抗生素对土壤细菌影响的实验设计

抗生素对土壤细菌影响的实验设计

1实验原理

氯霉素和氧氟沙星对土壤微生物中的细菌可能具有抑制作用,可以测定细菌对淀粉的分解速度快慢,来判断抗生素是否对土壤细菌有杀灭或抑制作用。事前通过对比实验确定氯霉素试剂和土壤浸出液都不能使碘液变蓝。如果在土壤浸出液中加入淀粉溶液,在一定的温度下,土壤微生物对淀粉会分解,用碘液检验颜色是否变蓝来判断分解的快慢。受药物抑制和杀灭的土壤细菌对淀粉的分解速度会受到影响,从而推断出抗生素对土壤微生物的影响。

2实验内容

2.1器材装置

1%的淀粉糊、碘液、土壤浸出液、氯霉素试剂(每支0.1g)、氧氟沙星胶囊(每粒0.1g)、100mL锥形瓶、滴管、试管、温度计、棉花。

2.2材料准备

①配置1%的淀粉糊:取2g淀粉加入200mL的热水中,用酒精灯加热煮沸,冷却;②配置碘液:取2g碘化钾和1g碘,溶于10g蒸馏水中,待溶解后,加入300mL的蒸馏水;③配置土壤浸出液:取100g肥沃的菜园土,放入1000mL烧杯中,加1000mL蒸馏水,用玻棒充分搅拌,用4层的纱布滤去浮渣和草屑,如有泥沙用4层的纱布再过滤一次。

3实验步骤

实验步骤是:①取100mL的锥形瓶10只,用水洗净后放在烘箱中2h,杀死锥形瓶上残留的微生物;②给锥形瓶编号,分别是A1、A2,A3、A4、A5;B1、B2、B3、B4、B5;③用量筒准确量取土壤浸出液50mL,分别倒入10只锥形瓶中;④用量筒准确量取15mL的淀粉溶液,分别加入到10只盛土壤溶液的锥形瓶中;⑤在A1到A5号锥形瓶中依次加入4、3、2、1、0支氯霉素试剂(每支0.1g),在B1到B5号锥形瓶中依次加入4颗、3颗、2颗、1颗、0颗氧氟沙星胶囊的粉末(每颗0.1g)。用棉花塞住瓶口;⑥把两组装置同时放在温暖,但阳光不直射的地方。测定实验时的气温;⑦每天固定时间用滴管取2mL溶液,滴加碘液,检查微生物对淀粉的分解情况,并及时记录看到的现象(表1)。

4实验现象

本实验不同于在人体内的环境,细菌对淀粉等有机物的分解受pH和温度的影响较大,在通常温度下,常常需要一周才能看到明显的现象。实验的结果是:刚开始时滴加碘液后,全部变成蓝色,而未加入抗生素的A5、B5号锥形瓶中的淀粉在一周后,滴加碘液由原来的蓝色逐渐变成紫色、浅棕色,最后变成淡黄色。其余锥形瓶中的溶液在滴加碘液后仍为蓝色或淡蓝色。另外,加入0.4g和0.1g氯霉素试剂和氧氟沙星胶囊粉末的锥形瓶中的淀粉分解的时间相差不大,蓝色的消失不明显,其中氧氟沙星的颜色变化早于氯霉素,说明其对土壤微生物的抑制作用比氯霉素弱。

5实验分析

实验结果表明,抗生素对土壤细菌有一定的抑制作用,但并不是全部抑制。从作用效果上看,与剂量大小并不是成正比,随着抗生素剂量的加大,对细菌的抑制作用效果并不十分明显。实验启示说明:适量的抗菌素能够达到抑制细菌等微生物的效果,滥用抗生素和过量使用抗生素,带来的将是副作用。

作者:郑国建 单位:江苏省如皋市港城实验学校初中部