果。值得一提的是，多数学者认为反应素不仅仅存在于感染梅毒螺旋体的机体中，妊娠、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、慢性肾炎、风疹、水痘等，RPR同样可呈阳性[3]。因此如遇到RPR检验阳性时，临床上不能盲目定为梅毒感染。综上，临床上我们应该结合TPPA和RPR两种梅毒检测手段综合评判[4-5]。
本次统计由表1可见，对于梅毒，TPPA检测方法在80岁以上阳性率最高，达3.26%，考虑机体感染梅毒后年轻时机体抵抗力高而年龄增高抵抗力降低，导致老年人检测阳性。再者，老年人所患基础疾病多，有可能是基础疾病诱导产生的抗类质抗体或者TP抗体的交叉抗原引起的假阳性。21-40岁组RPR阳性率最高，达到2.41%，说明处于性活跃期的青壮年是梅毒感染的主体。由于梅毒传染多为性传播途径，而调查显示感染梅毒者多有不结性生活史，多见于、非婚性接触、患有梅毒等。因此社会应加强对群众尤其年轻人的性教育，树立正确的价值观，并普及性病知识。
由表2可见，全院各科室梅毒阳性覆盖率100%，提示梅毒广泛分布于临床，医护人员在医疗操作中，尤其是手术、输血、有创操作等，严格筛选患者是否感染梅毒，确定其传染性，医疗器械、医疗废物严格消毒灭菌，减少院内梅毒传播。再者医护人员需严格无菌操作，加强自我保护意识，防止职业暴露，万一在医务工作中受患者污染，立即采取有效措施。
因此，联合TPPA和RPR检测方法确定患者是否患有梅毒及传染性，患者接受有创操作、输血、手术、介入等医疗工作前后检测梅毒血清学，可有效判断患者所患梅毒是何时感染，避免不必要的医疗纠纷，保护医患双方利益。此外，正确、有效的判断患者是否感染梅毒可协助医护人员做好合理的防护措施，避免院内感染，有效防止医护人员职业暴露。
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梅毒血清学范文6
[关键词]梅毒螺旋体；rTpN15-17-47-ELISA；血清学诊断
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Clinical Evaluation of Different Serological Methods for Diagnosis of Treponema Pallidum
WU Ying1 HU Yujie2 SUN Aihua2
1.Zeguo Branch of Taizhou Combination of Chinese Traditional and Western Medicine Hospital，Zhejiang Province，Taizhou 317500，China；2.Zhejiang Medical College，Hangzhou 310053，China
[Abstract] Objective To evaluate the sensitivity and specificity of rTpN15-17-47-ELISA，RPR and TPPA methods in serological diagnosis of syphilis. Methods The serum samples from 50 healthy individuals，11 RA patients，5 NS patients and 122 syphilis patients were detected by using rTpN15-17-47-ELISA，RPR and TPPA. The detection effect of the ELISA was compared to those of RPR and TPPA. Results The detection results of rTpN15-17-47-ELISA was negative for the serum samples from healthy individuals，RA and NS patients，while presented 97.5% positive detection rates for the serum samples from syphilis patients. The positive detection rates of rTpN15-17-47-ELISA was similar to that of TPPA（96.7%）（P＞0.05），both the positive rates of rTpN15-17-47-ELISA and TPPA were significantly higher than that of RPR（80.3%）. Conclusion rTpN15-17-47-ELISA established in this study is great hopeful to become sensitivity and specificity methods for serological screening and detection of syphilis.
[Key words] Treponema pallidum；rTpN15-17-47-ELISA；Serological diagnosis
梅毒是由梅毒螺旋体（Treponema pallidum）感染引起的主要人类性传播性疾病（STD）之一[1]，因临床表现多样容易造成误诊、漏诊。目前梅毒的实验室诊断主要依赖血清学方法，快速血浆反应环卡片试验（RPR）是目前国内最常用的梅毒临床筛选试验，方法简便、快速，用于梅毒初筛，但特异性不强。明胶凝集试验（TPPA）为代表的特异性的梅毒确诊试验，方法敏感、特异，但需以培养的梅毒螺旋体为特异性抗原，梅毒螺旋体培养困难、成本高，使TPPA难以普及成为梅毒筛选试验[2，3]。本研究利用孙爱华教授建立的以重组蛋白rTpN15-17-47为包被抗原的ELISA并检测122份梅毒血清标本，并对方法的敏感性和特异性进行临床评价。
1 材料与方法
1.1 血清标本来源
梅毒患者血清122份（临床已确诊）由浙江省台州地区多家医院提供，收集上述血清标本医院已进行RPR和TPPA检测。11例RA和5例NS无梅毒病史者血清标本、50例无梅毒病史正常体检者血清标本来自浙江省台州市中西医结合医院。上述标本采集时均获得患者或体检者的知情同意。
1.2 ELISAs建立与应用
紫外分光光度法测定重组蛋白rTpN15-17-47（孙爱华教授前期研究结果）浓度。50μg/mL rTpN15-17-47包被96孔板，37℃温育2h后放置冰箱4℃过夜。次日洗涤3次，用8%BSA封闭。根据预试验结果，50份正常对照血清标本1800稀释后为一抗。二抗为HRP标记羊抗人IgG（Jackson Immuno Research），显色底物为TMB，测定终止反应后各孔OD450值，计算得正常血清OD450均值和SD值。1800稀释的梅毒患者、RA及NS无梅毒病史者血清用我们建立的rTpN15-17-47-ELISA检测，若被检标本OD450值≥阴性对照OD450均值＋3SD者为阳性。
1.3 RPR和TPPA检测
按试剂盒说明书对上述梅毒患者血清、RA及NS无梅毒病史者血清标本和健康人血清标本进行检测并进行结果判定。
1.4 统计学处理
采用STATA8.0统计学软件中的χ2检验，对不同检测方法检测阳性率进行比较，P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 不同方法检测梅毒患者血清阳性率
检测上述50份健康人血清标本的OD450均值和SD值分别为0.25和0.04，故阳性判断参考值为OD450值≥0.37。根据上述阳性判断参考值，122例梅毒患者血清标本用rTpN15-17-47-ELISA检测阳性率为97.5%（119/122）。RPR和TPPA对上述血清标本检测阳性率分别为80.3%（98/122）、96.7%（118/122）。见表1。
2.2 不同梅毒血清学检测方法比较
rTpN15-17-47-ELISA检测梅毒血清患者的阳性率为97.5%，与TPPA检测阳性率96.7%比较差异无统计学意义（χ2=0.15，P＞0.05），但rTpN15-17-47-ELISA和TPPA检测阳性率均明显著高于RPR阳性率80.3%（χ2=18.37和16.14，P＜0.05）。TPPA是目前临床实验室采用的梅毒确诊试验，RPR和rTpN15-17-47-ELISA检测结果与TPPA比较，符合率分别为83.1%和99.2%，未见TPPA阴性而RPR检测结果阳性情况，但另有2份梅毒患者血清标本TPPA阴性而rTpN15-17-47-ELISA结果阳性。见表2。
3 讨论
梅毒血清学试验有非Tp抗原试验和Tp抗原试验两大类，非Tp抗原试验常见的前者如RPR及甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）等，常用于梅毒患者筛查和疗效监测，由于采用心磷脂作抗原、特异性较差，故有RA等少数疾病患者可出现RPR检测假阳性[3]。Tp抗原试验特异性高，但是需制备大量Tp抗原。目前Tp人工培养物主要依赖于Nichols株接种兔传代和繁殖，产量很低，生产成本高[2]。利用基因工程手段合成重组蛋白具有Tp人工培养物相同的抗原性，不仅缩短获得抗原的时间，且极大降低了生产成本。
TpN15、TpN17、TpN37、TpN44.5和TpN47被认为是最有临床应用前景的梅毒螺旋体外膜蛋白抗原，利用生物工程获得上述外膜蛋白的重组蛋白作包被抗原建立的ELISAs检测血清抗体方法已有不少研究报道，但多为单一外膜蛋白为基础建立的ELISAs，单一重组抗原灵敏度和特异性较低[3，4]。也有少量实验室建立二个或多个外膜蛋白通过多次包被增加方法的敏感性，由于多个抗原需各自表达与提纯不仅增加了制备费用也可能造成更多的误差，不利于方法标准化和推广应用[4-6]。
本研究中，我们梅毒螺旋体主要外膜蛋白TpN15、TpN17和TpN47通过生物工程手段构建的融合抗原TpN15-17-47为包被抗原，建立检测梅毒血清抗体的ELISA检测临床确诊梅毒患者血清标本。由于同时具备三个主要抗原，提高了方法的敏感性，检测结果也表明建立的rTpN15-17-47-ELISA方法检测梅毒血清标本与确诊试验TPPA无显著性差异，显著高于目前临床常用筛选试验RPR，同时建立的融合抗原TpN15-17-47可以保证多个抗原一次表达，能有限降低检测成本。rTpN15-17-47-ELISA有望成为快速、廉价、敏感性和特异性较高的梅毒患者血清学筛查方法。
[参考文献]
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[2] Morse SA. Advances in diagnostic tests for bacterial STDs[J]. Salud Publica Mex，2003，45（Suppl5）：S698-708.
[3] Farhi D，Dupin N. Serological diagnosis of syphilis[J]. Przegl Epidemiol，2009，63（4）：519-523.
[4] 孙爱华，范兴丽，毛亚飞，等. 梅毒螺旋体重组蛋白rTpN17或rTpN47为抗原的ELISA与TRUST和TPHA血清学检测效果的比较[J]. 浙江大学学报医学版，2008，37（1）：67-72.
[5] 杨建兰，郎亦波. 不同血清学诊断方法检测梅毒螺旋体的结果分析[J]. 临床和实验医学杂志，2009，8（5）：90-91.