肾细胞癌范文1
[关键词]肾细胞癌;计算机体层摄影术;动态增强
[中图分类号]R445.3
[文献标识码]A
[文章编号]1006-1959(2009)07-0228-02
肾细胞癌,是肾脏最常见的恶性肿瘤,占肾脏原发恶性肿瘤的75%-85%[1]。CT是目前肾脏病变影像诊断的首先方法之一,对肿瘤大小、范围、病变性质以及有无转移的判断等有重要作用。我们通过分析76例肾细胞癌患者的CT表现,以期探讨CT在肾癌诊断中的应用价值。
1材料方法
1.1一般资料:本组搜集1997年5月～2007年4月共76例肾细胞癌,其中男53例,女23例,年龄20-82岁,平均42岁。左肾35例,右肾41例。透明细胞癌61例,状癌4例,混合型8例,肉瘤样癌3例。肉眼血尿12例,腹部肿块5例,腰痛12例,体检发现47例。
1.2CT检查方法:41例行平扫加三期增强扫描。20例行平扫加实质期增强扫描。15例仅行平扫。造影剂使用优维显。使用高压注射器将优维显90～120ml自肘静脉注入,速率3ml/s,动态增强扫描分别于注射造影剂后25s、75s及220s三期进行图像采集。检查前均服500～1000ml的水充盈胃肠道。
2结果
2.1CT表现:
形态上呈圆形或椭圆形70例,形态不规则6例;最大径1.2cm～13.0cm,平均4.1cm;部分突出肾轮廓外61例,位于肾实质内12例,靠近肾窦3例;边界较清楚58例,不清18例;有假包膜41例;密度呈较均匀稍低密度54例,等密度8例,混杂密度6例,其中钙化者3例,较均匀高密度2例,6例呈囊性。
2.2增强特点:61例行增强扫描,其中50例(82%)肿瘤呈重度强化,5例(8%)呈中度强化,6(10%)例呈轻度强化。53例(87%)强化不均匀。41例行动态增强扫描,其中36例(88%)的病灶强化呈“快进快退”表现,即皮质期显著强化,实质期及排泄期强化明显减低。
2.3肿瘤CT及临床分期(TNM分期):
CT分期:I期49例(64%);II期11例(14%);III期10例(13%);IV期6例(8%)。临床分期:I期53例(70%);II期8例(10.5%);III期9例(12%);IV期6例(8%)。本组CT分期准确率为95%(72/76)。病理上:局限于肾内53例(70%);突破肾包膜侵犯肾周筋膜9例(12%),其中1例伴腹膜后淋巴结转移及静脉瘤栓;侵犯腰大肌及肾周筋膜外结构4例(5%),3例伴肾门或后腹膜淋巴结转移,其中2例伴肾静脉下腔静脉瘤栓;肾盂受侵5例(6.5%);1例单纯肾静脉癌栓(1%);远处转移(肺转移)2例(3%)。
3讨论
肾癌,又称肾细胞癌(renalcellcarcinoma,RCC),是肾最常见的恶性肿瘤,其发现主要依靠影像学方法。随着现代断层影像医学(CT、MRI及超声)的飞速发展和广泛应用,以及人们健康意识的逐渐提高,肾脏肿物已经越来越多的被捡出。这些病变的进一步定性是非常重要的,因为其中部分病变可能是早期肾恶性肿瘤[2]。由于目前肾癌在治疗上仍以手术治疗为主,对放疗、化疗及生物治疗均不敏感,所以早期发现对提高患者的生存率尤其重要。这就要求影像诊断医师对肾癌的诊断必须有个全面的认识。肾癌的主要诊断方法是超声、CT及MRI,肾癌的超声回声复杂多样[3],MRI由于其费用高不普及而限制了两者的应用价值。而螺旋CT价格适中,又具有扫描速度快的优点,其增强扫描可反映肾肿瘤的血液动力学特点,大大提高了诊断准确率。螺旋CT成为目前肾癌诊断的首选方法。
3.1CT平扫特点:肾癌CT平扫时多表现为等或低密度,圆形或椭圆形,较大时多呈不规则形,常使肾的外形扩大或局部隆起。部分肾癌有假包膜,使病灶边界较为清楚,我们这组54%的病例出现假包膜。部分病灶呈浸润性生长,边界不清。癌灶内可囊变,出血、坏死、钙化。
3.2增强扫描特点:肾细胞癌血供丰富,螺旋CT增强扫描能够反映肾癌的血供,对其诊断具有较高价值。郭燕等[4]认为肾癌皮质期强化明显,实质期强化迅速减退,呈“快进快退”表现,这一强化形式有定性意义。我们这组41病例进行了皮质期、实质期及排泄期的三期动态增强研究,病灶强化表现及特点与上述文献相符,88%的病例呈“快进快退”表现,即皮质期肿瘤明显不均匀强化,部分强化程度与正常肾皮质相仿,而实质期与排泄期肿瘤强化程度快速减低,与正常肾实质之间反差明显。对肾癌的CT诊断,应该进行三期动态扫描,皮质期易于显示肿瘤组织的供血程度,实质期能较好显示正常组织与瘤灶的密度对比,有利于确定肿瘤与正常组织分界,排泄期利于显示集合系统受侵情况及静脉血栓等,对肾癌的诊断均有一定意义。
肾细胞癌范文2
内蒙古国际蒙医医院影像中心，内蒙古呼和浩特 010065
[摘要]目的 探析肾乳头状细胞癌及肾透明细胞癌进行MRI增强检查的鉴别诊断价值。方法 入选该院2013年5月—2014年4月经病理检查确诊为肾细胞癌患者96例，包括肾乳头状细胞癌50例，肾透明细胞癌46例，进行MRI平扫及增强扫描，比较肾乳头状细胞癌及肾透明细胞癌的MRI影像学特征。结果 肾乳头状细胞癌与肾透明细胞癌的排泄期、实质期、皮髓期的增强相对强度评估比较，差异有统计学意义（P<0.05）；肾乳头状细胞癌MRI平扫时T2WI、T1WI均主要为高、低、等混杂信号，而肾透明细胞癌MRI平扫T2WI主要为混杂信号，T1WI主要为等、低混杂信号，其次为等、高、低混杂信号；肾乳头状细胞癌MRI增强扫查主要为轻中度持续性强化，而肾透明细胞癌主要在实质期显著降低，呈快进快出征象，而皮质期呈中重度显著强化。结论 肾乳头状细胞癌及肾透明细胞癌进行MRI增强扫描对二者之间的鉴别诊断具有重要的临床价值。
关键词 鉴别诊断；MRI增强扫描；肾乳头状细胞癌；肾透明细胞癌
[中图分类号]R737.11[文献标识码]A[文章编号]1674-0742（2015）04（a）-0168-02
[作者简介]杜晓东（1971.8-），男，蒙古族，研究生，研究方向：影像医学与核医学磁共振专业。
临床肾脏常见的恶性肿瘤为肾细胞癌，肾细胞癌主要有未分化细胞型肾癌、混合细胞型肾癌、颗粒细胞型肾癌、透明细胞型肾癌，其中常见的两种亚型为肾乳头状细胞癌及肾透明细胞癌[1]。肾透明细胞癌中常有钙化、囊变、出血，二者的预后情况、手术方式、恶性程度等情况也具有一定的差异性。肾乳头状细胞癌与肾透明细胞癌如未能及时确诊，严重影响病人的生命健康及质量。有文献指出，肾乳头状细胞癌及肾透明细胞癌进行MRI增强检查，对于二者之间的鉴别诊断具有重要的临床价值[2]。故该院2013年5月—2014年4月对肾乳头状细胞癌及肾透明细胞癌进行MRI增强检查，效果满意，现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
整群选取该院2013年5月—2014年4月经病理检查确诊为肾细胞癌96例，其中男性56例，女性40例，年龄32~60岁，平均年龄（53.5±1.6）岁，肿瘤平均直径（5.8±3.1）cm，均出现腹部肿物、尿频、下腹痛、腰痛、无痛性血尿等临床特征。其中肾乳头状细胞癌50例，男性28例，女性22例，年龄32~60岁，平均年龄（53.4±1.6）岁，肿瘤平均直径（4.5±3.0）cm，肾透明细胞癌46例，其中男性28例，女性18例，年龄32～60岁，平均年龄（53.5±1.5）岁，平均直径（5.9±3.2）cm。两组患者在年龄等基线资料差异有统计学意义（P<0.05），具有可比性。
1.2 研究方法
全部患者均进行MRI平扫及增强检查，平扫序列为冠状位T2WI及横断位T1WI，扫描参数：冠状位T2WI TE 93ms，TR 700 ms，横断位T1WI TE 2ms，TR 161ms，横断位T2WI TE 96ms，TR 700ms，增强扫描：在T1WI注入对比剂0.1 mmol/kg钆喷替酸葡甲胺，20~30 s后予以皮质期扫描，40~50 s予以实质期扫描，60~70 s予以肾盂期扫描。经两名经验丰富的主治医师进行扫描后阅片，观察病灶的特征、增强扫描后的强化程度、边缘、信号强度。肿瘤形态包括分叶状、椭圆形、球形，分界模糊或清晰，边缘分为是否有包膜。
1.3 仪器和试剂
德国SIEMEMS 1.5T AVANTO Tim 超导型MR扫描仪。
1.4 统计方法
全部数据进行spss18.0软件系统处理分析，计量资料以（±s）表示，组间比较以t检验，P<0.05则差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者增强相对强度的评估比较
肾乳头状细胞癌与肾透明细胞癌的排泄期、实质期、皮髓期的增强相对强度评估比较，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。
2.2 肾透明细胞癌MRI影像学特征
肾透明细胞癌MRI影像特征为T2WI为高、等、低混杂信号，T1WI等、低混杂信号，MRI动态增强时肿瘤强化特征为不均匀强化17例，欠均匀强化16例，均匀强化13例；患者肿瘤信号强度不均：T2WI等信号4例，高低混杂信号10例，高、等、低混杂信号32例；T1WI低信号3例，等信号3例，高、低、等混杂信号12例，等、低混杂信号28例；病灶呈分叶状21例，呈椭圆形或球形者25例；病灶边缘清晰者24例，包膜完整，包膜不完整或边界模糊者22例；病变部位：左肾36例，右肾10例，肿瘤平均直径（5.9±3.2）cm。
2.3肾乳头状细胞癌的MRI增强影像学特征
全部肾乳头状细胞癌在肾盂期、实质期、皮质期均出现强化欠均匀、轻中度强化，T2WI低信号10例，混杂信号40例；T1WI等高信号12例，低信号11例，等低信号10例，混杂17例；肿瘤形态呈分叶状者20例，呈椭圆形或球形者30例；包膜不显著者9例，包膜完整者41例；病变部位：右肾者40例，左肾10例，平均肿瘤直径（4.5±3.0）cm。
3 讨论
85%~90%肾肿瘤为肾细胞癌，可分为集合管癌、嫌色细胞癌、乳头状细胞癌、透明细胞癌四种病理类型，其中两种常见亚型为肾乳头状细胞癌及肾透明细胞癌[3-4]。其中10%~15%的肾细胞癌为乳头状细胞癌，70%~80%为肾透明细胞癌，每种临床亚型的预后具有一定的差异性[5]。临床早期常无特异性特质，或出现肾区肿物、疼痛、无痛性血尿，当出现全身乏力、发热、病灶体积增大时可发现[6-7]。据最新调查结果表明，嫌色细胞癌和乳头状细胞癌的5年生存率约为88%~100%，而肾透明细胞癌的5年生存率可达70%左右，临床对于肾乳头细胞癌及肾透明细胞癌进行治疗前MRI增强扫查，对疾病的预后判断、治疗方式的选择具有重要的临床价值[8-9]。
该研究对肾乳头状细胞癌及肾透明细胞癌进行MRI增强检查用于鉴别诊断，结果显示：肾乳头状细胞癌MRI平扫时T2WI、T1WI均主要为高、低、等混杂信号，而肾透明细胞癌MRI平扫T2WI主要为混杂信号，T1WI主要为等、低混杂信号，其次为等、高、低混杂信号；肾透明细胞癌供血多充足，动脉期病灶实质显著强化，少数癌细胞因病灶内产生坏死，表现为分格样、环形不均匀等强化特征，肾盂期强化程度显著降低；而肾乳头状细胞癌因乳头内为较细小的纤维轴心血管，无动静脉瘘或大血管，供血不足，呈现轻中度持续进展性强化，常发生于右肾，平均肿瘤直径略低于肾透明细胞癌。此外，二者还需与嫌色细胞癌相鉴别。本文中乳头状肾细胞癌组在排泄期、实质期、皮髓期的增强相对强度分别为（0.42±0.03）、（0.49±0.10）、（0.56±0.19），相对应的肾透明细胞癌组增强相对强度分别为（0.69±0.11）、（0.89±0.16）、（1.09±0.29），两组在排泄期、实质期、皮质期的增强相对强度评估比较，差异具有统计意义（P<0.05）。同时该研究结果也与刘常青等[10]研究结果一致，说明MRI增强扫描对肾乳头状细胞癌及肾透明细胞癌具有较高的鉴别诊断价值。
综上所述，肾乳头状细胞癌及肾透明细胞癌进行MRI增强扫描对二者之间的鉴别诊断具有重要的临床价值，值得推广。
参考文献
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肾细胞癌范文3
[关键词] 肾细胞癌；组织芯片；免疫组织化学；CD147；E-cadherin
[中图分类号] R737.11 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）35-0063-02
CD147是一种促细胞外基质金属蛋白酶因子（extracellular matrix metalloproteinase inducer，EMMPRIN），为免疫球蛋白成员之一，是一种跨膜糖蛋白，在恶性肿瘤细胞膜上有较强的表达。CD147能诱导成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase， MMPS）导致细胞外基质降解，促进肿瘤的浸润和转移[1，2]。上皮细胞钙粘蛋白（E-cadherin）主要介导同种细胞间的粘附反应，人体多种恶性肿瘤的发生发展和侵袭转移与上皮细胞E-cadherin表达降低密切相关[3，4]，本研究采用免疫组织化学方法检测CD147和E-cadherin在肾细胞癌和正常组织中的表达，旨在探讨二者在肾细胞癌中发生发展及侵袭转移的关系。
1 材料与方法
1.1 标本来源
82例肾细胞癌与26例癌旁正常肾组织标本均选自我院病理科存档蜡块，为1990年1月～2007年12月间收集的肾癌手术切除标本。其中女25例，男57例，男女比例2.28∶1。年龄最大78岁，最小17岁，平均51.2岁。标本按WHO肾癌病理组织学分型：透明细胞癌50例；嫌色细胞癌19例；集合管癌6例，囊性肾细胞癌6例；状肾细胞癌1例。核分级按Thoenes标准：1级核30例，2级核29例，3级核14例，Ⅳ级核9例。肿瘤大小：大于7 cm 28例； 5～7 cm 24例；小于5 cm 30例；。临床分期：RobsonⅠ期54例，Ⅱ期20例，Ⅲ期7 例 ，Ⅳ期1例。其中术后随访1年以上76例。
1.2 免疫组织化学染色
CD147多克隆抗体、鼠抗人E-cadherin试剂及免疫组化试剂盒为美国santcru公司产品，均购自上海DAKO公司。
1.3 结果判定
阳性细胞：胞浆或胞膜出现棕黄色颗粒。CD147阳性颗粒定位于细胞浆和细胞膜；E-cadherin主要定位于细胞膜；结果判定根据：参照Sulzers分级法，阴性（-）；阳性细胞数50%以上为（+++）。
1.4 统计学处理
采用SPSS 11.0统计学分析软件包。计数资料比较用χ2检验。P
2 结果
2.1 组织芯片
共制备了肾癌组织芯片3个，每个组织芯片含41个位点，剔除切片不全，图象不良者，分别含31、37、38个位点，包含26例癌旁正常肾组织及82例肾癌组织。分别进行HE染色，胶体铁染色及免疫组织化学染色。
2.2 免疫组化结果
肾癌中CD147的表达率为70.7%（58/82），主要在癌细胞膜与细胞浆表达，染色较强（图1、2）。癌旁正常肾组织仅7例弱阳性表达，阳性率26.9（7/26），显著高于正常肾组织（P
2.3 CD147和E-cadherin阳性表达与肾癌患者的预后分析
82例中由于各种原因失访10例，其中 76例随访5年以上，因肿瘤复发、转移而死亡20例，存活56例，总的5年生存率为 73.7.6% 。死亡组中CD147阳性表达率为 85.0%（17/20），生存组中CD147阳性表达率为 58.9%（33/56），两组之间的差异有统计学意义（P
表2 CD147和E-cadherin阳性表达与患者预后的关系[n（%）]
3 讨论
肾癌的发生、发展是一个涉及多因素、多步骤的过程。肾癌浸润、转移是肿瘤发展中最重要的过程，在这个复杂的过程中，细胞外基质的降解是肿瘤浸润和转移的首要条件[1，2]。锌离子依赖的蛋白酶MMPS能降解细胞外基质，促使肿瘤细胞迁移到其他部位，导致肿瘤的转移。研究证明CD147能诱导成纤维细胞产生MMPS，改变癌细胞与细胞外基质及肿瘤细胞之间的粘附能力，破坏天然组织屏障，导致癌细胞侵袭，浸润和转移[3-6]。本实验对26例正常肾组织和82例肾细胞癌进行CD147的表达分析，结果显示在正常肾组织中CD147的表达明显低于肾癌组织，差异有显著性意义（P0.05）而与肿瘤大小、病理分级相关。组织分化程度越低，CD147的表达强度越强，肿瘤越大，CD147的表达率越高，进一步说明CD147影响肿瘤的恶性程度和发展趋势。可能参与肾癌的转移，浸润及发生发展过程。本实验随访资料中生存组CD147阳性表达率显著低于死亡组（P
钙黏蛋白E-cadherin是钙离子依赖的细胞黏附分子，在细胞分化、游走、归位、形态发生、免疫等方面有重要作用。有研究证明E-cadherin丢失或功能缺失在促进上皮细胞恶变和获得侵袭力中起关键作用[7]。本实验82例肾癌组织E-cadherin的阳性表达率低于正常肾组织（P
肾细胞癌的发生发展的机制是一个十分复杂的过程，本实验提示可能与肾癌细胞中CD147、E-cadherin基因失调有关，表现为CD147表达升高，E-cadherin表达下调，并且具有反向协同作用，共同参与肾癌的发生发展过程，提示肾癌的恶性度越高，侵袭转移能力越强，生存率越低。CD147的表达越强，相反E-cadherin的表达率越高肿瘤的恶性度越低，生存率越高[11]。提示检测肾癌中的CD147和E-cadherin水平可作为评估预后的重要分子指标，也可能是今后肿瘤治疗的一个靶点。
[参考文献]
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肾细胞癌范文4
1、目前，治疗肾透明细胞癌的可能性很小。如果早期肾透明细胞癌的肾功能仍然完好，治疗效果非常好。早期肾细胞癌的5年生存率可达90%以上，晚期肾细胞癌的5年生存率约为50%。
2、晚期肾细胞癌手术后可进行靶向治疗，以提高生存率。肾透明细胞癌是早期和中期外科治疗的首选，免疫疗法和化学疗法的结合可以延长病人的寿命。
（来源：文章屋网 ）
肾细胞癌范文5
【关键词】 肾细胞癌；细胞免疫；T淋巴细胞亚群
有文献报道，恶性肿瘤病人T淋巴细胞存在一定的变化特征，其中CD+4/CD+8的比值是反映机体免疫功能紊乱的敏感指标〔1〕。本文对经病理确诊的肾细胞癌病例在治疗前、治疗后进行T淋巴细胞亚群动态分析，以期阐明在不同临床阶段T淋巴细胞亚群的变化规律。
1 材料与方法
1.1 研究对象
2007年11月至2009年3月在北华大学附属医院泌尿外科住院，并经病理检查确诊的肾细胞癌病例30例（观察组），男21例，女9例，年龄55～71岁。所有病例均为本院初诊病例，治疗前均未应用化疗、放疗和其他对免疫功能有影响的药物。正常对照组20例，均为本院体检中心正常体检者，年龄21～55岁，平均37岁。
1.2 设备与试剂
美国Beckman Coulter公司EPLCSXL型流式细胞仪；三色荧光标记的T淋巴细胞亚群检测试剂盒：CD4FITC/CD8PE/CD3PEcy5，美国Beckman Coulter公司；同型阴性对照：IgG1 FITC/IgG1PE/IgG1PEcy5，美国Beckman Coulter公司；溶血剂：美国Beckman Coulter公司甲酸溶血剂；采血管及抗凝剂：奥地利真空采血管，内加EDTAK2抗凝剂。
1.3 实验方法
观察组及对照组无菌采血2 ml，手术后的采血时间为规范性放、化疗之前。针对每一个标本，取2支流式细胞仪专用试管，分别标记为测定管和对照管。测定管中加入T淋巴细胞亚群检测荧光抗体20 μl，加入全血100 μl；在对照管中加入同型阴性对照20 μl，加入同一人份全血100 μl，混匀；两试管同时放于室温避光标记30 min。溶血：在每管中加入溶血剂甲600 μl，振荡7 s后立即加入溶血剂乙260 μl，振荡混均。洗涤细胞：在溶血后，加入4 ml PBS，混匀，1 000 r/min离心5 min，弃上清，加入1 ml PBS，混匀，待上机检测。流式细胞仪检测：用同型阴性对照调节流式细胞仪电压，使该细胞群充满整个3区但不能超过界线到1、2、4区。调节电压后，将测定管放于样品架上进行检测。
1.4 统计学分析
组间比较采用t检验。
2 结 果
肾细胞癌患者手术治疗前、后及正常对照组T淋巴细胞亚群检测结果见表1。表1 肾细胞癌组术前、后及正常对照组T淋巴细胞亚群检测结果(略)
3 讨 论
在肾恶性肿瘤中，肾细胞癌约占85%左右〔2〕，在肾肿瘤中最为常见。肿瘤的发生发展及其预后与机体的免疫监视及免疫清除功能障碍密切相关。肾细胞癌的治疗以外科手术治疗为主，术后配合免疫治疗取得了令人满意的结果。在抗肿瘤免疫中，细胞免疫尤其是T淋巴细胞的作用更为重要。T淋巴细胞参与机体的抗肿瘤免疫应答，其亚群的数量是反映机体免疫功能的重要指标。
有研究结果证实，T淋巴细胞中各亚群的相对比例与患者的免疫功能状态密切相关，可以估测病情的进展情况〔3，4〕。本文应用流式细胞术对我院收治的30例肾细胞癌患者手术前、后的外周血T淋巴细胞亚群进行了动态监测分析，在手术治疗前与20例正常对照组对比分析了T淋巴细胞亚群百分率的变化特征，结果肾细胞癌患者CD3+和CD4+T淋巴细胞显著低于正常对照组，且CD4/CD8比值也低于对照组，而CD8+T淋巴细胞相对高于正常对照组。此结果与文献报道一致〔2〕，说明肾细胞癌患者体内存在细胞免疫功能紊乱，不能有效清除癌细胞导致肿瘤发生。30例肾细胞癌患者手术后T淋巴细胞亚群检测，并与术前进行对照分析，结果CD3+和CD4+T淋巴细胞较术前明显升高，CD4/CD8比值也升高，而CD8改变不明显。此结果与Schwaab〔5〕报道的结果相近。手术虽然不能清除体内的所有癌细胞，却能有效地去除瘤负荷，使机体的免疫功能得以恢复，表现为T淋巴细胞亚群中CD3+和CD4+T淋巴细胞升高，CD4/CD8比值倒置现象得以逆转。随着对这些病例进行动态监测T淋巴细胞亚群，可能会得出T淋巴细胞亚群的变化特征与患者预后的相互关系。
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肾细胞癌范文6
河南科技大学第一附属医院新区医院泌尿外科，河南洛阳 471023
[摘要] 目的 研究miR-218在肾透明细胞癌中的表达及其与临床病理之间的关系。方法 收集2012年3月—2013年5月间在该院就诊的46例病理确诊为肾透明细胞癌组织和30例癌旁≥3.0 cm正常肾组织作为对照组，采用Realtime PCR方法检测microRNA-218在肾透明细胞癌组织和癌旁≥3.0 cm正常肾组织的表达，分析microRNA-218表达水平与肾透明细胞癌临床病理参数之间的关系。结果 与对照组癌旁正常肾组织相比， miR-218在肾透明细胞癌组织的的表达明显降低 （P<0.001）。同时， miR-218表达的降低与肿瘤的分期，转移和分化程度有密切关系。miR-218的表达与患者的年龄， 性别， 肿瘤位置及肿瘤大小无明显统计学意义。但是， miR-218的表达与肿瘤的转移（P=0.007）， 肿瘤的 T分期 （P=0.022） 及肿瘤的分级 （P=0.015）有统计学意义。结论 miR-218在肾透明细胞癌中和肿瘤分期、分化、转移有着很大的相关性。miR-218在肾透明细胞癌组织呈下调表达，其可能成为肾细胞癌新的潜在的治疗靶点及诊断预后的分子标志物。
关键词 肾透明细胞癌（RCCC）； miR-218； 侵袭； 转移
[中图分类号] R737.11[文献标识码] A[文章编号] 1674-0742（2014）04（b）－0020-02
[作者简介] 任小强，（1978.4-），男，河南洛阳人，硕士研究生，住院医师，研究方向：泌尿外科基础与临床研究，邮箱：rxq1978@163.com。
[通讯作者] 张建国（1965.6-），男，河南驻马店人，硕导，博士，主任医师，研究方向：泌尿外科基础与临床研究，邮箱：xzjg1966@163.com。
随着目前分子生物学技术的突飞猛进以及对恶性肿瘤发生的细胞分子水平研究的深入，从基因水平寻找肾癌防治的新途径成为研究的热点。MicroRNAs（miRNAs）是在真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码RNA，其大小长约20~25个核苷酸。最近的研究[1]表明miRNA参与各种各样的调节途径，包括发育、病毒防御、造血过程、器官形成、细胞增殖和凋亡等。miRNA在多种肿瘤中存在表达异常，可以发挥癌基因或抑癌基因作用，它已经显示出能抑制某些重要肿瘤相关基因表达，在肿瘤发生、发展、预后中扮演十分重要的角色[2]。目前有关miR-218的研究报道不多，miR-218参与了很多肿瘤的发生、发展。该研究于2012年3月—2013年5月间通过检测microRNA-218在肾透明细胞癌组织中的表达，分析其与临床病理之间的关系，探讨miR-218对肾透明细胞癌组织的影响，从而初步揭示miR-218在肾透明细胞癌中的生物学功能。报道如下。
1资料与方法
1.1标本收集
收集河南科技大学第一附属医院的46例肾细胞癌癌组织及30例癌旁≥3.0 cm正常肾组织作为对照组。所有组织标本均经病理学诊断确认为肾细胞癌。其中肾细胞癌中，低分化11例，中分化17例，高分化18例，根据TNM分期，临床Ⅰ期21例， 临床Ⅱ期13例，临床Ⅲ期8例 临床Ⅳ期4例 ，有淋巴结转移的14例，无淋巴结转移的32例，患者年龄28~80岁，平均年龄53.6岁 ，其中男性31例，女性15例。
1.2RNA提取和 qRT-PCR
选用美国Invotrogen公司的RNA提取试剂盒，抽提组织总RNA。用紫外分光光度计于 260 和280 nm 波长处测定 RNA 提取液的吸光度（D）值，检测 RNA 纯度和浓度。用Invitrogen公司NCode miRNA First-Strand cDNA Synthesis 和 qRT-PCR Kits进行加PolyA尾巴和反转录。操作程序为将消化后RNA10 μL 、5×反转录缓冲液 4 μL、25 mmol/LMnCl2 2 μL、2 mmol/L ATP 1 μL、Poly A Polymerase 0.4μL、用DEPC 处理后的无酶水补至 20 μL，放置37 ℃15 min， 再取加Poly A后RNA 8 μL、Annealing Buffer 1 μL、 Universal RT Primer（25uM）3 μL，65 ℃孵育5 min，迅速冰浴2~10 min，短暂离心，继续向以上反应液中加入2xFirst Strand Buffer10 μL、SuperScriptⅢ RT/RNaseOut Enzyme mix 2 μL轻轻吸打混匀，50 ℃孵育50 min。反应结束后 85 ℃保温5 min。
使用罗氏公司的7 500型荧光定量PCR仪，采用2-CT法进行数据的相对定量分析。RealTime反应体系为：2x REALSYBRMixture 10 uL、10 umol/Lmir-218 上游引物0.4 μL、10 umol/Lmir-218 下游引物 0.4 μL、反转录产物 2 μL， 加入灭菌蒸馏水至20 μL。扩增程序为：95 ℃ 10 min，（95 ℃15sec，60 ℃60sec）×40个循环。以U6 基因表达作为内参。miR-218 的相对表达量通过公式2-CT计算，其中 ΔCt ＝ miR-218Ct 值－ U6Ct 值。
1.3统计方法
采用spss17.0软件进行统计学分析。miR-218在肾细胞癌癌组织与癌旁正常肾组织的表达差异采用独立样本的t检验。miR-218的表达与肾细胞癌临床病理学特征的关联采用非参数Mann Whitney U检验。
2结果
与对照组癌旁正常肾组织相比， miR-218在肾透明细胞癌组织的的表达明显降低，差异有统计学意义（P<0.001，图A）。同时， miR-218表达的降低与肿瘤的分期，转移和分化程度有密切关系（图B， 图C，图D）。miR-218的表达与患者的年龄（P=0.817）， 性别（P=0.951）， 肿瘤位置（P=0.914）及肿瘤大小（P=0.354）差异无统计学意义。但是， miR-218的表达与肿瘤的转移，差异有统计学意义（P=0.007）， 肿瘤的 T分期，差异有统计学意义 （P=0.022）及肿瘤的分级，差异有统计学意义（P=0.015），见表1。
3讨论
肿瘤的侵袭和转移仍是肿瘤高死亡率的主要原因。在最新的一些研究报告中，MiR -218可以抑制肿瘤的进展和侵袭，可以明显降低人类恶性肿瘤发生[3]。然而，miR-218在肾癌中的作用尚未进一步的研究。
该研究发现，MiR-218在肾透明细胞癌组织中的表达是减少的，明显低于对照组（P<0.001），尤其是在肿瘤晚期，表达明显降低，显示出它在肿瘤进展与侵袭中的作用更加突出。miR-218在肾癌中的这种现象符合之前的研究报道[4-6]。此外，在肿瘤组中， miR-218在晚期肾透明细胞癌组织中的表达水平明显低于早期肾透明细胞癌（P<0.001）。低分化肾透明细胞癌中miR-218的表达水平明显低于高/中分化肾透明细胞癌（P<0.05），有淋巴结转移的肾透明细胞癌组织中miR-218显示明显低表达（P<0.001）。由于miR-218已经被证明在宫颈腺癌以及许多其他恶性肿瘤中与肿瘤的转移及侵袭明显相关[7-8]，而该研究进一步显示miR-218在肾恶性肿瘤的转移及侵袭中也可能是一个重要的因素[9]。
综上，研究发现，miR-218在肾细胞癌组织中与分期、分化、转移是有密切关系的，其表达水平与临床进展呈负相关，miR-218在肾细胞癌中作为一个肿瘤抑制基因，揭示了其可能成为肾癌新的潜在的治疗靶点。
参考文献
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