饲用抗生素在预防动物疾病、促进生长、提高饲料报酬、提高畜禽产品产量等方面发挥了积极的作用［1］。但是饲用抗生素的滥用也给人类带来了越来越大的麻烦，如耐药菌株的增多、破坏动物机体正常的菌群、引起微生态失调、抑制机体免疫反应形成、导致免疫功能下降等，另外，抗生素等药物在畜产品中的残留，也威胁着人类的健康和安全。因此，为了解决抗生素添加剂在应用中存在的问题，研究者们一直在致力于寻求一种无毒副作用、无残留、促进动物生长的绿色添加剂。微生态制剂是指含活菌和（或）死菌，包括其组分和产物的细菌制品，经口或其他黏膜途径摄入，旨在改善黏膜表面微生物或酶的平衡，或者刺激特异性或非特异性免疫机制，能够起到防治消化道疾病、促进生长、改善畜产品品质、减少粪便恶臭、防治环境污染的作用。该试验旨在研究山东宝来利来生物工程股份有限公司生产的微生态制剂———肽菌素在肉鸡生产中的应用效果，从而为肽菌素在肉鸡生产中的推广应用提供试验依据。 1材料与方法 1.1试验材料 肽菌素由植物乳酸杆菌、双歧杆菌和枯草芽胞杆菌B7348组成，其活菌总数不低于5.0×108cfu/g；供试鸡为1日龄健康AA肉公鸡，购自山东省泰安市省庄肉鸡场；新城疫（ND）LaSotaⅣ系疫苗，购自齐鲁动物保健品厂；EMB培养基和LBS培养基，购自青岛高科园海博生物技术有限公司。 1.2试验设计及饲养管理 试验采用单因子设计，在基础日粮中分别添加抗生素（金霉素100mg/kg）、肽菌素0、0.1%、0.2%、0.4%（见表1），每个处理3个重复，每个重复30只鸡。选用450只健康1日龄AA肉公鸡，按照大小和健康状况基本相同的原则随机分配到5个处理，每个重复为一笼，饲养方式为平养。试验分为前期（1~21d）和后期（22～42d）2个阶段，为期6周。试验鸡自由采食和饮水，光照、免疫等均按常规饲养管理进行。 1.3试验饲粮 基础饲粮为玉米—豆粕型饲粮，参考中国鸡饲养标准（2004）［2］配制，各阶段基础饲粮组成及营养成分见表2。所有饲粮均为粉料。 1.4检测指标与测定方法 1.4.1生长性能：分别于试验的第1天、第21天、第42天早晨空腹进行称重。计算1~21、22~42日龄和1~42日龄的平均日增重、平均日采食量和料肉比。 1.4.2消化道生理指标①样品采集：于试验的第21、42天每个处理的每个重复随即抽取2只鸡进行屠宰，分离十二指肠、空肠和回肠，然后分别剪下十二指肠（离胃幽门5cm处）、空肠中段和回肠中段约1cm的肠段组织，尽快放入10%福尔马林固定液中，制作组织切片用作显微镜观察。②小肠长度：用软尺测量十二指肠、空肠和回肠的长度。③肠道形态：10%福尔马林试剂中固定十二指肠、空肠和回肠24h后，经洗涤、脱水、透明、透蜡、包埋、修块后，切成较厚石蜡切片，进行HE染色，封片后用显微摄影分析系统测量隐窝深度、绒毛高度，并计算绒毛高度与隐窝深度的比值。 1.4.3盲肠内容物中大肠杆菌和乳酸杆菌的检测：于试验期的第21天和第42天，从每个重复中随机选取2只鸡，称活重后静脉放血处死，用5%新洁尔灭消毒液浸泡5min，然后将其置于无菌操作台上，剖开腹腔，无菌取出一侧盲肠放于无菌平皿里，取其内容物进行计数。 1.4.4数据处理：试验数据采用SPSS13.0软件中的单因子方差分析，用LSD进行组间多重比较，对试验数据进行统计分析，结果均以平均数±标准差表示。 2结果与分析 2.1肽菌素对肉鸡生长性能的影响 不同处理对肉鸡生长性能的影响见表3。对体重来说，1日龄体重各组之间差异不显著（P>0.05）。21日龄的体重以对照组最低，添加金霉素和肽菌素均能提高肉鸡的体重，差异显著（P＜0.05）；肽菌素各组的体重均低于金霉素组，但只有微生态制剂0.4%组（处理5）与之差异显著（P＜0.05）。42日龄的体重仍以对照组最低，但与各组间差异不显著（P＞0.05）。对体增重来说，1~21d的平均日增重以对照组最低，添加金霉素和肽菌素均能提高肉鸡的平均日增重，差异显著（P＜0.05）。与对照组相比，金霉素组提高了12.1%，肽菌素各组分别提高了8.39%、10.10%、6.71%。肽菌素各组的平均日增重均低于金霉素组，但仅肽菌素0.4%组（处理5）与之差异显著（P＜0.05）。22~42d的平均日增重以对照组最低，但与各处理组间差异不显著（P＞0.05）。1~42d的平均日增重仍以对照组最低，除与肽菌素0.1%组（处理3）差异显著（P＜0.05）外，与其余各组差异不显著（P＞0.05）。对采食量来说，1~21d的平均日采食量以对照组最低，添加金霉素和肽菌素均能提高肉鸡的平均日采食量；与对照组相比，抗生素组提高了9.73%，肽菌素各组分别提高了2.19%、4.62%、3.64%。肽菌素组的平均日采食量均低于金霉素组，但仅肽菌素0.1%组（处理3）与之差异显著（P＜0.05），其余肽菌素组与之差异不显著（P＞0.05）。22~42d的平均日采食量以肽菌素0.2%组（处理4）最低；与对照组相比，添加金霉素和肽菌素均未显著提高肉鸡的平均日采食量（P>0.05）。1~42d的平均日采食量仍以肽菌素0.2%组（处理4）最低，添加金霉素和肽菌素后有提高平均日采食量的趋势。对料肉比来说，1~21d的料肉比以对照组最高，添加金霉素和肽菌素均有降低料肉比的趋势；与对照组相比，金霉素组降低了2.17%，各肽菌素组分别降低了5.80%、5.07%、2.90%；并且各肽菌素组的料肉比均低于抗生素组，分别降低了3.70%、2.96%、0.74%。22~42d和1~42d的料肉比，肽菌素组均低于金霉素组和对照组，尤以肽菌素0.1%组（处理3）最低。 2.2肽菌素对肉鸡消化道生理的影响 2.2.1肽菌素对肉鸡小肠相对长度的影响：由表4可以看出，与对照组和金霉素组相比，各肽菌素组均降低了21日龄肉鸡十二指肠（P<0.05）、空肠（P<0.05）、整个小肠（P<0.05）的相对长度，增加了回肠（P<0.05）相对长度。与对照组相比，金霉素组对十二指肠、空肠和整个小肠的长度无显著影响（P>0.05），但回肠相对长度显著增加（P<0.05）。42日龄时，与对照组和金霉素组相比，除空肠（P<0.05）的相对长度显著增加外，各肽菌素组肠段的相对长度差异不显著（P>0.05）。#p#分页标题#e# 2.2.2肽菌素对肉鸡小肠形态的影响：由表5可以看出，与对照组和金霉素组相比，各肽菌素组对21日龄肉鸡的十二指肠、空肠、回肠的绒毛高度、隐窝深度以及绒隐比值均无显著影响（P>0.05）；但与对照组相比，各处理组有提高十二指肠、空肠和回肠绒毛高度的趋势；与金霉素组相比，添加肽菌素也有提高十二指肠绒毛高度的趋势。由表6可以看出，与对照组和金霉素组相比，各肽菌素组对42日龄肉鸡的十二指肠、空肠、回肠的绒毛高度、隐窝深度以及绒隐比值均无显著影响（P>0.05）；与对照组相比，各处理组十二指肠绒隐比值分别提高了2.68%、1.57%、2.24%、0.89%（P>0.05）；与对照组相比，各处理回肠绒隐比值分别提高了10.00%、9.11%、14.60%、10.90%（P>0.05）。 2.3肽菌素对盲肠内容物中大肠杆菌和乳酸杆菌的影响 由表7可以看出，在21日龄时，与对照组相比，添加肽菌素有提高乳酸菌数量和降低大肠杆菌数量的趋势，各组差异不显著（P>0.05），乳酸杆菌数量分别提高了47.9%、46.7%、46.7%；大肠杆菌数量分别降低了21.8%、29.1%、25.5%；金霉素组降低了乳酸杆菌和大肠杆菌的数量，差异显著（P<0.05）。42日龄时，对大肠杆菌来说，各组之间的数量差异均不显著（P>0.05）；对乳酸杆菌来说，肽菌素组与对照组、金霉素组差异均显著（P<0.05），但金霉素组与对照组之间差异不显著（P>0.05）。 3讨论 3.1肽菌素对肉鸡生长性能的影响 该试验比较了肽菌素与抗生素（金霉素）促生长的效果，结果发现，金霉素和肽菌素均能促进肉鸡生长，从体增重改善程度来看，肽菌素效果不如金霉素；从料肉比来看，0.1%~0.4%肽菌素剂量组在前期低于抗生素组；全期肽菌素各处理组均低于金霉素组或与金霉素组相当，说明添加一定剂量的肽菌素能够达到与添加金霉素相同的效果，但并非是添加量越多越好。这可能是因为添加了过多的肽菌素，打破了动物机体肠道微生物的平衡而不利于动物的生长。从发挥促生长作用的时间来看，肽菌素与金霉素发挥作用的时间相同，均是在饲养前期作用效果优于饲养后期。这可能是由于该试验采用的金霉素为饲料级，后期机体产生了耐药性，效果不如前期明显［3］；而肽菌素的后期作用效果不如前期明显的原因可能是随着肉鸡日龄的增加，其肠道微生物菌群越加稳定，受外界干扰越小。 3.2肽菌素对肉鸡消化道生理的影响 3.2.1肽菌素对肉鸡小肠相对长度的影响：该试验结果表明，在饲粮中添加肽菌素后能够显著降低21日龄肉鸡十二指肠、空肠、回肠长度及小肠总的长度，金霉素组对十二指肠、空肠和整个小肠的长度无显著的影响，但显著增加了回肠相对长度。42日龄时，肽菌素各组除对空肠有显著影响外，对其余肠道均无显著影响。这与陈佳等［4］的研究结果相似，可能是由于添加肽菌素之后，提高了动物机体对营养物质的消化吸收能力，减轻了对消化系统的刺激，从而缓解了动物消化系统的代偿性增生和肥大。同时小肠重量减轻、长度变短，可以减少机体内脏器官的维持需要，更有利于鸡的生长，这可能是肉鸡生产性能改善的原因之一。 3.2.2肽菌素对肉鸡小肠形态的影响：小肠是机体营养物质消化吸收的主要场所，小肠皱襞还能加大小肠的吸收面积。微生态制剂可以促进动物肠道的生长发育，提高绒毛高度和隐窝深度以及二者的比值等。该试验结果表明，与对照组相比，添加肽菌素之后，对21d和42d的小肠绒毛高度、隐窝深度以及二者比值没有显著影响，但有提高的趋势，这与Sun等［5］的研究结果相似。Samanya等［6］研究发现，饲喂益生菌后，28日龄肉鸡的十二指肠和回肠绒毛显著变长。该试验结果不如前人研究结果影响显著的原因可能是由于所使用的菌种以及饲养环境的不同。吸收养分是小肠绒毛的主要功能，肠腺则主要具有分泌功能，因此动物小肠黏膜结构的良好状态是养分消化吸收和动物正常生长的生理学基础。绒隐比值是反映小肠功能状态的综合指标，比值上升，则黏膜改善、消化吸收功能增强、生长加快。肽菌素促进肠道发育的作用可能是通过采食量而发挥的。卢建军等［7］报道，低采食量是肠道黏膜萎缩的原因而不是肠道黏膜萎缩后的结果。同时该试验研究发现，添加乳酸菌后，肉鸡采食量有提高的趋势，这与肉鸡的生产性能提高的趋势基本一致。 3.3肽菌素对盲肠内容物中大肠杆菌和乳酸杆菌的影响 乳酸杆菌、双歧杆菌是动物肠道中的优势菌种，它能在肠道中迅速生长繁殖，产生大量酸，使肠道的pH值和Eh下降，既可抑制病原微生物的生长繁殖，又能促进肠道中其他厌氧菌的生长繁殖。同时，肠道中的酸性环境，既有利于营养物质的消化吸收，也有利于提高饲料利用率。因此，在肉鸡出壳后尽早摄入乳酸菌等益生菌可以帮助其机体内尽早形成优势乳酸菌、双歧杆菌等菌群，从而有助于动物提高抵抗力，避免外来有害细菌的感染。该试验结果表明，肽菌素能显著促进肉鸡肠道内乳酸杆菌的增殖（P<0.05），并且能抑制大肠杆菌的繁殖。 4结论 ①金霉素和肽菌素均能促进肉鸡的生长；从体增重改善程度来看，肽菌素的效果略低于金霉素；从料肉比改善程度来看，0.1%~0.4%肽菌素略优于金霉素。肽菌素前期的使用效果大于后期。②肽菌素能降低肉鸡肠道长度，可改善肠道形态，且有降低盲肠内容物中大肠杆菌和增加乳酸杆菌数量的趋势。